| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 主要符号表 | 第22-23页 |
| 1 绪论 | 第23-47页 |
| 1.1 研究背景与意义 | 第23-24页 |
| 1.2 亚细胞器靶向标记方法研究进展 | 第24-27页 |
| 1.2.1 融合蛋白标签靶向标记 | 第24-25页 |
| 1.2.2 化学小分子荧光探针靶向标记 | 第25-27页 |
| 1.3 Snap-tag亚细胞器靶向稳定标记荧光探针研究进展 | 第27-33页 |
| 1.4 小分子反应型亚细胞器靶向稳定定位荧光探针研究进展 | 第33-35页 |
| 1.4.1 小分子反应型亚细胞器靶向稳定定位标记机理 | 第34页 |
| 1.4.2 小分子反应型亚细胞器靶向荧光染料和荧光探针 | 第34-35页 |
| 1.5 近红外细胞标记荧光染料和荧光探针研究进展 | 第35-45页 |
| 1.5.1 菁类近红外荧光染料和荧光探针 | 第36-38页 |
| 1.5.2 罗丹明和荧光素衍生物类近红外荧光染料和荧光探针 | 第38-40页 |
| 1.5.3 硅杂罗丹明和砜基罗丹明类近红外荧光染料和荧光探针 | 第40-42页 |
| 1.5.4 氟硼吡咯类近红外荧光染料和荧光探针 | 第42-43页 |
| 1.5.5 其他新型长波长荧光染料及其应用 | 第43-45页 |
| 1.6 本文的主要研究思路 | 第45-47页 |
| 2 Snap-tag荧光探针的设计、合成以及亚细胞器稳定标记应用 | 第47-79页 |
| 2.1 概述 | 第47-48页 |
| 2.2 分子设计 | 第48-49页 |
| 2.2.1 Snap-tag标记技术核心中间体PYBG的设计 | 第48页 |
| 2.2.2 Snap-tag标记技术荧光染料和荧光探针的设计 | 第48-49页 |
| 2.3 合成路线 | 第49-52页 |
| 2.3.1 PYBG和ADBG的合成路线 | 第49页 |
| 2.3.2 PYBG-TMR、PYBG-SF和PYBG-NO的合成路线 | 第49-50页 |
| 2.3.3 PYBG-BODIPY、PYBG-Vis和PYBG-ClO的合成路线 | 第50-52页 |
| 2.3.4 ADBG-Np-N、ADBG-Np-N+和ADBG-Np-OH的合成路线 | 第52页 |
| 2.4 实验部分 | 第52-71页 |
| 2.4.1 仪器与原料 | 第52-53页 |
| 2.4.2 化合物PYBG和ADBG的合成 | 第53-55页 |
| 2.4.3 PYBG-TMR、PYBG-SF和PYBG-NO的合成 | 第55-59页 |
| 2.4.4 PYBG-BODIPY、PYBG-Vis和PYBG-ClO的合成 | 第59-66页 |
| 2.4.5 ADBG-Np-N、ADBG-Np-N+和ADBG-Np-OH的合成 | 第66-70页 |
| 2.4.6 细胞的转染、标记和Snap-tag蛋白的提取 | 第70-71页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第71-77页 |
| 2.5.1 Snap-tag蛋白与PYBG荧光衍生物的反应性研究 | 第71页 |
| 2.5.2 PYBG-TMR和PYBG-BODIPY的活细胞标记成像 | 第71-73页 |
| 2.5.3 PYBG-ClO、和PYBG-NO的活细胞成像 | 第73-75页 |
| 2.5.4 PYBG-Vis的活细胞寿命成像 | 第75-76页 |
| 2.5.5 ADBG-Np-N、ADBG-Np-N+和ADBG-Np-OH的活细胞成像 | 第76-77页 |
| 2.6 本章小结 | 第77-79页 |
| 3 小分子亚细胞器靶向稳定定位粘度和氧气探针的设计、合成及应用 | 第79-112页 |
| 3.1 概述 | 第79-80页 |
| 3.2 分子设计 | 第80-83页 |
| 3.2.1 稳定定位脂滴的粘度探针的设计 | 第80-81页 |
| 3.2.2 稳定定位在线粒体的粘度探针的设计 | 第81-82页 |
| 3.2.3 细胞膜粘度探针的设计 | 第82页 |
| 3.2.4 线粒体靶向的氧气探针设计 | 第82-83页 |
| 3.3 合成路线 | 第83-85页 |
| 3.3.1 N-Vis和Cl-N-Vis的合成路线 | 第83页 |
| 3.3.2 M-Vis-A和M-Vis-B的合成路线 | 第83-84页 |
| 3.3.3 CM-Vis-A和CM-Vis-B的合成路线 | 第84页 |
| 3.3.4 M-O-A和M-O-B的合成路线 | 第84-85页 |
| 3.4 实验部分 | 第85-94页 |
| 3.4.1 仪器和原料 | 第85页 |
| 3.4.2 N-Vis和Cl-N-Vis的合成 | 第85-86页 |
| 3.4.3 M-Vis-A和M-Vis-B的合成 | 第86-88页 |
