摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
文献综述 | 第11-18页 |
第一章 衣原体研究进展 | 第11-18页 |
·衣原体概述 | 第11页 |
·衣原体的分类 | 第11-12页 |
·猪流产嗜性衣原体病及流行情况 | 第12页 |
·衣原体分子生物学结构 | 第12-14页 |
·包涵体膜蛋白基因 | 第12-13页 |
·多形态膜蛋白基因 | 第13页 |
·外膜蛋白基因 | 第13-14页 |
·衣原体蛋白组学研究 | 第14-16页 |
·包涵体膜蛋白 | 第14页 |
·多态外膜蛋白 | 第14页 |
·外膜蛋白 | 第14-15页 |
·热休克蛋白 | 第15-16页 |
·动物衣原体病的诊断技术 | 第16-18页 |
·衣原体病分子生物学诊断 | 第16页 |
·衣原体病的血清学诊断 | 第16-18页 |
实验研究 | 第18-46页 |
第二章 猪流产嗜性衣原体MOMP 基因的克隆与序列分析 | 第18-29页 |
·实验材料 | 第18-19页 |
·菌株与质粒 | 第18页 |
·主要工具酶及试剂 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
·主要试剂的配制 | 第19页 |
·引物 | 第19页 |
·方法 | 第19-22页 |
·结果 | 第22-26页 |
·套式PCR 反应结果 | 第22-23页 |
·重组质粒酶切和PCR 鉴定结果 | 第23页 |
·序列分析 | 第23-26页 |
·讨论 | 第26-28页 |
·流产嗜性衣原体MOMP 基因序列分析 | 第26-27页 |
·流产嗜性衣原体MOMP 推导氨基酸的分析 | 第27-28页 |
·小结 | 第28-29页 |
第三章 猪流产嗜性衣原体MOMP 基因的原核表达 | 第29-39页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·质粒、菌株及试剂 | 第29页 |
·实验所用溶液及配制 | 第29-30页 |
·引物的设计与合成 | 第30页 |
·方法 | 第30-35页 |
·重组表达载体的构建 | 第30-32页 |
·重组质粒的鉴定 | 第32页 |
·表达产物的检测 | 第32-33页 |
·表达蛋白的纯化 | 第33-34页 |
·表达蛋白Western-blot 分析 | 第34-35页 |
·结果 | 第35-37页 |
·重组表达载体的构建 | 第35-36页 |
·表达产物的检测 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第四章 大肠杆菌表达重组蛋白抗原间接ELISA 方法的建立 | 第39-46页 |
·材料 | 第39-40页 |
·主要仪器、血清和试剂 | 第39页 |
·主要试剂的配制 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-41页 |
·ELISA 最佳工作条件的确定 | 第40页 |
·ELISA 方法的初步建立 | 第40-41页 |
·阴阳性临界值的确定 | 第41页 |
·特异性实验 | 第41页 |
·敏感性实验 | 第41页 |
·重复性实验 | 第41页 |
·对比性实验 | 第41页 |
·结果 | 第41-44页 |
·最佳包被度和最佳血清稀释度的确定结果 | 第41-42页 |
·酶标二抗最佳工作浓度的确定结果 | 第42页 |
·抗原最佳包被条件的确定结果 | 第42页 |
·ELISA 阴阳性临界值的确定结果 | 第42-43页 |
·特异性试验结果 | 第43页 |
·敏感性试验结果 | 第43页 |
·重复性试验结果 | 第43-44页 |
·对比试验结果 | 第44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53页 |