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代谢工程改造谷氨酸棒状杆菌生产L-异亮氨酸

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-17页
   ·L-异亮氨酸概述第8-9页
     ·L-异亮氨酸的理化性质第8页
     ·L-异亮氨酸的用途第8页
     ·L-异亮氨酸的工业生产第8-9页
   ·L-异亮氨酸在谷氨酸棒杆菌中的生物合成及其代谢工程第9-11页
     ·L-异亮氨酸的生物合成途径第9-11页
     ·L-异亮氨酸的代谢改造策略第11页
   ·翻译过程及相关因子第11-15页
     ·蛋白质的合成机制第11-14页
     ·延伸因子EF-Tu第14页
     ·延伸因子EF-G第14-15页
     ·核糖体循环因子RRF第15页
   ·立题依据和研究意义第15-16页
   ·研究内容第16-17页
第二章 材料与方法第17-27页
   ·实验材料与仪器设备第17-21页
     ·菌株和质粒第17页
     ·主要引物第17-18页
     ·培养基和培养条件第18-20页
     ·工具酶和试剂第20页
     ·主要仪器第20-21页
   ·实验方法第21-27页
     ·分子实验操作第21-23页
     ·表达质粒和菌株的构建第23-24页
     ·酶活测定第24-25页
     ·荧光量测定第25页
     ·发酵参数测定第25-26页
     ·实时荧光定量PCR第26-27页
第三章 结果和讨论第27-42页
   ·翻译因子对L-异亮氨酸的影响第27-32页
     ·表达EF-G能提高L-异亮氨酸的产量第28-29页
     ·核糖体循环因子的表达可以提高L-异亮氨酸的产量第29-31页
     ·EF-Tu提高其他氨基酸的产量第31页
     ·EF-Ts表达的效果不明显第31-32页
   ·共表达菌株的构建第32-35页
     ·EF-G和RRF双表达进一步提高L-异亮氨酸的产量第32-33页
     ·IWJ001/pDXW8fusA-frr-ilvBNA-ppnk菌株的构建第33-34页
     ·IWJ001/pDXW8fusA-frr-ilvBNA-ppnk罐上发酵第34-35页
   ·EF-G和RRF促进L-异亮氨酸合成的初步探究第35-38页
     ·L-异亮氨酸合成途径关键酶的转录水平第35-36页
     ·L-异亮氨酸合成途径关键酶的蛋白水平第36-37页
     ·EF-G和RRF提高了GFP的胞内含量第37-38页
   ·利用无抗表达系统构建菌株第38-42页
     ·alr缺陷菌株的构建第39页
     ·IWJ001Δalr/p JYW4fusA的构建第39-40页
     ·发酵培养基中IWJ001Δalr/p JYW4fusA质粒稳定性检测第40-42页
主要结论与展望第42-44页
 主要结论第42页
 展望第42-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-50页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第50页

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