| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·γ-氨基丁酸简介 | 第7-8页 |
| ·GABA的结构和理化性质 | 第7页 |
| ·GABA的生理功能及应用 | 第7-8页 |
| ·GABA的制备 | 第8-10页 |
| ·LAB发酵和固定化GAD生产GABA | 第9页 |
| ·重组C. glutamicum发酵生产GABA | 第9-10页 |
| ·谷氨酸脱羧酶 | 第10页 |
| ·C. glutamicum简介和L-谷氨酸的生物合成 | 第10-13页 |
| ·C. glutamicum简介 | 第10页 |
| ·L-谷氨酸的性质和生物合成途径 | 第10-13页 |
| ·影响L-谷氨酸合成的要素 | 第13页 |
| ·立题背景与意义 | 第13-14页 |
| ·本论文研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第15-25页 |
| ·实验材料 | 第15-19页 |
| ·实验菌株和质粒 | 第15-16页 |
| ·实验菌主要引物 | 第16-17页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| ·培养基及条件 | 第18-19页 |
| ·实验试剂、试剂盒和工具酶 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-25页 |
| ·分子实验操作 | 第19-20页 |
| ·敲除菌株的构建 | 第20-22页 |
| ·GAD表达菌株的构建 | 第22-23页 |
| ·C. glutamicum工程菌的上罐发酵 | 第23-24页 |
| ·发酵过程中OD562、残糖和氨基酸含量测定 | 第24页 |
| ·基因转录水平分析 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-38页 |
| ·C. glutamicum工程菌的构建 | 第25-29页 |
| ·L-谷氨酸合成相关基因的转录水平分析 | 第25-26页 |
| ·odhA、pyc、pknG敲除质粒的构建 | 第26页 |
| ·odhA、pyc、pknG敲除菌株的构建 | 第26-28页 |
| ·GAD表达工程菌株的构建 | 第28-29页 |
| ·对照GAD菌SNW200 的上罐发酵 | 第29-30页 |
| ·发酵过程中OD562、残糖以及耗糖的变化 | 第29-30页 |
| ·发酵过程L-谷氨酸和GABA的产量以及总浓度的变化 | 第30页 |
| ·odhA敲除GAD菌SNW201 的上罐发酵 | 第30-32页 |
| ·发酵过程的OD562、残糖以及耗糖的变化 | 第31页 |
| ·发酵过程L-谷氨酸和GABA的产量以及总浓度的变化 | 第31-32页 |
| ·相关基因转录水平分析 | 第32页 |
| ·pyc敲除GAD菌SNW202 的上罐发酵 | 第32-35页 |
| ·发酵过程的OD562、残糖以及耗糖的变化 | 第32-33页 |
| ·发酵过程L-谷氨酸和GABA的产量以及总浓度变化 | 第33-34页 |
| ·相关基因转录水平分析 | 第34-35页 |
| ·pknG敲除GAD菌SNW203 的上罐发酵 | 第35-38页 |
| ·SNW203 菌体表面特征的变化 | 第35页 |
| ·发酵过程的OD562、残糖以及耗糖的变化 | 第35-36页 |
| ·发酵过程L-谷氨酸和GABA的产量以及总浓度的变化 | 第36-37页 |
| ·相关基因转录水平分析 | 第37-38页 |
| 主要结论与展望 | 第38-40页 |
| 主要结论 | 第38页 |
| 展望 | 第38-40页 |
| 致谢 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第46页 |