摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-20页 |
1.1 微孢子虫概述 | 第10-15页 |
1.1.1 微孢子虫的分类地位 | 第10-11页 |
1.1.2 微孢子虫的生活史 | 第11页 |
1.1.3 微孢子虫孢子形态 | 第11-12页 |
1.1.4 微孢子虫的感染机制 | 第12-13页 |
1.1.5 微孢子虫蛋白的研究 | 第13页 |
1.1.6 微孢子虫传播方式及兔脑炎微孢子虫重要宿主感染情况 | 第13-14页 |
1.1.7 兔脑炎微孢子虫的分子流行病学 | 第14-15页 |
1.1.8 微孢子虫诊断技术 | 第15页 |
1.2 单克隆抗体技术 | 第15-17页 |
1.2.1 杂交瘤技术原理 | 第15-16页 |
1.2.2 单克隆抗体应用 | 第16-17页 |
1.3 胶体金免疫层析技术 | 第17-18页 |
1.3.1 胶体金 | 第17-18页 |
1.3.2 胶体金免疫试纸条 | 第18页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-30页 |
2.1 材料 | 第20-22页 |
2.1.1 血清、细胞与菌种 | 第20页 |
2.1.2 实验动物 | 第20页 |
2.1.3 主要试剂与溶液 | 第20-22页 |
2.1.4 主要仪器与耗材 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-30页 |
2.2.1 狐狸IgG的制备与纯化 | 第22页 |
2.2.2 抗原乳化 | 第22-23页 |
2.2.3 动物免疫 | 第23页 |
2.2.4 细胞融合 | 第23-24页 |
2.2.5 阳性杂交瘤细胞株的筛选与克隆化 | 第24-25页 |
2.2.6 单克隆抗体细胞株上清液Western Blot分析 | 第25页 |
2.2.7 单克隆抗体细胞株的冻存与复苏 | 第25-26页 |
2.2.8 单克隆抗体的大量生产及纯化 | 第26页 |
2.2.9 单克隆抗体亚类的鉴定 | 第26页 |
2.2.10 Western Blot鉴定腹水提纯单抗特异性 | 第26页 |
2.2.11 SWP1蛋白的表达与纯化及ELISA检测 | 第26-27页 |
2.2.12 兔抗狐狸IgG多抗的制备 | 第27页 |
2.2.13 胶体金的制备 | 第27-28页 |
2.2.14 胶体金抗体最小标记量的确定 | 第28页 |
2.2.15 胶体金标记单抗 1E3的制备 | 第28页 |
2.2.16 试纸条的组装及结果判定 | 第28-29页 |
2.2.17 特异性试验 | 第29页 |
2.2.18 重复性试验 | 第29页 |
2.2.19 灵敏性试验 | 第29页 |
2.2.20 稳定性试验 | 第29-30页 |
3 实验结果 | 第30-38页 |
3.1 狐狸IgG的提纯 | 第30页 |
3.2 细胞融合 | 第30-31页 |
3.3 抗原的最佳包被浓度的确定 | 第31-32页 |
3.4 单克隆抗体细胞株上清Western Blot结果 | 第32页 |
3.5 单克隆抗体亚型鉴定 | 第32-33页 |
3.6 腹水单抗的纯化 | 第33页 |
3.7 SWP1蛋白的浓度与ELISA检测结果 | 第33-34页 |
3.8 兔子多抗琼脂扩散试验 | 第34页 |
3.9 胶体金标记的最佳蛋白量 | 第34页 |
3.10 检测线SWP1蛋白及质控线兔抗狐IgG多抗的浓度确定 | 第34页 |
3.11 试纸条结果判定 | 第34-35页 |
3.12 特异性试验 | 第35页 |
3.13 重复性试验 | 第35-36页 |
3.14 灵敏性试验 | 第36-37页 |
3.15 稳定性试验 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
4.1 动物免疫 | 第38页 |
4.2 细胞融合 | 第38-39页 |
4.3 制备饲养细胞 | 第39页 |
4.4 阳性杂交瘤细胞株的筛选与克隆 | 第39页 |
4.5 抗体的大量制备与纯化 | 第39-40页 |
4.6 胶体金试纸条的制备 | 第40-42页 |
结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |