摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 猪伪狂犬病毒(P RV) | 第11-17页 |
1.1.1 病原学 | 第11页 |
1.1.2 病毒的分子生物学特点 | 第11-15页 |
1.1.3 PRV的临床症状 | 第15-16页 |
1.1.4 PRV疫苗研究和防治措施 | 第16-17页 |
1.2 PRV诱导的细胞凋亡 | 第17页 |
1.2.1 细胞凋亡 | 第17页 |
1.2.2 PRV与细胞凋亡 | 第17页 |
1.3 PRV诱导的细胞自噬 | 第17-19页 |
1.3.1 细胞自噬 | 第17-18页 |
1.3.2 PRV与细胞自噬 | 第18-19页 |
1.4 细胞自噬和凋亡的关系 | 第19页 |
1.5 PRV早期蛋白US3及其与细胞自噬和凋亡的关系 | 第19-20页 |
1.6 研究目的与意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-29页 |
2.1 PRV感染对细胞自噬和凋亡的影响 | 第21-23页 |
2.1.1 实验毒株和细胞 | 第21页 |
2.1.2 主要仪器和试剂 | 第21页 |
2.1.3 细胞培养和病毒感染 | 第21页 |
2.1.4 细胞总蛋白的提取 | 第21-22页 |
2.1.5 二辛可宁酸(BCA)法测定蛋白浓度 | 第22页 |
2.1.6 Western blot分析 | 第22页 |
2.1.7 流式细胞检测 | 第22-23页 |
2.1.8 激光共聚焦实验 | 第23页 |
2.2 PRV诱导的细胞自噬和凋亡的关系以及其对病毒复制的影响 | 第23-27页 |
2.2.1 实验毒株、细胞和重组质粒 | 第23页 |
2.2.2 主要仪器和试剂 | 第23页 |
2.2.3 细胞培养和病毒感染 | 第23-24页 |
2.2.4 药物处理实验 | 第24页 |
2.2.5 细胞总蛋白的提取 | 第24页 |
2.2.6 二辛可宁酸(BCA)法测定蛋白浓度 | 第24页 |
2.2.7 Br adford法测定蛋白浓度 | 第24页 |
2.2.8 Western blot分析 | 第24页 |
2.2.9 流式细胞检测 | 第24页 |
2.2.10 Caspase-3 活性检测 | 第24-25页 |
2.2.11 凋亡ELIS A检测 | 第25-26页 |
2.2.12 RNA干扰 | 第26页 |
2.2.13 DNA提取实验 | 第26页 |
2.2.14 Q-P CR实验 | 第26-27页 |
2.2.15 噬斑实验 | 第27页 |
2.3 PRV衣壳蛋白US3通过激活PI3- K/AKT通路抑制细胞自噬 | 第27-29页 |
2.3.1 实验毒株、细胞和重组质粒 | 第27页 |
2.3.2 主要仪器和试剂 | 第27-28页 |
2.3.3 细胞培养和病毒感染 | 第28页 |
2.3.4 药物处理实验 | 第28页 |
2.3.5 细胞总蛋白的提取 | 第28页 |
2.3.6 二辛可宁酸(BCA)法测定蛋白浓度 | 第28页 |
2.3.7 Western blot分析 | 第28页 |
2.3.8 细胞转染 | 第28页 |
2.3.9 激光共聚焦实验 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-41页 |
3.1 PRV感染对细胞自噬和凋亡的影响 | 第29-32页 |
3.1.1 PRV诱导Vero细胞发生细胞自噬 | 第29-30页 |
3.1.2 PRV诱导Vero细胞发生caspase依赖性细胞凋亡 | 第30-32页 |
3.2 PRV诱导的细胞自噬和凋亡的关系以及其对病毒复制的影响 | 第32-38页 |
3.2.1 抑制自噬体的形成促进PRV引起的细胞凋亡 | 第32-33页 |
3.2.2 抑制自噬体和溶酶体的融合促进PRV诱导的细胞凋亡 | 第33-35页 |
3.2.3 促进细胞自噬抑制PRV引起的细胞凋亡 | 第35-37页 |
3.2.4 抑制P RV引起的Vero细胞的细胞凋亡提高自噬水平 | 第37页 |
3.2.5 自噬和凋亡对P RV复制的影响 | 第37-38页 |
3.3 PRV US3蛋白通过激活PI 3- K/AKT通路抑制细胞自噬 | 第38-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
4.1 PRV感染对细胞自噬和凋亡的影响 | 第41页 |
4.2 PRV诱导的细胞自噬和凋亡的关系以及其对病毒复制的影响 | 第41-42页 |
4.3 PRV US3蛋白通过激活PI 3- K/AKT通路抑制细胞自噬 | 第42-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-54页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |