摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
引言 | 第7-10页 |
第一章 PRR11在消化道肿瘤中的表达情况及其在胆管癌中的预后价值 | 第10-28页 |
1 材料与方法 | 第10-13页 |
1.1、实验材料 | 第10-12页 |
1.1.1.组织标本 | 第10-11页 |
1.1.2. 主要试剂 | 第11页 |
1.1.3. 主要仪器 | 第11-12页 |
1.2.实验方法 | 第12-13页 |
1.2.1.组织芯片制备 | 第12页 |
1.2.2. 免疫组化 | 第12-13页 |
1.3.统计学分析 | 第13页 |
2.实验结果 | 第13-22页 |
2.1. PRR11在消化道上皮组织和癌组织的表达情况 | 第13-17页 |
2.2. PRR11胆管癌的表达分布及其与临床病理参数之间的关系 | 第17-19页 |
2.3. PRR11胆管癌患者中的预后价值 | 第19-22页 |
3.讨论 | 第22-24页 |
4.结论 | 第24页 |
参考文献 | 第24-28页 |
第二章 PRR11在胆管癌中的细胞学功能研究 | 第28-46页 |
1.材料与方法 | 第28-36页 |
1.1、实验材料 | 第28-29页 |
1.1.1 细胞株 | 第28页 |
1.1.2.PRR11-shRNA慢病毒载体的构建 | 第28页 |
1.1.3. 主要试剂 | 第28-29页 |
1.1.4. 主要仪器 | 第29页 |
1.2. PRR11-shRNA慢病毒载体的构建 | 第29页 |
1.3 目的基因感染细胞 | 第29-31页 |
1.4.感染效率的验证 | 第31-36页 |
1.4.1 Real-time PCR检测PRR11基因在胆管癌细胞中的敲降效率 | 第31-33页 |
1.4.2.蛋白免疫印迹(Western blot)检测 | 第33-35页 |
1.4.3.MTT法检测细胞生长曲线 | 第35页 |
1.4.4.细胞平板集落形成实验 | 第35页 |
1.4.5.流式细胞仪检测细胞周期 | 第35-36页 |
1.4.6.Transwell小室实验-侵袭能力检测 | 第36页 |
1.4.7.裸鼠成瘤实验 | 第36页 |
1.5.统计学分析 | 第36页 |
2.实验结果 | 第36-43页 |
2.1.敲除PRR11在肝门部胆管癌细胞QBC939中的验证 | 第36-38页 |
2.2.PRR11的下降表达对于胆管癌细胞生长增殖的影响 | 第38-39页 |
2.2.1.PRR11的下降表达抑制胆管癌细胞株QBC939生长增殖 | 第38页 |
2.2.2.PRR11的下降表达抑制胆管癌细胞株QBC939的平板克隆形成能力 | 第38-39页 |
2.3.Transwell小室实验检测PRR11表达下降后对胆管癌细胞体外侵袭能力的影响 | 第39页 |
2.4. PRR11下降表达后对胆管癌细胞周期的影响 | 第39-40页 |
2.5.PRR11表达下降后胆管癌细胞在裸鼠体内成瘤的影响 | 第40-43页 |
3.讨论 | 第43-44页 |
4.结论 | 第44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
第三章 PRR11促进胆管癌侵袭增殖的机理研究 | 第46-64页 |
1.材料与方法 | 第46-48页 |
1.1.实验材料 | 第46-47页 |
1.1.1.组织样本 | 第46页 |
1.1.2. 细胞株 | 第46页 |
1.1.3. 主要试剂 | 第46-47页 |
1.1.4. 主要仪器 | 第47页 |
1.2.实验方法 | 第47-48页 |
1.2.1 总mRNA的抽提 | 第47页 |
1.2.2.芯片杂交 | 第47页 |
1.2.3.Western-blot | 第47-48页 |
1.2.4.免疫组化 | 第48页 |
1.3.统计学分析 | 第48页 |
2.实验结果 | 第48-58页 |
2.1. 质检结果 | 第48-49页 |
2.2.初步差异筛选基因的统计 | 第49-50页 |
2.3.差异性表达基因的功能分类 | 第50-52页 |
2.4.代表性差异基因的验证 | 第52-55页 |
2.5.UCHL1、EGR1和SNAT1在胆管癌中的表达和临床意义 | 第55-58页 |
3.讨论 | 第58-61页 |
4.结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-64页 |
综述 | 第64-70页 |
参考文献 | 第68-70页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第70-71页 |
附录 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |