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紫菜精子囊细胞发育机制初探和胁迫下内参基因的筛选

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 绪论第10-14页
    1.1 引言第10页
    1.2 紫菜的分类地位及生活史第10-14页
第二章 条斑紫菜精子囊细胞发育过程中蛋白差异表达分析第14-38页
    2.1 前言第14-17页
        2.1.1 植物性细胞分化及紫菜精子囊发育研究进展第14-15页
        2.1.2 蛋白质组学的发展及应用第15-16页
        2.1.3 蛋白质组学应用技术第16-17页
    2.2 材料与方法第17-22页
        2.2.1 材料第17-18页
        2.2.2 仪器与药品第18-19页
        2.2.3 可溶性蛋白的提取第19-20页
        2.2.4 iTRAQ标记与质谱鉴定第20-22页
    2.3 结果第22-26页
        2.3.1 不同组织的细胞形态观察第22-23页
        2.3.2 差异表达蛋白的定量信息第23-24页
        2.3.3 差异表达蛋白的生物信息学统计第24-26页
    2.4 讨论第26-38页
        2.4.1 表达上调蛋白第27-35页
        2.4.2 表达下调蛋白第35-37页
        2.4.3 精子囊细胞发育过程中可能的代谢调控分析第37-38页
第三章 条斑紫菜基因在真核系统中的表达第38-52页
    3.1 前言第38-39页
    3.2 构建酵母表达系统材料与方法第39-46页
        3.2.1 仪器与药品第39页
        3.2.2 试剂配方第39-41页
        3.2.3 目标序列DNA的克隆与转化第41-42页
        3.2.4 目的基因与pPICZαA载体的连接与转化第42-43页
        3.2.5 重组质粒的线性化第43-44页
        3.2.6 重组质粒转化入毕赤酵母第44-45页
        3.2.7 目的基因在毕赤酵母中的诱导表达第45页
        3.2.8 目的蛋白的表达鉴定第45-46页
        3.2.9 SDS-PAGE分析第46页
    3.3 结果第46-50页
        3.3.1 真核表达系统的构建与鉴定第46-49页
        3.3.2 目的蛋白的表达及SDS-PAGE分析第49-50页
    3.4 讨论第50-52页
第四章 胁迫条件下坛紫菜内参基因的筛选第52-69页
    4.1 前言第52-55页
        4.1.1 藻类光合生理状态监测第52-53页
        4.1.2 实时荧光定量技术的运用第53-55页
    4.2 材料与方法第55-60页
        4.2.1 坛紫菜培养第55-56页
        4.2.2 仪器与药品第56页
        4.2.3 坛紫菜胁迫处理下光合参数的测定第56-57页
        4.2.4 备选内参基因的克隆第57-58页
        4.2.5 引物设计第58-59页
        4.2.6 geNorm软件筛选内参基因第59-60页
        4.2.7 基因表达的绝对定量分析第60页
    4.3 结果第60-66页
        4.3.1 光合动力学参数的测定第60-61页
        4.3.2 总RNA及基因组DNA的提取第61-62页
        4.3.3 geNorm软件筛选最佳内参基因第62-65页
        4.3.4 特定组别基因表达的绝对定量第65-66页
    4.4 讨论第66-69页
第五章 结论与展望第69-70页
参考文献第70-80页
致谢第80-81页
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第81页

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