摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 绪论 | 第8-30页 |
1.1 立题背景 | 第8页 |
1.2 重金属概述 | 第8-15页 |
1.2.1 铅 | 第9-10页 |
1.2.2 镉 | 第10-12页 |
1.2.3 汞 | 第12-13页 |
1.2.4 铜 | 第13-15页 |
1.3 重金属检测技术的研究进展 | 第15-27页 |
1.3.1 基于光谱分析为基础的元素分析技术 | 第16-19页 |
1.3.2 基于伏安极谱分析为基础的电化学分析技术 | 第19-20页 |
1.3.3 基于纳米材料和生物识别为基础的快速分析技术 | 第20-27页 |
1.4 藻毒素概述 | 第27页 |
1.4.1 理化性质 | 第27页 |
1.4.2 毒性危害和限量 | 第27页 |
1.5 藻毒素检测方法概述 | 第27-29页 |
1.5.1 仪器检测方法 | 第27-28页 |
1.5.2 免疫检测方法 | 第28-29页 |
1.6 本课题的主要研究内容 | 第29-30页 |
第二章 重金属铅、镉、汞、铜单克隆抗体筛选 | 第30-56页 |
2.1 引言 | 第30-31页 |
2.2 试剂与仪器 | 第31-33页 |
2.2.1 实验试剂和耗材 | 第31页 |
2.2.2 主要仪器与设备 | 第31-32页 |
2.2.3 主要溶液 | 第32页 |
2.2.4 实验动物和细胞 | 第32页 |
2.2.5 培养基 | 第32-33页 |
2.3 实验方法 | 第33-41页 |
2.3.1 重金属包被原合成 | 第33-34页 |
2.3.2 重金属免疫原合成 | 第34页 |
2.3.3 偶联抗原的紫外鉴定 | 第34页 |
2.3.4 完全抗原的电泳鉴定 | 第34-35页 |
2.3.5 小鼠免疫 | 第35页 |
2.3.6 小鼠多抗血清效价和抑制测定 | 第35-36页 |
2.3.7 细胞融合和杂交瘤细胞株的筛选 | 第36-39页 |
2.3.8 单克隆抗体纯化和鉴定 | 第39-41页 |
2.4 结果与分析 | 第41-51页 |
2.4.1 抗原鉴定 | 第41-42页 |
2.4.2 偶联抗原的电泳鉴定 | 第42页 |
2.4.3 动物免疫效果检测 | 第42-48页 |
2.4.4 细胞株的筛选 | 第48-49页 |
2.4.5 单克隆抗体的特性鉴定 | 第49-51页 |
2.5 讨论 | 第51-54页 |
2.5.1 抗原设计 | 第51页 |
2.5.2 抗原合成 | 第51-52页 |
2.5.3 抗体产生和细胞筛选 | 第52页 |
2.5.4 抗体纯化 | 第52-54页 |
2.5.5 抗体交叉反应率 | 第54页 |
2.6 本章小结 | 第54-56页 |
第三章 重金属酶联免疫检测方法建立和应用 | 第56-66页 |
3.1 引言 | 第56页 |
3.2 材料和仪器 | 第56页 |
3.2.1 实验试剂和耗材 | 第56页 |
3.2.2 实验仪器和设备 | 第56页 |
3.3 实验步骤 | 第56-58页 |
3.3.1 间接竞争ELISA方法的建立 | 第56-57页 |
3.3.2 间接竞争ELISA方法的优化 | 第57-58页 |
3.3.3 间接竞争ELISA的标准抑制曲线 | 第58页 |
3.3.4 饮用水和自来水添加实验 | 第58页 |
3.4 结果与分析 | 第58-64页 |
3.4.1 间接竞争ELISA方法的建立 | 第58-60页 |
3.4.2 间接竞争ELISA方法的优化 | 第60-63页 |
3.4.3 间接竞争ELISA的标准抑制曲线 | 第63-64页 |
3.4.4 饮用水和自来水添加实验 | 第64页 |
