摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-17页 |
·L-异亮氨酸概述 | 第8-9页 |
·L-异亮氨酸的理化性质 | 第8页 |
·L-异亮氨酸的用途 | 第8页 |
·L-异亮氨酸的工业生产 | 第8-9页 |
·L-异亮氨酸在谷氨酸棒杆菌中的生物合成及其代谢工程 | 第9-11页 |
·L-异亮氨酸的生物合成途径 | 第9-11页 |
·L-异亮氨酸的代谢改造策略 | 第11页 |
·翻译过程及相关因子 | 第11-15页 |
·蛋白质的合成机制 | 第11-14页 |
·延伸因子EF-Tu | 第14页 |
·延伸因子EF-G | 第14-15页 |
·核糖体循环因子RRF | 第15页 |
·立题依据和研究意义 | 第15-16页 |
·研究内容 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
·实验材料与仪器设备 | 第17-21页 |
·菌株和质粒 | 第17页 |
·主要引物 | 第17-18页 |
·培养基和培养条件 | 第18-20页 |
·工具酶和试剂 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·实验方法 | 第21-27页 |
·分子实验操作 | 第21-23页 |
·表达质粒和菌株的构建 | 第23-24页 |
·酶活测定 | 第24-25页 |
·荧光量测定 | 第25页 |
·发酵参数测定 | 第25-26页 |
·实时荧光定量PCR | 第26-27页 |
第三章 结果和讨论 | 第27-42页 |
·翻译因子对L-异亮氨酸的影响 | 第27-32页 |
·表达EF-G能提高L-异亮氨酸的产量 | 第28-29页 |
·核糖体循环因子的表达可以提高L-异亮氨酸的产量 | 第29-31页 |
·EF-Tu提高其他氨基酸的产量 | 第31页 |
·EF-Ts表达的效果不明显 | 第31-32页 |
·共表达菌株的构建 | 第32-35页 |
·EF-G和RRF双表达进一步提高L-异亮氨酸的产量 | 第32-33页 |
·IWJ001/pDXW8fusA-frr-ilvBNA-ppnk菌株的构建 | 第33-34页 |
·IWJ001/pDXW8fusA-frr-ilvBNA-ppnk罐上发酵 | 第34-35页 |
·EF-G和RRF促进L-异亮氨酸合成的初步探究 | 第35-38页 |
·L-异亮氨酸合成途径关键酶的转录水平 | 第35-36页 |
·L-异亮氨酸合成途径关键酶的蛋白水平 | 第36-37页 |
·EF-G和RRF提高了GFP的胞内含量 | 第37-38页 |
·利用无抗表达系统构建菌株 | 第38-42页 |
·alr缺陷菌株的构建 | 第39页 |
·IWJ001Δalr/p JYW4fusA的构建 | 第39-40页 |
·发酵培养基中IWJ001Δalr/p JYW4fusA质粒稳定性检测 | 第40-42页 |
主要结论与展望 | 第42-44页 |
主要结论 | 第42页 |
展望 | 第42-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |