致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-15页 |
第一章 绪论 | 第15-22页 |
1.1 引言 | 第15页 |
1.2 水稻粒型遗传 | 第15-18页 |
1.2.1 水稻粒型遗传概况 | 第15-16页 |
1.2.2 水稻突变体的获得 | 第16页 |
1.2.3 水稻粒型性状遗传学研究 | 第16-18页 |
1.2.3.1 水稻粒型相关遗传效应研究 | 第16-17页 |
1.2.3.2 水稻粒型相关QTL定位 | 第17页 |
1.2.3.3 水稻粒型相关基因的克隆 | 第17-18页 |
1.3 水稻粒型调控的分子机理 | 第18-20页 |
1.3.1 G蛋白活性 | 第18页 |
1.3.2 蛋白酶体降解 | 第18-19页 |
1.3.3 植物激素途径 | 第19-20页 |
1.4 水稻中BR信号传导途径 | 第20-21页 |
1.5 研究目的和意义 | 第21-22页 |
第二章 水稻小圆粒突变体shg1的形态学及主要农艺性状分析 | 第22-27页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.1 材料 | 第22页 |
2.1.2 试剂 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-23页 |
2.2.1 田间种植条件 | 第22页 |
2.2.2 农艺性状的考察 | 第22-23页 |
2.2.3 细胞形态学观察 | 第23页 |
2.2.4 种子发芽率测定 | 第23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-26页 |
2.3.1 水稻小粒突变体shg1的表型鉴定 | 第23-25页 |
2.3.2 shg1突变体和野生型的细胞学分析 | 第25-26页 |
2.4 讨论与小结 | 第26-27页 |
第三章 水稻小圆粒突变体shg1的图位克隆 | 第27-33页 |
3.1 实验材料 | 第27页 |
3.1.1 材料 | 第27页 |
3.1.2 试剂 | 第27页 |
3.2 实验方法 | 第27-30页 |
3.2.1 DNA的提取 | 第27-28页 |
3.2.2 引物设计 | 第28页 |
3.2.3 PCR产物电泳检测 | 第28-29页 |
3.2.4 统计和分析 | 第29页 |
3.2.5 生物信息学分析和测序 | 第29-30页 |
3.3 结果与分析 | 第30-31页 |
3.3.1 SHG1基因的初步定位 | 第30页 |
3.3.2 SHG1基因的精细定位 | 第30-31页 |
3.4 讨论与小结 | 第31-33页 |
第四章 水稻小圆粒突变体shg1的生物信息学分析和基因互补 | 第33-44页 |
4.1 实验材料 | 第33页 |
4.1.1 材料 | 第33页 |
4.1.2 试剂 | 第33页 |
4.2 实验方法 | 第33-38页 |
4.2.1 SHG1蛋白的进化建树 | 第33页 |
4.2.2 SHG1蛋白的三维结构分析 | 第33-34页 |
4.2.3 RNA的提取 | 第34页 |
4.2.4 cDNA的合成 | 第34-35页 |
4.2.5 实时荧光定量PCR检测基因表达 | 第35-36页 |
4.2.6 构建过表达载体 | 第36-38页 |
4.3 结果与分析 | 第38-43页 |
4.3.1 SHG1蛋白的系统进化树分析 | 第38-40页 |
4.3.2 SHG1蛋白三维结构分析 | 第40-41页 |
4.3.3 shg1突变体的转基因互补实验 | 第41-43页 |
4.4 讨论与小结 | 第43-44页 |
第五章 SHG1基因功能研究和分析 | 第44-69页 |
5.1 实验材料 | 第44-45页 |
5.1.1 材料 | 第44页 |
5.1.2 试剂 | 第44-45页 |
5.2 实验方法 | 第45-54页 |
5.2.1 SHG1组织表达分析 | 第45页 |
5.2.2 SHG1在野生型和shg1中不同节间表达分析 | 第45页 |
5.2.3 化学染色鉴定SHG1基因的组织表达模式 | 第45-48页 |
5.2.3.1 pSHG1-GUS载体构建 | 第45-46页 |
5.2.3.2 pSHG1-GUS转基因株系的化学染色 | 第46-47页 |
5.2.3.3 石蜡切片 | 第47-48页 |
5.2.4 蛋白的亚细胞定位 | 第48-49页 |
5.2.4.1 水稻原生质体制备 | 第48页 |
5.2.4.2 水稻原生质体转化 | 第48-49页 |
5.2.5 细胞周期基因表达量检测 | 第49页 |
5.2.6 SHG1基因受外源IAA诱导表达 | 第49页 |
5.2.7 双荧光素酶实验 | 第49-52页 |
5.2.7.1 效应因子载体的构建 | 第49页 |
5.2.7.2 报告基因载体的改造 | 第49-50页 |
5.2.7.3 报告基因载体的构建 | 第50-51页 |
5.2.7.4 转化农杆菌 | 第51-52页 |
5.2.7.4 烟草浸染 | 第52页 |
5.2.7.5 双荧光素酶酶活性的测定 | 第52页 |
5.2.8 外源IAA对野生型和shg1根长影响 | 第52-53页 |
5.2.9 野生型和shg1对外源BR敏感性检验 | 第53页 |
5.2.10 BR合成和信号传导途径各基因检测 | 第53页 |
5.2.11 外源BR对SHG1基因表达量影响 | 第53-54页 |
5.3 结果与分析 | 第54-67页 |
5.3.1 SHG1基因的表达分析 | 第54-55页 |
5.3.2 化学染色法指示SHG1基因的组织特异性表达分析 | 第55-57页 |
5.3.3 SHG1蛋白的亚细胞定位 | 第57页 |
5.3.4 细胞周期相关基表达量检测 | 第57-58页 |
5.3.5 转录组测序结果分析 | 第58-59页 |
5.3.6 SHG1基因受IAA诱导表达 | 第59-60页 |
5.3.7 SHG1基因受OsARFs转录因子激活检测 | 第60-62页 |
5.3.8 shg1突变体对外源IAA的反应 | 第62-63页 |
5.3.9 shg1突变体对外源BR较不敏感 | 第63-65页 |
5.3.10 shg1突变体中BR合成和信号通路基因表达量的改变 | 第65-66页 |
5.3.11 SHG1基因受外源BR抑制 | 第66-67页 |
5.4 讨论与小结 | 第67-69页 |
第六章 总结和展望 | 第69-72页 |
6.1 工作总结 | 第69-71页 |
6.2 展望 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |