| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 中文文摘 | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-11页 |
| 第一章绪论 | 第11-21页 |
| 1.1 γ-氨基丁酸概述 | 第11-12页 |
| 1.2 Y-氨基丁酸的生理功能 | 第12-13页 |
| 1.3 Y-氨基丁酸的应用 | 第13-14页 |
| 1.4 Y-氨基丁酸茶的富集技术 | 第14-15页 |
| 1.5 谷氧酸脱梭酶（GAD)的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.6 谷氨酸脱接酶的生理功能 | 第16-17页 |
| 1.7 谷氨酸脱接酶研究背景 | 第17-18页 |
| 1.8 研究的意义及内容 | 第18-21页 |
| 第二章 产谷氨酸脱羧酶真菌的筛选 | 第21-33页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 材料与方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 供试菌株 | 第21页 |
| 2.2.2 酶和主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.3 培养基及试剂的配制 | 第22页 |
| 2.2.4 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.2.5 菌种活化 | 第22页 |
| 2.2.6 摇床培养 | 第22-23页 |
| 2.2.7 产谷氨酸脱羧酶内生真菌的初筛 | 第23页 |
| 2.2.8 比色法检测GAD酶活 | 第23-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
| 2.3.1 初筛试验 | 第25-26页 |
| 2.3.2 谷氨酸脱羧酶检测的条件优化 | 第26-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-33页 |
| 第三章 超高效液相色谱测定GABA及菌株鉴定 | 第33-45页 |
| 3.1 前言 | 第33页 |
| 3.2 材料与方法 | 第33-37页 |
| 3.2.1 主要试验材料 | 第33页 |
| 3.2.2 主要试验设备 | 第33-34页 |
| 3.2.3 主要试剂配制 | 第34页 |
| 3.2.4 GABA的测定 | 第34-35页 |
| 3.2.4.1 GABA标样的配制 | 第34页 |
| 3.2.4.2 样品衍生化 | 第34页 |
| 3.2.4.3 UPLC色谱条件 | 第34页 |
| 3.2.4.4 GABA含量的测定 | 第34-35页 |
| 3.2.5 GAD活力的测定和计算 | 第35页 |
| 3.2.6 菌株形态学鉴定 | 第35页 |
| 3.2.7 菌株ITS序列分析 | 第35-37页 |
| 3.2.7.1 菌体培养 | 第35页 |
| 3.2.7.2 4号菌DNA的提取 | 第35页 |
| 3.2.7.3 PCR反应体系和扩增条件 | 第35-36页 |
| 3.2.7.4 DNA测序 | 第36页 |
| 3.2.7.5 系统发育树的构建 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-43页 |
| 3.3.1 检测波长的选择 | 第37页 |
| 3.3.2 色谱条件的优化 | 第37-38页 |
| 3.3.3 标准曲线 | 第38页 |
| 3.3.4 衍生化条件的确定 | 第38-39页 |
| 3.3.5 样品的UPLC检测 | 第39-40页 |
| 3.3.6 精密度实验 | 第40-41页 |
| 3.3.7 菌株的形态学鉴定 | 第41页 |
| 3.3.8 菌株的ITS测序结果 | 第41-43页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 响应面法优化真菌产谷氨酸脱羧酶条件 | 第45-63页 |
| 4.1 前言 | 第45页 |
| 4.2 材料与方法 | 第45-48页 |
| 4.2.1 菌种 | 第45页 |
| 4.2.2 主要试验药品 | 第45页 |
| 4.2.3 培养基及试剂的配制 | 第45-46页 |
| 4.2.4 主要仪器设备 | 第46页 |
| 4.2.5 菌种活化培养 | 第46页 |
| 4.2.6 发酵培养基优化试验 | 第46-47页 |
| 4.2.7 发酵条件优化 | 第47-48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-61页 |
| 4.3.1 培养基成分单因素优化 | 第48-52页 |
| 4.3.2 发酵条件的优化 | 第52-55页 |
| 4.3.3 利用响应面分析设计优化发酵培养基 | 第55-61页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第61-63页 |
| 第五章 谷氨酸脱羧酶的分离纯化 | 第63-77页 |
| 5.1 前言 | 第63页 |
| 5.2 材料与方法 | 第63-67页 |
| 5.2.1 供试菌株及培养 | 第63页 |
| 5.2.2 主要试验药品 | 第63-64页 |
| 5.2.3 主要培养基及试剂的配制 | 第64页 |
| 5.2.4 主要仪器设备 | 第64-65页 |
| 5.2.5 蛋白质浓度测定 | 第65页 |
| 5.2.6 蛋白浓度标准曲线的绘制 | 第65页 |
| 5.2.7 蛋白含量的测定 | 第65-66页 |
| 5.2.8 谷氨酸脱羧酶的分离纯化 | 第66-67页 |
| 5.2.9 SDS-PAGE分子量确定 | 第67页 |
| 5.3 结果与分析 | 第67-71页 |
| 5.3.1 硫酸铵饱和度的确定 | 第67-68页 |
| 5.3.2 离子交换pH的确定 | 第68-69页 |
| 5.3.3 DEAE-Sephrose Fast Flow离子交换柱 | 第69页 |
| 5.3.4 Sephadex G-150层析 | 第69-70页 |
| 5.3.5 GAD各步纯化结果 | 第70-71页 |
| 5.4 GAD酶学性质研究 | 第71-75页 |
| 5.4.1 酶反应最适pH值研究 | 第71-73页 |
| 5.4.2 GAD酸碱稳定性的研究 | 第73-74页 |
| 5.4.3 酶反应最适温度研究 | 第74-75页 |
| 5.4.4 酶温度稳定性的研究 | 第75页 |
| 5.5 小结与讨论 | 第75-77页 |
| 第六章 结论与展望 | 第77-79页 |
| 6.1 结论 | 第77-78页 |
| 6.2 本文存在问题及展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 索引 | 第89-91页 |
| 个人简历 | 第91-93页 |