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水稻齿叶矮缩病毒Pns10的定位及其自身互作研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
1 前言第9-23页
   ·齿叶矮缩病毒研究进展第9-16页
     ·齿叶矮缩病的发生及危害第9页
     ·水稻齿叶矮缩病的症状第9页
     ·RRSV 的寄主范围和传播介体第9-10页
     ·RRSV 的粒子特性第10-11页
     ·RRSV 的基因组结构第11-12页
     ·RRSV 编码蛋白的功能第12-15页
     ·RRSV 的防治第15-16页
   ·研究中用到的实验技术和系统第16-21页
     ·免疫荧光技术(immunofluorescent technique)第16页
     ·酵母双杂交技术第16-17页
     ·The DUALmembrane system第17-19页
     ·Bac-to-Bac 表达系统第19-20页
     ·Strep-tag(?) 纯化系统第20页
     ·免疫共沉淀技术第20-21页
   ·本项目研究的目的及意义第21-23页
2 RRSV-Pns10 蛋白及其缺失突变体在 Sf9 细胞中的表达与定位研究第23-37页
 1 材料与方法第23-31页
   ·材料第23-25页
   ·方法第25-31页
 2 结果与分析第31-35页
   ·RRSV 基因组S10 片段克隆第31页
   ·重组杆状病毒转移载体的构建第31-32页
   ·重组Bacmid 的提取与鉴定第32-33页
   ·昆虫细胞转染第33页
   ·细胞的荧光观察第33-35页
 3 小结与讨论第35-37页
3 免疫荧光技术研究 RRSV-Pns10 的定位情况第37-50页
 1 材料与方法第37-42页
   ·材料第37-38页
   ·方法第38-42页
 2 结果与分析第42-48页
   ·dsRNA 的提取第42页
   ·目的基因的扩增第42-43页
   ·重组杆状病毒转移载体的构建第43-44页
   ·重组Bacmid 的提取与鉴定第44-45页
   ·重组Bacmid 转染昆虫细胞第45-46页
   ·重组蛋白的表达与Western blot 检测第46页
   ·免疫荧光技术观察蛋白的定位第46-48页
 3 小结与讨论第48-50页
4 酵母双杂交研究 RRSV-Pns10 蛋白及其缺失突变体的自身互作情况第50-58页
 1 材料与方法第50-53页
   ·材料第50-51页
   ·方法第51-53页
 2 结果与分析第53-57页
   ·目的基因的扩增第53-54页
   ·酵母表达载体的构建第54-55页
   ·酵母双杂交验证蛋白之间的互作第55-56页
   ·β-半乳糖苷酶活性分析第56-57页
 3 小结与讨论第57-58页
5 免疫共沉淀研究 RRSV-Pns10 蛋白及其缺失突变体的自身互作情况第58-69页
 1 材料与方法第58-64页
   ·材料第58-60页
   ·方法第60-64页
 2 结果与分析第64-67页
   ·目的基因的扩增第64页
   ·烟草瞬时表达载体的构建第64-65页
   ·重组质粒转化农杆菌EHA105第65-66页
   ·免疫共沉淀验证蛋白间的互作第66-67页
 3 小结与讨论第67-69页
6 总结与展望第69-72页
参考文献第72-78页
致谢第78页

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