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我国部分省区猪瘟病毒E0、E2基因遗传变异分析及流行株全基因测定与分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第一章 CSFV 基因组及ORF 编码蛋白的结构和功能第13-17页
   ·非编码区的结构和功能第13-14页
     ·5'端非编码区(5' UTR)第13页
     ·3'端非编码区(3' UTR)第13-14页
   ·结构蛋白结构和功能第14-15页
     ·C 基因和蛋白第14页
     ·E0 基因和蛋白第14页
     ·E1 基因和蛋白第14页
     ·E2 基因和蛋白第14-15页
   ·非结构蛋白结构和功能第15-16页
     ·N~(pro) 基因和蛋白第15页
     ·P7 基因和蛋白第15页
     ·NS2、NS3 基因和蛋白第15-16页
     ·NS4A、NS4B 基因和蛋白第16页
     ·NS5A、NS5B 基因和蛋白第16页
   ·小结第16-17页
第二章 CSFV 分子流行病学研究进展第17-24页
   ·CSFV 全基因组研究进展第17-18页
   ·CSFV 基因分群研究进展第18-19页
     ·基因分群标准的确立第18页
     ·我国CSFV 基因分群研究第18-19页
   ·CSFV 抗原表位研究进展第19-21页
     ·抗原性相关蛋白的确认第19-20页
     ·抗原表位区域划分第20页
     ·抗原表位的精确定位第20-21页
   ·我国CSFV E0、E2 研究概况第21-23页
     ·我国CSFV E0 研究概况第21-22页
     ·我国CSFV E2 研究概况第22-23页
   ·小结第23-24页
第三章 我国部分省区CSFV E2 基因遗传变异分析第24-36页
   ·材料第24-25页
     ·样品来源第24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·主要仪器第25页
     ·主要溶液配方第25页
   ·方法第25-30页
     ·引物合成第25页
     ·病料的处理第25-26页
     ·病料中总RNA 的提取第26页
     ·反转录第26-27页
     ·套式PCR 扩增E2 主要抗原区第27页
     ·PCR 扩增产物的凝胶电泳第27页
     ·胶回收纯化PCR 产物第27-28页
     ·目的基因片段与pGEM-T easy 载体的连接第28页
     ·感受态细胞的制备第28页
     ·转化实验第28-29页
     ·质粒提取第29页
     ·酶切鉴定重组质粒第29页
     ·序列测定及结果分析第29-30页
   ·结果与分析第30-32页
     ·扩增及测序结果分析第30页
     ·2008~2009 年流行株同源性比较第30-31页
     ·E2 主要抗原区基因系统进化树分析第31-32页
     ·2005~2009 年流行毒株与HCLV 同源性比较第32页
   ·讨论第32-35页
     ·E2 基因主要抗原区氨基酸变异特点第32-34页
     ·流行株基因分群特点第34-35页
     ·流行毒株变异的趋势第35页
   ·小结第35-36页
第四章 我国部分省区CSFV E0 基因遗传变异分析第36-42页
   ·材料第36-37页
     ·病料来源第36页
     ·主要试剂第36页
     ·主要仪器第36-37页
   ·方法第37-38页
     ·引物合成第37页
     ·病料处理与总RNA 提取第37页
     ·反转录与PCR 扩增第37页
     ·PCR 产物纯化回收及与T 载体连接第37页
     ·转化、提取质粒和酶切鉴定第37页
     ·序列测定及结果分析第37-38页
   ·结果与分析第38-40页
     ·PCR 扩增及测序结果分析第38页
     ·流行毒株E0 与参考毒株同源性第38页
     ·流行毒株E0 基因系统进化树第38-40页
   ·讨论第40-41页
     ·流行毒株遗传变异分析第40-41页
     ·流行毒株基因分型第41页
     ·流行毒株与HCLV 同源性分析第41页
   ·小结第41-42页
第五章 2009 年我国2 株CSFV 流行株全基因组测定与分析第42-53页
   ·材料第42-43页
     ·病料来源第42-43页
     ·主要仪器第43页
     ·试剂和菌种第43页
     ·主要溶液配方第43页
   ·方法第43-46页
     ·引物合成第43-44页
     ·CSFV 流行毒株病毒的分离第44-45页
     ·细胞毒总RNA 的提取与反转录第45页
     ·各片段的PCR 扩增第45页
     ·PCR 产物纯化回收及与T 载体连接第45页
     ·转化,提取质粒和酶切鉴定第45-46页
     ·序列测定拼接及结果分析第46页
   ·结果与分析第46-51页
     ·全基因11 个片段RT-PCR 扩增结果第46-47页
     ·序列测定拼接结果第47页
     ·核苷酸与氨基酸同源性分析第47-49页
     ·SXCDK、HEBZ 细胞表位变异分析第49-50页
     ·系统发生树的绘制第50-51页
   ·讨论第51-52页
     ·全基因组扩增策略第51页
     ·SXCDK 和HEBZ 与参考毒株的同源性第51-52页
     ·SXCDK 和HEBZ 所在亚群毒株流行态势第52页
   ·小结第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-59页
附录第59-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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