| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-34页 |
| 1 前言 | 第14-15页 |
| 2 脂肪酸在消化吸收过程中的特异性 | 第15-17页 |
| 2.1 肠道对不同脂肪酸的吸收存在差异 | 第15-16页 |
| 2.2 不同脂肪酸对脂蛋白合成的影响 | 第16-17页 |
| 3 肠上皮细胞内乳糜微粒的组装和分泌 | 第17-25页 |
| 3.1 乳糜微粒组装及分泌过程 | 第18-21页 |
| 3.1.1 脂质水解产物的摄取 | 第18-19页 |
| 3.1.2 重新酯化合成甘油三酯 | 第19-20页 |
| 3.1.3 乳糜微粒前体的形成 | 第20页 |
| 3.1.4 乳糜微粒的成熟 | 第20-21页 |
| 3.2 肠上皮细胞内参与CM组装分泌的关键蛋白 | 第21-25页 |
| 3.2.1 FATP4 | 第21页 |
| 3.2.2 apoB | 第21-22页 |
| 3.2.3 MGAT和DGAT | 第22-24页 |
| 3.2.4 MTP | 第24-25页 |
| 4 肝型脂肪酸结合蛋白研究进展 | 第25-30页 |
| 4.1 小肠内共表达的两种脂肪酸结合蛋白亚型 | 第25-26页 |
| 4.2 肝型脂肪酸结合蛋白的生理功能 | 第26-30页 |
| 4.2.1 促进细胞对脂肪酸的摄取 | 第27-28页 |
| 4.2.2 促进脂肪酸在胞内的转运 | 第28-29页 |
| 4.2.3 入核调控基因表达 | 第29-30页 |
| 4.2.4 触发了前乳糜微粒转运囊泡在内质网的出芽过程 | 第30页 |
| 5 Caco-2 细胞肠道脂质代谢模型的特点 | 第30-33页 |
| 5.1 培养条件的重要性 | 第31-32页 |
| 5.2 形态结构及功能 | 第32-33页 |
| 5.3 模型的局限性 | 第33页 |
| 6 研究的目的意义 | 第33-34页 |
| 第二部分 试验材料与方法 | 第34-51页 |
| 1 材料及仪器 | 第34-37页 |
| 1.1 细胞系及质粒 | 第34页 |
| 1.2 药品及试剂 | 第34-35页 |
| 1.3 主要溶液及其配制 | 第35-36页 |
| 1.4 仪器及设备 | 第36-37页 |
| 2 试验方法 | 第37-51页 |
| 2.1 细胞复苏 | 第37页 |
| 2.2 细胞传代 | 第37页 |
| 2.3 细胞冻存 | 第37页 |
| 2.4 肠上皮细胞模型的建立 | 第37-38页 |
| 2.5 肠上皮细胞模型的验证 | 第38-40页 |
| 2.6 MTT法测定脂肪酸处理对细胞活力的影响 | 第40页 |
| 2.7 甘油三酯的合成和分泌 | 第40-41页 |
| 2.8 乳糜微粒的分离及测定 | 第41-42页 |
| 2.9 从头合成载脂蛋白测定 | 第42页 |
| 2.10 蛋白含量测定 | 第42-43页 |
| 2.11 脂肪酸的摄取 | 第43页 |
| 2.12 过表达载体的构建 | 第43-49页 |
| 2.13 干扰质粒的构建 | 第49页 |
| 2.14 L-FABP表达质粒及干扰质粒共转染 293T细胞 | 第49-50页 |
| 2.15 脂肪酸对L-FABP表达的调控作用 | 第50页 |
| 2.16 L-FABP表达质粒及干扰质粒分别转染Caco-2 细胞 | 第50页 |
| 2.17 统计方法 | 第50-51页 |
| 第三部分 结果与讨论 | 第51-70页 |
| 第一章 Caco-2 细胞模型的建立与验证 | 第51-56页 |
| 1 前言 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-54页 |
| 2.1 Caco-2 细胞分化后期跨膜电阻值（TEER）的变化 | 第51-52页 |
| 2.2 分化后Caco-2 细胞的微观形态结构 | 第52页 |
| 2.3 Caco-2 细胞分化后期ALP的分泌情况 | 第52-53页 |
| 2.4 Caco-2 细胞分化过程中L-FABP表达量的变化 | 第53-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 4 小结 | 第55-56页 |
| 第二章 n-3 PUFA对Caco-2 细胞CM合成及分泌的影响 | 第56-64页 |
| 1 前言 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-60页 |
| 2.1 脂肪酸处理浓度对细胞活力的影响 | 第56-57页 |
| 2.2 脂肪酸处理时间对甘油三酯合成及分泌的影响 | 第57-58页 |
| 2.3 Caco-2 细胞对不同脂肪酸的摄取效率 | 第58-59页 |
| 2.4 脂肪酸对apoB合成分泌的影响 | 第59-60页 |
| 2.5 脂肪酸对Caco-2 细胞CM合成和分泌的影响 | 第60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 4 小结 | 第63-64页 |
| 第三章 L-FABP过表达质粒的构建及干扰质粒的筛选 | 第64-70页 |
| 1 前言 | 第64页 |
| 2 结果与分析 | 第64-67页 |
| 2.1 脂肪酸对Caco-2 细胞L-FABP表达的调控效果 | 第64-65页 |
| 2.2 L-FABP真核表达载体的构建及鉴定 | 第65-66页 |
| 2.3 表达载体和干扰载体共转染 293T细胞 | 第66-67页 |
| 2.4 转染Caco-2 细胞的干扰及过表达效果 | 第67页 |
| 3 讨论 | 第67-69页 |
| 4 小结 | 第69-70页 |
| 第四部分 结语 | 第70-72页 |
| 1 成果与结论 | 第70页 |
| 2 创新点 | 第70-71页 |
| 3 不足与展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-85页 |
| 附录 | 第85-87页 |
| 附录1 shRNA和shRNA’序列信息 | 第85-86页 |
| 附录2 研究生在读期间发表学术论文 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
