论文创新点 | 第5-10页 |
中文摘要 | 第10-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
第一章 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus) | 第13-24页 |
1.1 乙型肝炎病毒的分类学研究 | 第13-15页 |
1.2 乙型肝炎病毒的结构 | 第15-19页 |
1.2.1 HBV的形态结构 | 第15-17页 |
1.2.2 HBV的基因组结构 | 第17-19页 |
1.3 乙型肝炎病毒的复制和转录 | 第19-21页 |
1.4 乙型肝炎病毒的传播和感染 | 第21-22页 |
1.5 乙型肝炎病毒感染慢性化造成的恶劣影响 | 第22页 |
1.6 慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)的预防与治疗 | 第22-24页 |
1.6.1 乙肝的预防-接种乙肝疫苗 | 第22-23页 |
1.6.2 乙肝的治疗 | 第23-24页 |
第二章 人白细胞介素-27(human Interleukin-27) | 第24-39页 |
2.1 IL-27的结构 | 第25页 |
2.2 IL-27表达的调节 | 第25-27页 |
2.3 IL-27的受体 | 第27-30页 |
2.4 IL-27信号转导通路 | 第30-31页 |
2.5 IL-27对于炎症反应的双重作用 | 第31-37页 |
2.5.1 IL-27的促炎作用 | 第31-33页 |
2.5.2 IL-27的抗炎作用 | 第33-37页 |
2.6 IL-27对于其他类型细胞(非免疫细胞)的作用 | 第37页 |
2.7 IL-27与疾病的关系 | 第37-39页 |
第三章 Ⅲ型干扰素(type Ⅲ interferon,interferon-λ1) | 第39-48页 |
3.1 Ⅲ型干扰素的分类 | 第40页 |
3.2 Ⅲ型干扰素的基因结构 | 第40-42页 |
3.3 Ⅲ型干扰素表达方式 | 第42-44页 |
3.4 Ⅲ型干扰素的受体及信号 | 第44-46页 |
3.5 Ⅲ型干扰素的功能 | 第46-48页 |
第四章 IL-27对乙肝病毒复制的影响 | 第48-57页 |
4.1 前言 | 第48页 |
4.2 实验材料及仪器 | 第48-49页 |
4.2.1 细胞株 | 第48页 |
4.2.2 细菌菌种 | 第48页 |
4.2.3 质粒 | 第48页 |
4.2.4 试剂 | 第48-49页 |
4.2.5 仪器设备 | 第49页 |
4.3 实验方法 | 第49-53页 |
4.3.1 细胞培养 | 第49-50页 |
4.3.2 细胞转染 | 第50页 |
4.3.3 质粒提取 | 第50-51页 |
4.3.4 MTS法检测细胞活性 | 第51-52页 |
4.3.5 HBV复制水平的检测 | 第52-53页 |
4.4 实验结果 | 第53-55页 |
4.4.1 重组人白细胞介素-27(rhIL-27)蛋白的细胞毒性检测 | 第53-54页 |
4.4.2 重组人白细胞介素-27(rhIL-27)蛋白对HBV复制的影响 | 第54-55页 |
4.5 讨论 | 第55-57页 |
第五章 IL-27激活干扰素诱导基因的表达 | 第57-65页 |
5.1 前言 | 第57页 |
5.2 实验材料及仪器 | 第57-58页 |
5.2.1 细胞株 | 第57页 |
5.2.2 细菌菌种 | 第57页 |
5.2.3 质粒 | 第57页 |
5.2.4 试剂 | 第57-58页 |
5.2.5 仪器设备 | 第58页 |
5.3 实验方法 | 第58-61页 |
5.3.1 蛋白质免疫印迹法(Western Blot) | 第58-59页 |
5.3.2 荧光素酶活性检测 | 第59-60页 |
5.3.3 细胞总RNA提取及cDNA制备 | 第60-61页 |
5.3.4 荧光定量PCR(realtime PCR) | 第61页 |
5.4 实验结果 | 第61-63页 |
5.4.1 IL-27能激活STAT1/2的磷酸化 | 第61-63页 |
5.4.2 IL-27能激活干扰素诱导基因(ISGs)的表达 | 第63页 |
5.5 讨论 | 第63-65页 |
第六章 IL-27与Ⅲ型干扰素IFN-λ1表达的相关性 | 第65-69页 |
6.1 前言 | 第65页 |
6.2 实验材料及仪器 | 第65页 |
6.2.1 实验材料 | 第65页 |
6.3 实验方法 | 第65-66页 |
6.3.1 分离外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMCs) | 第65-66页 |
6.4 实验结果 | 第66-68页 |
6.4.1 PBMCs中IL-27及IFN-λ1含量的检测及相关性分析 | 第66-67页 |
6.4.2 IL-27对PBMCs中Ⅰ、Ⅲ型干扰素及ISGs表达的影响 | 第67-68页 |
6.5 讨论 | 第68-69页 |
第七章 IFN-α和IFN-λ1在IL-27抑制乙肝病毒复制过程中的作用 | 第69-75页 |
7.1 前言 | 第69页 |
7.2 实验材料及仪器 | 第69页 |
7.3 实验方法 | 第69-71页 |
7.3.1 流式细胞术检测细胞表面蛋白分布情况 | 第69-70页 |
7.3.2 ELISA法检测IFN-λ1含量 | 第70-71页 |
7.4 实验结果 | 第71-74页 |
7.4.1 实验中使用的几种siRNA和shRNA的干扰效果检测 | 第71-72页 |
7.4.2 Ⅰ、Ⅲ型干扰素在IL-27抑制HBV复制过程中的作用 | 第72-74页 |
7.5 讨论 | 第74-75页 |
第八章 IL-27诱导Ⅲ型干扰素IFN-λ1表达的分子机制研究 | 第75-88页 |
8.1 前言 | 第75页 |
8.2 实验材料及仪器 | 第75页 |
8.3 实验方法 | 第75-79页 |
8.3.1 分化DC细胞 | 第75-76页 |
8.3.2 细胞核蛋白抽提 | 第76页 |
8.3.3 免疫荧光(Immunofluorescence) | 第76-77页 |
8.3.4 染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation assay,ChIP) | 第77-79页 |
8.4 实验结果 | 第79-86页 |
8.4.1 si-WSX-1可以有效的干扰WSX-1基因的表达 | 第79页 |
8.4.2 IL-27能够在DCs、Huh7及HepG2三种细胞中诱导IFN-λ1的表达 | 第79-81页 |
8.4.3 IL-27诱导IFN-λ1表达信号通路机制初探 | 第81-86页 |
8.5 讨论 | 第86-88页 |
第九章 IL-27对Ⅲ型干扰素受体表达的影响 | 第88-91页 |
9.1 前言 | 第88页 |
9.2 实验材料及仪器 | 第88页 |
9.3 实验方法 | 第88页 |
9.4 实验结果 | 第88-90页 |
9.4.1 rhIL-27蛋白能够促进Ⅲ型干扰素受体的表达 | 第88-90页 |
9.5 讨论 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-113页 |
博士在读期间发表与待发表论文 | 第113-115页 |
致谢 | 第115页 |