| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 1 前言 | 第7-14页 |
| 1.1 鹿茸组织生长发育研究 | 第7页 |
| 1.2 鹿茸生长发育调控机理 | 第7-8页 |
| 1.2.1 鹿茸生长发育信号通路 | 第7-8页 |
| 1.2.2 鹿茸生长发育调控因子 | 第8页 |
| 1.3 Anxa-1 基因研究概况 | 第8-11页 |
| 1.3.1 Anxa-1 的结构特点 | 第9页 |
| 1.3.2 Anxa-1 生物学功能及作用机理 | 第9-11页 |
| 1.3.3 Anxa-1 与肿瘤细胞关系 | 第11页 |
| 1.4 Anxa-1 基因与其他基因的互作研究 | 第11-13页 |
| 1.4.1 Anxa-1 基因与 β-catenin基因的互作 | 第12页 |
| 1.4.2 Anxa-1 基因与TGF-β1 基因的互作 | 第12页 |
| 1.4.3 Anxa-1 基因与PDGFA基因的互作 | 第12-13页 |
| 1.5 实验目的及意义 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-28页 |
| 2.1 试验材料 | 第14-16页 |
| 2.1.1 试验样品采集 | 第14页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第14页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.4 溶液配制 | 第15-16页 |
| 2.1.5 网络数据及分析处理软件 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-28页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第16-17页 |
| 2.2.2 目的片段的亚克隆 | 第17-20页 |
| 2.2.3 pEGFP-C1载体的小提 | 第20-21页 |
| 2.2.4 真核表达载体的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.5 细胞的培养 | 第23-24页 |
| 2.2.6 瞬时转染 | 第24页 |
| 2.2.7 总RNA提取及纯化 | 第24-25页 |
| 2.2.8 反转录合成cDNA | 第25-26页 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR | 第26-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-36页 |
| 3.1 Anxa-1 基因克隆 | 第28-31页 |
| 3.1.1 Anxa-1 基因编码区的PCR扩增 | 第28页 |
| 3.1.2 Anxa-1 基因亚克隆菌液PCR检测 | 第28-29页 |
| 3.1.3 重组克隆质粒pMD-18T-Anxa-1 的双酶切鉴定 | 第29页 |
| 3.1.4 Anxa1基因的测序 | 第29-31页 |
| 3.2 pEGFP-C1载体克隆菌液小提检测 | 第31页 |
| 3.3 真核表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.3.1 pEGFP-C1-Anxa-1 的菌液PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3.2 pEGFP-C1-Anxa-1 质粒与pEGFP-C1质粒的双酶切 | 第32页 |
| 3.3.3 pEGFP-C1-Anxa-1 质粒测序 | 第32页 |
| 3.4 pEGFP-C1 –Anxa-1 质粒与pEGFP-C1质粒转染 293T细胞效果 | 第32-33页 |
| 3.5 Real-time PCR检测结果 | 第33-35页 |
| 3.5.1 转染后细胞总RNA提取的检测 | 第33-34页 |
| 3.5.2 荧光定量PCR引物检测 | 第34页 |
| 3.5.3 Anxa-1 及其相关基因的Real-time PCR检测 | 第34-35页 |
| 3.6 本章小结 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 4.1 梅花鹿Anxa-1 真核表达载体的构建 | 第36页 |
| 4.2 Anxa-1 真核表达载体在 293T细胞内的表达 | 第36-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-46页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
