| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 低温胁迫对植物的影响 | 第12-16页 |
| 1.1.1 低温胁迫对细胞膜的影响 | 第13-14页 |
| 1.1.2 低温胁迫对植物光合作用的影响 | 第14页 |
| 1.1.3 低温胁迫对抗氧化系统的影响 | 第14-16页 |
| 1.1.3.1 低温胁迫对活性氧的影响 | 第14-15页 |
| 1.1.3.2 低温胁迫对抗氧化酶活性的影响 | 第15-16页 |
| 1.2 植物应对低温胁迫的响应机制 | 第16-21页 |
| 1.2.1 CBF依赖的低温信号转导途径 | 第17-20页 |
| 1.2.1.1 AP2/ERF转录因子 | 第17-18页 |
| 1.2.1.2 CBF冷应答信号通路 | 第18-19页 |
| 1.2.1.3 其他胁迫对CBF基因的诱导表达 | 第19-20页 |
| 1.2.2 ABA依赖低温信号转导途径 | 第20页 |
| 1.2.3 游离脯氨酸与植物抗冻性 | 第20-21页 |
| 1.2.4 可溶性糖与植物抗冻性 | 第21页 |
| 1.3 马铃薯 | 第21-23页 |
| 1.3.1 马铃薯简介 | 第21-22页 |
| 1.3.2 马铃薯的抗冻性 | 第22页 |
| 1.3.3 Solanum commersonii与Solanum tuberosum | 第22-23页 |
| 1.4 本研究的意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-33页 |
| 2.1 实验材料与处理 | 第24-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第24页 |
| 2.1.3 PCR引物 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 拟南芥的生长及植物材料准备 | 第25-26页 |
| 2.2.1.1 种子的消毒处理 | 第25页 |
| 2.2.1.2 MS培养基的配置 | 第25-26页 |
| 2.2.1.3 消毒后种子铺板 | 第26页 |
| 2.2.1.4 幼苗的移栽以及培养 | 第26页 |
| 2.2.2 农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第26-27页 |
| 2.2.2.1 农杆菌EHA101的活化 | 第26-27页 |
| 2.2.2.2 拟南芥的转化 | 第27页 |
| 2.2.3 转基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第27-30页 |
| 2.2.3.1 转基因拟南芥幼苗的筛选 | 第27页 |
| 2.2.3.2 转基因拟南芥DNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2.3.3 PCR扩增 | 第28页 |
| 2.2.3.4 转基因拟南芥总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.3.5 反转录 | 第29页 |
| 2.2.3.6 实时定量PCR | 第29-30页 |
| 2.3 植物生理指标的测定 | 第30-33页 |
| 2.3.1 拟南芥冷驯化处理 | 第30页 |
| 2.3.2 拟南芥冰冻处理及恢复 | 第30页 |
| 2.3.3 植物LT50测定 | 第30-31页 |
| 2.3.4 光合速率的测定 | 第31页 |
| 2.3.5 叶绿素荧光参数的测定 | 第31页 |
| 2.3.6 叶绿体色素含量的测定 | 第31-32页 |
| 2.3.7 H_2O_2含量和O_2~·?产生速率的测定 | 第32页 |
| 2.3.8 抗氧化酶活性的测定 | 第32页 |
| 2.3.9 脯氨酸、可溶性糖和丙二醛含量的测定 | 第32页 |
| 2.3.10 统计分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-49页 |
| 3.1 AP2/ERF蛋白家族进化树 | 第33-34页 |
| 3.2 StCBF1与ScCBF1蛋白分析 | 第34-35页 |
| 3.3 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥的筛选与鉴定 | 第35-36页 |
| 3.4 StCBF1基因与ScCBF1基因亚细胞定位 | 第36-37页 |
| 3.5 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥的表型分析 | 第37-38页 |
| 3.6 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥抗冻能力比较 | 第38-40页 |
| 3.6.1 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥幼苗抗冻能力比较 | 第38-39页 |
| 3.6.2 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥成苗抗冻能力比较 | 第39-40页 |
| 3.6.3 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥LT50 | 第40页 |
| 3.7 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥低温胁迫下的生理响应 | 第40-45页 |
| 3.7.1 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥叶片光合参数比较 | 第40-41页 |
| 3.7.2 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥叶片荧光参数比较 | 第41-42页 |
| 3.7.3 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥叶片活性氧水平和丙二醛含量比较 | 第42-43页 |
| 3.7.4 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥叶片抗氧化酶活性 | 第43-44页 |
| 3.7.5 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥叶片脯氨酸和可溶性糖含量 | 第44-45页 |
| 3.8 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥抗冷相关基因表达分析 | 第45-49页 |
| 3.8.1 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥AtCBFs基因表达分析 | 第45-46页 |
| 3.8.2 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥COR基因表达分析 | 第46-47页 |
| 3.8.3 转StCBF1与转ScCBF1基因拟南芥ICE1和ICE2基因表达分析 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
