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鸭圆环病毒Rep和ORF3蛋白部分生物学活性的研究

符号及缩略词第1-10页
中文摘要第10-13页
ABSTRACT第13-16页
1 前言第16-43页
   ·鸭圆环病毒的研究进展第16-24页
     ·概述第16页
     ·Du CV的发现第16-19页
     ·Du CV的病原学第19-20页
     ·Du CV的生活周期第20-22页
     ·病毒的基因型第22-23页
     ·Du CV的流行病学第23页
     ·Du CV的致病性第23-24页
     ·Du CV的检测方法第24页
   ·蛋白核质穿梭研究进展第24-31页
     ·核定位信号第25-26页
     ·核输出(nuclear export)第26-27页
     ·蛋白的核质穿梭第27-28页
     ·NLS信号与病毒复制第28-31页
   ·细胞凋亡第31-42页
     ·概述第31页
     ·凋亡的基本功能第31-35页
     ·外部凋亡途径第35-36页
     ·外部凋亡途径第36-38页
     ·内质网压力凋亡途径第38-40页
     ·病毒与凋亡第40-42页
   ·本研究的目的意义第42-43页
2 材料与方法第43-62页
   ·鸭圆环病毒Rep蛋白核定位功能的研究第43-52页
     ·材料第43-45页
     ·方法第45-52页
   ·鸭圆环病毒Rep、ORF3蛋白凋亡活性的研究第52-62页
     ·材料第52-54页
     ·方法第54-62页
3 结果与分析第62-130页
   ·鸭圆环病毒Rep蛋白核定位功能的研究第62-68页
     ·两型Rep基因PCR扩增结果第62页
     ·p Rep1-Ds Red2、p Rep2-Ds Red2供体质粒的筛选和酶切鉴定第62页
     ·p Rep1-Ds Red2、p Rep1-Ds Red2重组质粒IFA鉴定第62页
     ·缺失质粒的筛选和酶切鉴定第62-63页
     ·缺失质粒的筛选和酶切鉴定第63-64页
     ·Rep1-Ds Red2蛋白表达产物的Western-blotting检测第64-65页
     ·各Rep2-Ds Red2蛋白表达产物的Western-blotting检测第65页
     ·Rep1各敲除蛋白在细胞中的亚定位第65-66页
     ·Rep2各敲除蛋白在细胞中的亚定位第66-68页
   ·鸭圆环病毒Rep和ORF3蛋白凋亡活性的研究第68-130页
     ·两型ORF3和Rep基因PCR扩增结果第68页
     ·两型ORF3和Rep基因PCR扩增结果第68-69页
     ·EGFP系列质粒酶切鉴定第69页
     ·Flag系列质粒酶切鉴定第69-70页
     ·p EGFP-Du CV1-Rep、p EGFP-Du CV2-Rep、p EGFP-Du CV1-ORF3、p EGFP-Du CV2ORF3重组质粒IFA鉴定第70-71页
     ·p3x Flag-CMV-7.1、p3x Flag-Du CV1-Rep、p3x Flag-Du CV2-Rep、p3x Flag-Du CV1ORF3和p3x Flag-Du CV2-ORF3重组质粒IFA鉴定第71页
     ·各重组蛋白表达产物的Western-blotting检测第71-72页
     ·各重组蛋白表达产物的Western-blotting检测第72页
     ·流式细胞术分析细胞凋亡(Annexin V-FITC)第72-93页
     ·流式细胞术分析细胞凋亡(Annexin V-PE)第93-113页
     ·流式细胞术分析细胞凋亡(APO-DIRECT)第113-126页
     ·caspase3,caspase8,caspase9荧光定量PCR检测结果第126-127页
     ·Caspase8酶活性检测第127-128页
     ·Caspase 9 酶活性检测第128页
     ·Caspase3酶活性检测第128-130页
4 讨论第130-135页
   ·Du CV Rep蛋白核定位信号功能的研究第130-131页
   ·Du CV Rep蛋白生物学活性的研究第131-132页
   ·两种基因型Du CV ORF3蛋白的细胞凋亡活性差异研究第132-135页
5 结论第135-136页
6 参考文献第136-153页
致谢第153-154页
攻读学位期间发表论文情况第154页

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