摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
缩略词及英汉对照 | 第6-9页 |
1.前言 | 第9-15页 |
·有机阴离子转运多肽(OATP) | 第9-10页 |
·概述和分类 | 第9-10页 |
·OATP的结构 | 第10页 |
·有机阴离子转运多肽 1A2(OATP1A2) | 第10-12页 |
·OATP1A2概述 | 第10-11页 |
·OATP1A2对药物转运的作用 | 第11页 |
·细胞因子对OATP表达影响的研究概述 | 第11-12页 |
·TNFα 以及NFκB信号通路 | 第12-14页 |
·研究目的和意义 | 第14-15页 |
2.材料与方法 | 第15-35页 |
·主要仪器设备 | 第15页 |
·材料 | 第15-17页 |
·细胞株 | 第15页 |
·菌株与表达载体 | 第15-16页 |
·基因克隆引物 | 第16-17页 |
·常用试剂 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-35页 |
·主要溶液配方和培养基的配制 | 第17-18页 |
·Western blot相关试剂的配制 | 第18-21页 |
·荧光素酶报告基因表达载体的构建 | 第21-24页 |
·定点突变 | 第24-26页 |
·哺乳动物细胞培养 | 第26-28页 |
·SDS-PAGE-免疫印迹 | 第28-29页 |
·omegaPCR方法 | 第29-30页 |
·双荧光素酶报告基因检测 | 第30-31页 |
·染色质免疫沉淀技术 | 第31-34页 |
·统计学分析方法 | 第34-35页 |
3.结果与分析 | 第35-47页 |
·NFκB结合DNA共有序列的确定与SLCO1A2启动子中的NFκB靶位点的预测 | 第35-38页 |
·双荧光素酶报告基因表达载体的构建 | 第38-41页 |
·提取人乳腺癌细胞MCF7基因组DNA | 第38-39页 |
·SLCO1A2基因转录起始位点上游 2087bp和转录起始位点后 73bp片段的PCR扩增 | 第39页 |
·双荧光素酶报告基因表达载体的构建 | 第39-41页 |
·双荧光素酶报告基因表达载体的功能检测 | 第41-43页 |
·带有不同长度片段表达载体的活性 | 第41-42页 |
·突变体对SLCO1A2启动子活性的影响 | 第42-43页 |
·TNFα 对NFκB核转位的影响 | 第43-44页 |
·TNFα 中和抗体对SLCO1A2启动子活性的影响 | 第44-45页 |
·NFκB与SLCO1A2基因启动子中NFκB靶位点结合的体内验证 | 第45-47页 |
·细胞超声波破碎后染色质片段大小检测 | 第45-46页 |
·PCR检测结合NFκB转录因子SLCO1A2启动子区NFκB靶位点的DNA片段 | 第46-47页 |
4.结论与讨论 | 第47-49页 |
·结论 | 第47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
附录 | 第56-59页 |