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人工细胞膜NH3被动传递及Ca2+主动传递研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
1 人工细胞的研究进展第20-39页
    1.1 细胞传递第20-21页
    1.2 乳化液膜第21-26页
        1.2.1 多重乳液第22-24页
        1.2.2 W_1/O/W_2多重乳液中的水传递第24-25页
        1.2.3 乳液在生物医学中的应用第25页
        1.2.4 肝性脑病第25-26页
    1.3 巨型脂质体第26-37页
        1.3.1 巨型脂质体的制备第27-29页
        1.3.2 Ca~(2+)泵SERCA蛋白第29-32页
        1.3.3 膜蛋白在磷脂膜中的嵌入第32-33页
        1.3.4 磷脂膜融合第33-36页
        1.3.5 脂质体之间水化力分析第36-37页
    1.4 本文研究思路与内容第37-39页
2 乳液NH_3被动传递及吸附肠道氨研究第39-57页
    2.1 实验材料和方法第39-43页
        2.1.1 实验材料和设备第39-40页
        2.1.2 W_1/O/W_2多重乳液的制备第40-41页
        2.1.3 NH_3在水和石蜡中分配系数的测定第41页
        2.1.4 柠檬酸的包埋率和释放第41-42页
        2.1.5 油相中含水量测定第42页
        2.1.6 DSC扫描第42页
        2.1.7 W_1/O/W_2多重乳液氨传递第42页
        2.1.8 动物实验第42-43页
    2.2 W_1/O/W_2多重乳液的制备第43-45页
    2.3 W_1/O/W_2多重乳液中的水传递第45-49页
    2.4 多重乳液氨被动传递第49-56页
        2.4.1 多重乳液氨传递机理第49-52页
        2.4.2 多重乳液体外氨传递研究第52-54页
        2.4.3 动物实验第54-56页
    2.5 本章小结第56-57页
3 巨型脂质体的制备及对Fluo-5f的包埋第57-71页
    3.1 实验材料和方法第57-59页
        3.1.1 实验材料和设备第57-58页
        3.1.2 纳米脂质体的制备第58页
        3.1.3 电形成法制备巨型脂质体第58-59页
        3.1.4 巨型脂质体对Fluo-5f的包埋第59页
    3.2 巨型脂质体的制备第59-65页
        3.2.1 电形成法制备巨型脂质体第59-61页
        3.2.2 巨型脂质体制备条件的优化第61-65页
    3.3 曲拉通x-100对磷脂双分子膜透过性影响第65-68页
    3.4 巨型脂质体对Fluo-5f的包埋第68-69页
    3.5 本章小结第69-71页
4 Ca~(2+)泵SERCA蛋白的提取及荧光标记第71-89页
    4.1 实验材料和方法第71-77页
        4.1.1 实验材料和设备第71-73页
        4.1.2 SERCA蛋白的提取第73-74页
        4.1.3 SERCA蛋白FITC荧光探针标记第74-75页
        4.1.4 SERCA蛋白浓度及FITC残留分析第75-76页
        4.1.5 游离FITC的去除第76-77页
        4.1.6 标记程度计算第77页
    4.2 SERCA蛋白的提取第77-81页
    4.3 FITC荧光标记SERCA蛋白第81-82页
        4.3.1 电泳测量蛋白标记程度第81-82页
        4.3.2 FITC标记反应条件的优化第82页
    4.4 溶液中SERCA蛋白标记后游离FITC的去除第82-86页
        4.4.1 10kD截留分子量的膜过滤第83页
        4.4.2 3.5kD截留分子量的膜透析第83-85页
        4.4.3 离心脱盐树脂分离柱第85-86页
    4.5 纳米脂质体中SERCA标记后游离FITC的去除第86-88页
        4.5.1 Bio beads SM-2吸附第86-87页
        4.5.2 超速离心法第87-88页
    4.6 本章小结第88-89页
5 功能化巨型脂质体的构建和Ca~(2+)主动传递第89-116页
    5.1 实验材料和方法第89-93页
        5.1.1 实验材料和设备第89-91页
        5.1.2 SERCA蛋白在纳米脂质体中的嵌入第91页
        5.1.3 ATP水解法测量SERCA蛋白活性第91页
        5.1.4 纳米脂质体中的Ca~(2+)主动传递第91-92页
        5.1.5 SERCA蛋白在巨型脂质体磷脂双分子膜中的嵌入第92页
        5.1.6 巨型脂质体中的Ca~(2+)主动传递第92-93页
    5.2 SERCA蛋白在纳米脂质体磷脂膜中的嵌入第93-96页
        5.2.1 表面活性剂介导法第93-95页
        5.2.2 纳米脂质体中SERCA蛋白活性测试第95-96页
    5.3 含有SERCA蛋白的纳米脂质体制备巨型脂质体第96-101页
        5.3.1 SERCA蛋白在巨型脂质体磷脂膜中的嵌入第96页
        5.3.2 SERCA蛋白在纳米脂质体中嵌入机理分析第96-99页
        5.3.3 巨型脂质体中的Ca~(2+)主动传递第99-101页
    5.4 DOTM介导法嵌入SERCA蛋白第101-102页
    5.5 巨型脂质体和纳米脂质体融合法嵌入SERCA蛋白第102-114页
        5.5.1 巨型脂质体和纳米脂质体融合法第102-107页
        5.5.2 巨型脂质体和纳米脂质体融合机理分析第107-109页
        5.5.3 ATP水解法测定巨型脂质体中SERCA蛋白活性第109-110页
        5.5.4 巨型脂质体中的Ca~(2+)主动传递第110-112页
        5.5.5 毒胡萝卜素(TG)对SERCA蛋白功能的调控第112-114页
    5.6 本章小结第114-116页
6 结论、创新点与展望第116-119页
    6.1 结论第116-117页
    6.2 创新点摘要第117-118页
    6.3 展望第118-119页
参考文献第119-129页
致谢第129-130页
作者简介第130页
攻读博士学位期间科研项目及科研成果第130页

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