| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第9-11页 |
| 第2章 免疫组化法分析胃癌及癌旁正常组织中 Ezrin 表达情况 | 第11-15页 |
| 2.1 主要实验材料、试剂及仪器设备 | 第11-12页 |
| 2.1.1 病例资料 | 第11页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第11-12页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第12页 |
| 2.2 实验方法 | 第12-13页 |
| 2.2.1 Envision 免疫组织化学染色 | 第12-13页 |
| 2.2.2 实验结果判定 | 第13页 |
| 2.2.3 统计学处理 | 第13页 |
| 2.3 实验结果 | 第13-15页 |
| 2.3.1 胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中 Ezrin 蛋白的表达 | 第13-14页 |
| 2.3.2 胃癌组织中 Ezrin 蛋白的表达与临床病理指标的关系 | 第14页 |
| 2.3.3 Ezrin 蛋白在胃癌及癌旁组织的免疫组织化学染色结果 | 第14-15页 |
| 第3章 RNAi 沉默 ERK1/2 基因对胃癌 SGC7901 细胞株 Ezrin 表达及侵袭迁移能力的影响 | 第15-32页 |
| 3.1 ERK1、ERK2 RNA 干扰质粒的构建 | 第15-21页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第15页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第15-16页 |
| 3.1.3 主要实验试剂的配制 | 第16-17页 |
| 3.1.4 pRI-Basic Vector | 第17-18页 |
| 3.1.5 ERK1、ERK2 基因发卡样 shRNA 的设计合成 | 第18-19页 |
| 3.1.6 退火形成双链 | 第19页 |
| 3.1.7 XhoI、BglII 酶切载体 pRI-Basic | 第19-20页 |
| 3.1.8 T4 DNA 连接酶连接 | 第20页 |
| 3.1.9 转化大肠杆菌和鉴定 | 第20-21页 |
| 3.2 质粒的提取及细胞的培养 | 第21-22页 |
| 3.2.1 质粒的提取 | 第21页 |
| 3.2.2 胃癌细胞株的培养 | 第21-22页 |
| 3.3 Western Blot 免疫印迹检测胃癌细胞系 Ezrin 蛋白表达 | 第22-26页 |
| 3.3.1 提取细胞总蛋白 | 第22-23页 |
| 3.3.2 SDS-PAGE 电泳 | 第23-24页 |
| 3.3.3 蛋白转膜 | 第24-25页 |
| 3.3.4 蛋白免疫反应 | 第25页 |
| 3.3.5 化学发光、曝光、显影 | 第25页 |
| 3.3.6 凝胶图像分析 | 第25-26页 |
| 3.4 ERK1/2 RNA 干扰质粒转染 SGC7901 细胞 | 第26页 |
| 3.5 RT-PCR 检测转染后 SGC7901 细胞 ERK1/2、Ezrin mRNA 表达变化 | 第26-30页 |
| 3.5.1 细胞总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
| 3.5.2 鉴定 RNA 完整性和纯度 | 第27页 |
| 3.5.3 逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR) | 第27-29页 |
| 3.5.4 PCR 产物琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
| 3.6 Western Blot 免疫印迹检测转染后 SGC7901 细胞 ERK1/2、Ezrin 蛋白表达变化 | 第30页 |
| 3.7 Transwell 小室检测转染后 SGC7901 细胞侵袭迁移能力变化 | 第30-31页 |
| 3.8 统计学处理 | 第31-32页 |
| 第4章 结果 | 第32-42页 |
| 4.1 Ezrin 蛋白在 4 种胃癌细胞株中的表达情况 | 第32-33页 |
| 4.2 ERK1/ 2 转染 SGC7901 胃癌细胞系后 ERK1/2 mRNA 表达变化 | 第33-34页 |
| 4.3 ERK1/ 2 RNAi 干扰质粒转染 SGC7901 胃癌细胞系后 ERK1/2 蛋白表达变化 | 第34-37页 |
| 4.4 ERK1/ 2 RNAi 干扰质粒转染 SGC7901 胃癌细胞系后 Ezrin mRNA 及蛋白表达变化 | 第37-39页 |
| 4.5 ERK1/ 2 RNAi 干扰质粒转染 SGC7901 胃癌细胞系后细胞侵袭迁移能力变化 | 第39-42页 |
| 第5章 讨论 | 第42-45页 |
| 第6章 结论 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第50-51页 |
| 综述 | 第51-55页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
