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猪伪狂犬病毒引起的细胞自噬和凋亡的初步研究

摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
1 前言第11-21页
    1.1 猪伪狂犬病毒(P RV)第11-17页
        1.1.1 病原学第11页
        1.1.2 病毒的分子生物学特点第11-15页
        1.1.3 PRV的临床症状第15-16页
        1.1.4 PRV疫苗研究和防治措施第16-17页
    1.2 PRV诱导的细胞凋亡第17页
        1.2.1 细胞凋亡第17页
        1.2.2 PRV与细胞凋亡第17页
    1.3 PRV诱导的细胞自噬第17-19页
        1.3.1 细胞自噬第17-18页
        1.3.2 PRV与细胞自噬第18-19页
    1.4 细胞自噬和凋亡的关系第19页
    1.5 PRV早期蛋白US3及其与细胞自噬和凋亡的关系第19-20页
    1.6 研究目的与意义第20-21页
2 材料与方法第21-29页
    2.1 PRV感染对细胞自噬和凋亡的影响第21-23页
        2.1.1 实验毒株和细胞第21页
        2.1.2 主要仪器和试剂第21页
        2.1.3 细胞培养和病毒感染第21页
        2.1.4 细胞总蛋白的提取第21-22页
        2.1.5 二辛可宁酸(BCA)法测定蛋白浓度第22页
        2.1.6 Western blot分析第22页
        2.1.7 流式细胞检测第22-23页
        2.1.8 激光共聚焦实验第23页
    2.2 PRV诱导的细胞自噬和凋亡的关系以及其对病毒复制的影响第23-27页
        2.2.1 实验毒株、细胞和重组质粒第23页
        2.2.2 主要仪器和试剂第23页
        2.2.3 细胞培养和病毒感染第23-24页
        2.2.4 药物处理实验第24页
        2.2.5 细胞总蛋白的提取第24页
        2.2.6 二辛可宁酸(BCA)法测定蛋白浓度第24页
        2.2.7 Br adford法测定蛋白浓度第24页
        2.2.8 Western blot分析第24页
        2.2.9 流式细胞检测第24页
        2.2.10 Caspase-3 活性检测第24-25页
        2.2.11 凋亡ELIS A检测第25-26页
        2.2.12 RNA干扰第26页
        2.2.13 DNA提取实验第26页
        2.2.14 Q-P CR实验第26-27页
        2.2.15 噬斑实验第27页
    2.3 PRV衣壳蛋白US3通过激活PI3- K/AKT通路抑制细胞自噬第27-29页
        2.3.1 实验毒株、细胞和重组质粒第27页
        2.3.2 主要仪器和试剂第27-28页
        2.3.3 细胞培养和病毒感染第28页
        2.3.4 药物处理实验第28页
        2.3.5 细胞总蛋白的提取第28页
        2.3.6 二辛可宁酸(BCA)法测定蛋白浓度第28页
        2.3.7 Western blot分析第28页
        2.3.8 细胞转染第28页
        2.3.9 激光共聚焦实验第28-29页
3 结果第29-41页
    3.1 PRV感染对细胞自噬和凋亡的影响第29-32页
        3.1.1 PRV诱导Vero细胞发生细胞自噬第29-30页
        3.1.2 PRV诱导Vero细胞发生caspase依赖性细胞凋亡第30-32页
    3.2 PRV诱导的细胞自噬和凋亡的关系以及其对病毒复制的影响第32-38页
        3.2.1 抑制自噬体的形成促进PRV引起的细胞凋亡第32-33页
        3.2.2 抑制自噬体和溶酶体的融合促进PRV诱导的细胞凋亡第33-35页
        3.2.3 促进细胞自噬抑制PRV引起的细胞凋亡第35-37页
        3.2.4 抑制P RV引起的Vero细胞的细胞凋亡提高自噬水平第37页
        3.2.5 自噬和凋亡对P RV复制的影响第37-38页
    3.3 PRV US3蛋白通过激活PI 3- K/AKT通路抑制细胞自噬第38-41页
4 讨论第41-43页
    4.1 PRV感染对细胞自噬和凋亡的影响第41页
    4.2 PRV诱导的细胞自噬和凋亡的关系以及其对病毒复制的影响第41-42页
    4.3 PRV US3蛋白通过激活PI 3- K/AKT通路抑制细胞自噬第42-43页
5 结论第43-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-54页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第54页

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