| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第16-28页 |
| 1.1 掷孢酵母概述 | 第16-18页 |
| 1.2 类胡萝卜素概述 | 第18-24页 |
| 1.2.1 类胡萝卜素的基本结构及理化性质 | 第18-20页 |
| 1.2.2 类胡萝卜素的生物学活性 | 第20页 |
| 1.2.3 类胡萝卜素的生物合成 | 第20-24页 |
| 1.3 异源互补检测法概述 | 第24-26页 |
| 1.4 本研究的思路和策略 | 第26-28页 |
| 1.4.1 前期研究进展 | 第26页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第26-27页 |
| 1.4.3 本研究的目的和内容 | 第27-28页 |
| 第二章 八氢番茄红素脱氢酶基因crtI的克隆表达与功能分析 | 第28-54页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 材料 | 第28-30页 |
| 2.2.1 供试菌种与试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.2 质粒 | 第29页 |
| 2.2.3 培养基和溶液 | 第29-30页 |
| 2.2.4 主要仪器与设备 | 第30页 |
| 2.3 方法 | 第30-41页 |
| 2.3.1 掷孢酵母的培养与收集 | 第30页 |
| 2.3.2 基因组DNA提取 | 第30-31页 |
| 2.3.3 总RNA提取及cDNA第一条链合成 | 第31-33页 |
| 2.3.4 八氢番茄红素脱氢酶基因的克隆及克隆载体构建 | 第33-35页 |
| 2.3.5 构建原核表达载体 | 第35-37页 |
| 2.3.6 重组质粒pAC-LYC△(crtI)的构建 | 第37-40页 |
| 2.3.7 掷孢酵母NGR crtI基因功能的验证 | 第40-41页 |
| 2.3.8 类胡萝卜素的提取与检测 | 第41页 |
| 2.3.9 掷孢酵母NGR crtI基因的生物信息学分析 | 第41页 |
| 2.4 结果与分析 | 第41-53页 |
| 2.4.1 掷孢酵母NGR八氢番茄红素脱氢酶基因crtI的克隆 | 第41-42页 |
| 2.4.2 质粒pAC-LYC△(crtI)的构建 | 第42-44页 |
| 2.4.3 掷孢酵母NGR八氢番茄红素脱氢酶crtI基因功能验证 | 第44-47页 |
| 2.4.4 掷孢酵母NGR crtI基因的生物信息学分析 | 第47-53页 |
| 2.5 结论与讨论 | 第53-54页 |
| 第三章 番茄红素环化酶与八氢番茄红素合成酶基因crtYB的克隆表达与功能分析 | 第54-72页 |
| 3.1 引言 | 第54页 |
| 3.2 材料 | 第54-56页 |
| 3.2.1 菌种和试剂 | 第54页 |
| 3.2.2 质粒 | 第54-55页 |
| 3.2.3 培养基和溶液 | 第55页 |
| 3.2.5 主要仪器与设备 | 第55-56页 |
| 3.3 方法 | 第56-63页 |
| 3.3.1 掷孢酵母的培养与收集 | 第56页 |
| 3.3.2 基因组DNA提取 | 第56页 |
| 3.3.3 总RNA提取及cDNA第一条链合成 | 第56页 |
| 3.3.4 八氢番茄红素合成酶/番茄红素环化酶基因crtYB的克隆 | 第56-58页 |
| 3.3.5 构建原核表达载体 | 第58-59页 |
| 3.3.6 重组质粒pAC-LYC△(crtB)的构建 | 第59-62页 |
| 3.3.7 掷孢酵母NGR crtYB基因功能验证 | 第62页 |
| 3.3.8 类胡萝卜素的提取与检测 | 第62页 |
| 3.3.9 掷孢酵母NGR crtYB基因的生物信息学分析 | 第62-63页 |
| 3.4 结果与分析 | 第63-70页 |
| 3.4.1 掷孢酵母NGR crtYB的克隆及序列分析 | 第63-65页 |
| 3.4.2 质粒pAC-LYCΔ(crtB)的构建 | 第65页 |
| 3.4.3 掷孢酵母NGR crtYB基因功能验证 | 第65-67页 |
| 3.4.4 掷孢酵母NGR crtYB基因的生物信息学分析 | 第67-70页 |
| 3.5 结论与讨论 | 第70-72页 |
| 第四章 掷孢酵母crtI和crtYB基因在胁迫条件下的qPCR分析 | 第72-92页 |
| 4.1 引言 | 第72页 |
| 4.1.1 NaCl胁迫 | 第72页 |
| 4.1.2 温度胁迫 | 第72页 |
| 4.2 材料 | 第72-73页 |
| 4.2.1 菌种和试剂 | 第72-73页 |
| 4.2.2 仪器与设备 | 第73页 |
| 4.2.3 引物序列 | 第73页 |
| 4.3 方法 | 第73-75页 |
| 4.3.1 掷孢酵母NGR在不同胁迫条件下的培养与收集 | 第73-74页 |
| 4.3.2 掷孢酵母NGR总RNA提取及cDNA第一条链合成 | 第74页 |
| 4.3.3 不同胁迫条件下掷孢酵母NGR crtI和crtYB基因转录水平检测 | 第74-75页 |
| 4.4 结果与分析 | 第75-90页 |
| 4.4.1 实时定量PCR扩增内参基因和目的基因的参数分析 | 第75-87页 |
| 4.4.2 不同胁迫条件下掷孢酵母crtI和crtYB基因的差异表达 | 第87-90页 |
| 4.5 结论与讨论 | 第90-92页 |
| 第五章 结论与展望 | 第92-94页 |
| 5.1 结论 | 第92-93页 |
| 5.1.1 掷孢酵母类胡萝卜素合成关键酶基因的克隆 | 第92-93页 |
| 5.1.2 掷孢酵母类胡萝卜素合成关键酶基因的表达分析 | 第93页 |
| 5.2 展望 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-102页 |
| 附录 | 第102-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第109-110页 |
| 论文图表统计 | 第110页 |
