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人白细胞介素-27通过Ⅰ、Ⅲ型干扰素抑制乙型肝炎病毒复制的研究

论文创新点第5-10页
中文摘要第10-11页
Abstract第11-12页
第一章 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus)第13-24页
    1.1 乙型肝炎病毒的分类学研究第13-15页
    1.2 乙型肝炎病毒的结构第15-19页
        1.2.1 HBV的形态结构第15-17页
        1.2.2 HBV的基因组结构第17-19页
    1.3 乙型肝炎病毒的复制和转录第19-21页
    1.4 乙型肝炎病毒的传播和感染第21-22页
    1.5 乙型肝炎病毒感染慢性化造成的恶劣影响第22页
    1.6 慢性乙型肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)的预防与治疗第22-24页
        1.6.1 乙肝的预防-接种乙肝疫苗第22-23页
        1.6.2 乙肝的治疗第23-24页
第二章 人白细胞介素-27(human Interleukin-27)第24-39页
    2.1 IL-27的结构第25页
    2.2 IL-27表达的调节第25-27页
    2.3 IL-27的受体第27-30页
    2.4 IL-27信号转导通路第30-31页
    2.5 IL-27对于炎症反应的双重作用第31-37页
        2.5.1 IL-27的促炎作用第31-33页
        2.5.2 IL-27的抗炎作用第33-37页
    2.6 IL-27对于其他类型细胞(非免疫细胞)的作用第37页
    2.7 IL-27与疾病的关系第37-39页
第三章 Ⅲ型干扰素(type Ⅲ interferon,interferon-λ1)第39-48页
    3.1 Ⅲ型干扰素的分类第40页
    3.2 Ⅲ型干扰素的基因结构第40-42页
    3.3 Ⅲ型干扰素表达方式第42-44页
    3.4 Ⅲ型干扰素的受体及信号第44-46页
    3.5 Ⅲ型干扰素的功能第46-48页
第四章 IL-27对乙肝病毒复制的影响第48-57页
    4.1 前言第48页
    4.2 实验材料及仪器第48-49页
        4.2.1 细胞株第48页
        4.2.2 细菌菌种第48页
        4.2.3 质粒第48页
        4.2.4 试剂第48-49页
        4.2.5 仪器设备第49页
    4.3 实验方法第49-53页
        4.3.1 细胞培养第49-50页
        4.3.2 细胞转染第50页
        4.3.3 质粒提取第50-51页
        4.3.4 MTS法检测细胞活性第51-52页
        4.3.5 HBV复制水平的检测第52-53页
    4.4 实验结果第53-55页
        4.4.1 重组人白细胞介素-27(rhIL-27)蛋白的细胞毒性检测第53-54页
        4.4.2 重组人白细胞介素-27(rhIL-27)蛋白对HBV复制的影响第54-55页
    4.5 讨论第55-57页
第五章 IL-27激活干扰素诱导基因的表达第57-65页
    5.1 前言第57页
    5.2 实验材料及仪器第57-58页
        5.2.1 细胞株第57页
        5.2.2 细菌菌种第57页
        5.2.3 质粒第57页
        5.2.4 试剂第57-58页
        5.2.5 仪器设备第58页
    5.3 实验方法第58-61页
        5.3.1 蛋白质免疫印迹法(Western Blot)第58-59页
        5.3.2 荧光素酶活性检测第59-60页
        5.3.3 细胞总RNA提取及cDNA制备第60-61页
        5.3.4 荧光定量PCR(realtime PCR)第61页
    5.4 实验结果第61-63页
        5.4.1 IL-27能激活STAT1/2的磷酸化第61-63页
        5.4.2 IL-27能激活干扰素诱导基因(ISGs)的表达第63页
    5.5 讨论第63-65页
第六章 IL-27与Ⅲ型干扰素IFN-λ1表达的相关性第65-69页
    6.1 前言第65页
    6.2 实验材料及仪器第65页
        6.2.1 实验材料第65页
    6.3 实验方法第65-66页
        6.3.1 分离外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells,PBMCs)第65-66页
    6.4 实验结果第66-68页
        6.4.1 PBMCs中IL-27及IFN-λ1含量的检测及相关性分析第66-67页
        6.4.2 IL-27对PBMCs中Ⅰ、Ⅲ型干扰素及ISGs表达的影响第67-68页
    6.5 讨论第68-69页
第七章 IFN-α和IFN-λ1在IL-27抑制乙肝病毒复制过程中的作用第69-75页
    7.1 前言第69页
    7.2 实验材料及仪器第69页
    7.3 实验方法第69-71页
        7.3.1 流式细胞术检测细胞表面蛋白分布情况第69-70页
        7.3.2 ELISA法检测IFN-λ1含量第70-71页
    7.4 实验结果第71-74页
        7.4.1 实验中使用的几种siRNA和shRNA的干扰效果检测第71-72页
        7.4.2 Ⅰ、Ⅲ型干扰素在IL-27抑制HBV复制过程中的作用第72-74页
    7.5 讨论第74-75页
第八章 IL-27诱导Ⅲ型干扰素IFN-λ1表达的分子机制研究第75-88页
    8.1 前言第75页
    8.2 实验材料及仪器第75页
    8.3 实验方法第75-79页
        8.3.1 分化DC细胞第75-76页
        8.3.2 细胞核蛋白抽提第76页
        8.3.3 免疫荧光(Immunofluorescence)第76-77页
        8.3.4 染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)第77-79页
    8.4 实验结果第79-86页
        8.4.1 si-WSX-1可以有效的干扰WSX-1基因的表达第79页
        8.4.2 IL-27能够在DCs、Huh7及HepG2三种细胞中诱导IFN-λ1的表达第79-81页
        8.4.3 IL-27诱导IFN-λ1表达信号通路机制初探第81-86页
    8.5 讨论第86-88页
第九章 IL-27对Ⅲ型干扰素受体表达的影响第88-91页
    9.1 前言第88页
    9.2 实验材料及仪器第88页
    9.3 实验方法第88页
    9.4 实验结果第88-90页
        9.4.1 rhIL-27蛋白能够促进Ⅲ型干扰素受体的表达第88-90页
    9.5 讨论第90-91页
参考文献第91-113页
博士在读期间发表与待发表论文第113-115页
致谢第115页

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