| 3.4.4 CM-Vis-A和CM-Vis-B的合成 | 第88-89页 |
| 3.4.5 M-O-A和M-O-B的合成 | 第89-93页 |
| 3.4.6 探针的光谱和荧光寿命的测试方法 | 第93-94页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第94-111页 |
| 3.5.1 脂滴粘度探针N-Vis和Cl-N-Vis的光谱性质研究 | 第94-96页 |
| 3.5.2 脂滴粘度探针N-Vis和Cl-N-Vis的细胞定位成像研究 | 第96-97页 |
| 3.5.3 N-Vis在酒精和硬脂酸损伤肝脏细胞中的成像研究 | 第97-99页 |
| 3.5.4 线粒体粘度探针M-Vis-A和M-Vis-B的光谱性质研究 | 第99-101页 |
| 3.5.5 线粒体粘度探针M-Vis-A和M-Vis-B细胞器定位成像研究 | 第101-103页 |
| 3.5.6 线粒体粘度探针M-Vis-A寿命成像应用研究 | 第103-105页 |
| 3.5.7 细胞膜粘度探针CM-Vis-A的光谱性质研究 | 第105-106页 |
| 3.5.8 细胞膜粘度探针CM-Vis-A的细胞成像研究 | 第106-108页 |
| 3.5.9 线粒体氧气探针M-O-A的光谱性质研究 | 第108页 |
| 3.5.10 线粒体氧气探针M-O-A的细胞定位成像研究 | 第108-110页 |
| 3.5.11 线粒体氧气探针M-O-A的比率成像研究 | 第110-111页 |
| 3.6 本章小结 | 第111-112页 |
| 4 近红外亚细胞器靶向的荧光探针的设计、合成及生物学应用 | 第112-144页 |
| 4.1 概述 | 第112-113页 |
| 4.2 分子设计 | 第113-115页 |
| 4.2.1 近红外荧光染料N-NIR、Br-N-NIR和PYBG-NIR的设计 | 第113-114页 |
| 4.2.2 近红外中性pKa的pH探针设计 | 第114页 |
| 4.2.3 噻唑、喹啉等近红外荧光染料的设计 | 第114-115页 |
| 4.3 合成路线 | 第115-117页 |
| 4.3.1 近红外荧光染料N-NIR、Br-N-NIR和PYBG-NIR的合成路线 | 第115-116页 |
| 4.3.2 近红外pH探针pH-A-NIR和pH-B-NIR的合成路线 | 第116-117页 |
| 4.3.3 近红外荧光染料A-NIR、S-NIR和K-NIR的合成路线 | 第117页 |
| 4.4 实验部分 | 第117-129页 |
| 4.4.1 仪器和原料 | 第117-118页 |
| 4.4.2 近红外荧光染料N-NIR、Br-N-NIR和PYBG-NIR的合成 | 第118-123页 |
| 4.4.3 近红外pH探针pH-A-NIR和pH-B-NIR的合成 | 第123-125页 |
| 4.4.4 近红外荧光染料A-NIR、S-NIR和K-NIR的合成 | 第125-128页 |
| 4.4.5 化合物光物理性质测试方法 | 第128-129页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第129-143页 |
| 4.5.1 近红外荧光染料N-NIR、S-NIR和K-NIR的光谱性质 | 第129-130页 |
| 4.5.2 近红外荧光染料N-NIR、S-NIR和K-NIR的活细胞成像 | 第130-133页 |
| 4.5.3 近红外荧光染料PYBG-NIR的活细胞蛋白靶向标记 | 第133-135页 |
| 4.5.4 pH-A-NIR和pH-B-NIR的光谱性质和选择性研究 | 第135-137页 |
| 4.5.5 pH-A-NIR和pH-B-NIR活细胞定位研究 | 第137-139页 |
| 4.5.6 pH-A-NIR和pH-B-NIR探测活细胞内pH变化的研究 | 第139-140页 |
| 4.5.7 pH-A-NIR和pH-B-NIR用于细胞流式分析 | 第140-141页 |
| 4.5.8 pH-A-NIR和pH-B-NIR细胞毒性研究 | 第141-142页 |
| 4.5.9 荧光染料A-NIR的粘度粘度响应研究 | 第142-143页 |
| 4.6 本章小结 | 第143-144页 |
| 5 结论与展望 | 第144-148页 |
| 5.1 结论 | 第144-145页 |
| 5.2 创新点 | 第145-146页 |
| 5.3 展望 | 第146-148页 |
| 参考文献 | 第148-159页 |
| 附录A 主要化合物核磁、质谱、液相数据 | 第159-207页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第207-209页 |
| 致谢 | 第209-211页 |
| 作者简介 | 第211页 |
