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金黄色葡萄球菌ArtR的功能研究及RNAIII结合蛋白的鉴定

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 绪论第12-50页
   ·金黄色葡萄球菌与疾病第12-27页
     ·金黄色葡萄球菌基本生物学特征第12-13页
     ·金黄色葡萄球菌分类地位与谱系第13-15页
     ·金黄色葡萄球菌的可移动遗传元件第15-19页
     ·金黄色葡萄球菌致病因子第19-22页
     ·金黄色葡萄球菌的生物被膜第22-23页
     ·金黄色葡萄球菌的耐药性第23-25页
     ·金黄色葡萄球菌的调控因子第25-27页
   ·金黄色葡萄球菌中sRNA研究概况第27-44页
     ·细菌中sRNA概述第27-28页
     ·细菌中sRNA的种类第28-35页
     ·RNA作为调控子的优势第35-36页
     ·金黄色葡萄球菌中sRNA种类第36-37页
     ·金黄色葡萄球菌中sRNA的生理功能第37-40页
     ·sRNA的鉴定方法第40-44页
   ·sRNA结合蛋白研究概况第44-50页
     ·RNA结合蛋白简介第44页
     ·RNA结合蛋白的分类第44-46页
     ·金黄色葡萄球菌中sRNA结合蛋白研究现状第46-47页
     ·sRNA结合蛋白的鉴定方法第47-50页
第二章 金黄色葡萄球菌中新sRNA的鉴定和功能研究——ArtR通过调控sarT mRNA稳定性调控α溶血素的表达第50-74页
   ·绪论第50页
   ·实验材料与方法第50-60页
     ·实验菌株与质粒第50-54页
     ·DNA相关操作第54-56页
     ·RNA相关操作第56-59页
     ·蛋白质相关操作第59-60页
   ·实验结果第60-71页
     ·ArtR的发现第60-62页
     ·ArtR的大小和分布第62-64页
     ·金黄色葡萄球菌群体感应Agr系统调控ArtR的表达第64-66页
     ·ArtR通过间接的方式激活α溶血素的表达第66-67页
     ·ArtR通过RNA相互作用影响了转录因子SarT的水平第67-69页
     ·ArtR和SarT的mRNA的结合诱导RNase Ⅲ对其mRNA的降解第69-70页
     ·Hfq蛋白不参与ArtR的调控第70-71页
   ·讨论第71-74页
     ·ArtR是金黄色葡萄球菌特异性的sRNA第71-72页
     ·ArtR与群体感应系统的关系第72页
     ·sRNA对细菌调控网络有微调的作用第72-73页
     ·Hfq蛋白可能与金黄色葡萄球菌sRNA相关性不大第73-74页
第三章 金黄色葡萄球菌中RNAⅢ结合蛋白的鉴定第74-92页
   ·绪论第74页
   ·实验材料与方法第74-80页
     ·实验所用质粒和菌株第74-77页
     ·tRSA融合sRNA的构建与体外转录第77页
     ·RNA提取与荧光定量PCR第77-78页
     ·RNA结合蛋白的pull-down实验第78页
     ·MS鉴定蛋白质第78页
     ·蛋白质的表达第78-79页
     ·RNA-蛋白质相互作用的鉴定第79-80页
   ·实验结果第80-89页
     ·利用核酸适配体进行RNA pull-down方法的确立第80-81页
     ·tRSA融合RNAⅢ的合成第81页
     ·RNAⅢ结合蛋白的pull-down和MS鉴定第81-86页
     ·蛋白质的重组表达第86-87页
     ·RNAⅢ与蛋白质结合能力验证第87-89页
   ·讨论第89-92页
     ·tRSA方法与biotin标记方法的比较第89页
     ·pull-down实验体系的优化第89-90页
     ·RNA结合蛋白结合特异性探讨第90页
     ·鉴定RNA结合蛋白的功能需要进一步研究第90-92页
参考文献第92-104页
致谢第104-106页
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果第106-107页

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