3.5 本章小结 | 第64-66页 |
第四章 重金属胶体金试纸条的制备和应用 | 第66-79页 |
4.1 引言 | 第66页 |
4.2 材料与仪器 | 第66-67页 |
4.2.1 实验试剂 | 第66页 |
4.2.2 主要仪器与设备 | 第66页 |
4.2.3 主要溶液 | 第66-67页 |
4.3 实验方法 | 第67-70页 |
4.3.1 金纳米粒子的制备 | 第67页 |
4.3.2 单克隆抗体标记金纳米粒子 | 第67-68页 |
4.3.3 试纸条的组装 | 第68页 |
4.3.4 试纸条性能测试 | 第68-69页 |
4.3.5 实际样品检测 | 第69-70页 |
4.4 结论与分析 | 第70-78页 |
4.4.1 金纳米粒子的表征 | 第70-71页 |
4.4.2 标记体系pH的优化 | 第71-72页 |
4.4.3 标记体系抗体用量优化 | 第72页 |
4.4.4 试纸条性能测试 | 第72-74页 |
4.4.5 实际样品中重金属胶体金试纸条检测 | 第74-78页 |
4.5 本章小结 | 第78-79页 |
第五章 大米中重金属镉胶体金快速筛查技术研究 | 第79-86页 |
5.1 材料和仪器 | 第79-80页 |
5.1.1 实验试剂和材料 | 第79页 |
5.1.2 实验仪器和设备 | 第79页 |
5.1.3 主要溶液 | 第79-80页 |
5.2 实验方法 | 第80-81页 |
5.2.1 分散固相萃取小柱 15m L制备 | 第80页 |
5.2.2 大米样品中镉固液萃取 | 第80页 |
5.2.3 大米样品中镉萃取效率评价 | 第80页 |
5.2.4 大米样品中镉胶体金试纸条检测 | 第80-81页 |
5.2.5 标准曲线的建立 | 第81页 |
5.2.6 实际样品的定量检测 | 第81页 |
5.3 实验结果与讨论 | 第81-85页 |
5.3.1 大米样品前处理 | 第81-83页 |
5.3.2 大米中重金属镉胶体金试纸条检测标准曲线的建立 | 第83-84页 |
5.3.3 实际样品的定量检测 | 第84-85页 |
5.4 本章小结 | 第85-86页 |
第六章 微囊藻毒素等多种目标物检测技术研究 | 第86-101页 |
6.1 试剂与仪器 | 第86页 |
6.1.1 实验试剂和耗材 | 第86页 |
6.1.2 主要仪器与设备 | 第86页 |
6.1.3 主要溶液 | 第86页 |
6.2 实验方法 | 第86-89页 |
6.2.1 藻毒素单克隆抗体的制备 | 第86-88页 |
6.2.2 藻毒素胶体金试纸条制备和应用 | 第88-89页 |
6.2.3 多重目标物同时检测试纸条的制备 | 第89页 |
6.3 实验结果与分析 | 第89-100页 |
6.3.1 藻毒素免疫原设计和异源包被抗原合成 | 第89-90页 |
6.3.2 偶联抗原的鉴定 | 第90-91页 |
6.3.3 小鼠免疫 | 第91页 |
6.3.4 小鼠多抗血清效价和抑制测定 | 第91-92页 |
6.3.5 杂交瘤细胞株的筛选 | 第92-93页 |
6.3.6 单克隆抗体鉴定 | 第93页 |
6.3.7 抗体交叉反应测定 | 第93-94页 |
6.3.8 藻毒素胶体金试纸条制备和应用 | 第94-96页 |
6.3.9 多重目标物同时检测试纸条的制备 | 第96-100页 |
6.4 本章小结 | 第100-101页 |
论文主要结论 | 第101-103页 |
论文创新点 | 第103-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-114页 |
附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文与专利 | 第114页 |