非编码RNA片段化方法的建立及验证
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| ·ncRNA 及其种类. | 第13-14页 |
| ·ncRNA 的生物学特性 | 第14-15页 |
| ·ncRNA 的作用机制 | 第15页 |
| ·ncRNA 的功能 | 第15-20页 |
| ·ncRNA 在转录水平的调控 | 第15-16页 |
| ·ncRNA 参与RNA 的加工 | 第16-17页 |
| ·ncRNA 参与蛋白水平的调控 | 第17-18页 |
| ·ncRNA 与生物体的进化 | 第18-19页 |
| ·ncRNA 与肿瘤的形成 | 第19-20页 |
| ·ncRNA 的数据库资源. | 第20-21页 |
| ·ncRNA 的研究方法 | 第21-24页 |
| ·用计算机软件预测ncRNA | 第21-22页 |
| ·用实验方法发现ncRNA | 第22-24页 |
| ·生物芯片 | 第24-25页 |
| ·生物芯片的产生和发展 | 第24页 |
| ·基因芯片的分类及特点 | 第24页 |
| ·基因芯片的用途 | 第24-25页 |
| ·研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 总RNA 提取与RNA 片段化的优化 | 第26-36页 |
| ·材料与方法 | 第26-27页 |
| ·实验样品 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·细胞总RNA 提取 | 第27页 |
| ·总RNA 的片段化 | 第27-29页 |
| ·Na~+片段化总RNA | 第27页 |
| ·Z11~(2+)片段化总RNA | 第27-28页 |
| ·M9~(2+)片段化总RNA | 第28-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-34页 |
| ·总RNA 提取结果 | 第29-30页 |
| ·总RNA 片段化方法优化 | 第30-34页 |
| ·小结 | 第34-36页 |
| 第三章 片段化RNA 的标记 | 第36-47页 |
| ·材料与方法 | 第36-41页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·总RNA 样品 | 第36页 |
| ·试剂与酶 | 第36页 |
| ·M9~(2+)片段化总RNA | 第36页 |
| ·PAGE 胶割胶回收 | 第36-37页 |
| ·RNA 去磷酸化反应 | 第37页 |
| ·RNA 纯化 | 第37页 |
| ·RNA 的磷酸化反应 | 第37-38页 |
| ·双链接头的合成 | 第38页 |
| ·小RNA 两端接头的连接反应 | 第38页 |
| ·RT（逆转录） | 第38-39页 |
| ·PCR 扩增 | 第39-40页 |
| ·荧光PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·玻片杂交 | 第41页 |
| ·ncRNA 特异性探针设计 | 第41-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第四章 利用基因芯片验证ncRNA 片段化结果 | 第47-54页 |
| ·材料与方法 | 第47-50页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·体外转录Riboswitch9 | 第47-49页 |
| ·片段化处理 | 第49页 |
| ·Riboswitch 纯化 | 第49页 |
| ·芯片实验方法 | 第49-50页 |
| ·数据处理 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-52页 |
| ·小结 | 第52-54页 |
| 总结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录1 重要溶液的配置 | 第59-62页 |
| 附录2 Urea-PAGE 的具体步骤 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
