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香蕉在尖孢镰刀菌枯萎病胁迫下的数字基因差异表达谱分析

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
1 前言第10-21页
   ·香蕉第10页
   ·香蕉枯萎病第10-14页
     ·香蕉枯萎病的病原菌第10-11页
     ·香蕉枯萎病的分布与危害第11页
     ·香蕉枯萎病菌的生物学特性第11-12页
     ·香蕉枯萎病的症状与传播第12页
     ·香蕉枯萎病的防治第12-14页
       ·检验检疫第13页
       ·选育和利用抗性品种第13页
       ·香蕉枯萎病的化学防治第13-14页
       ·香蕉枯萎病的生物防治第14页
   ·香蕉基因组测序计划第14-15页
   ·香蕉转录组学研究进展第15-16页
   ·数字基因表达谱测序技术第16-17页
   ·半定量RT-PCR技术第17页
   ·cDNA末端快速扩增技术第17-18页
     ·RACE技术的特点第17-18页
     ·RACE技术的原理第18页
   ·本研究的目的意义、内容与技术路线第18-21页
     ·目的与意义第18-19页
     ·研究内容第19-20页
     ·技术路线第20-21页
2 材料与方法第21-36页
   ·植物材料与枯萎病病原菌第21页
   ·主要仪器及试剂第21-22页
   ·尖孢镰刀菌古巴专化型的活化与培养第22页
   ·香蕉的枯萎病接种与取样第22-23页
   ·数字基因表达谱测序第23页
   ·香蕉基因表达谱的生物信息学分析第23-26页
     ·测序质量评估分析第24页
     ·基因表达量统计第24-25页
     ·差异表达基因统计分析第25页
     ·Gene Ontology功能显著性富集分析第25-26页
     ·Pathway显著性富集分析第26页
   ·香蕉叶片总RNA提取方法与检测第26-27页
     ·香蕉总RNA提取的器具准备第26页
     ·香蕉叶片总RNA提取第26-27页
     ·香蕉叶片总RNA的质量检测第27页
   ·半定量RT-PCR第27-31页
     ·RT-PCR引物设计第27-29页
     ·cDNA第一链的合成第29-30页
     ·半定量RT-PCR扩增第30-31页
   ·cDNA全长的扩增与分析第31-36页
     ·基因cDNA全长扩增的引物设计第31-32页
     ·RACE-Ready cDNA的准备第32页
     ·巢式PCR快速扩增显著差异基因cDNA末端第32-33页
     ·基因扩增片段的切胶回收第33-34页
     ·扩增片段与T载体的连接第34页
     ·重组质粒的遗传转化第34页
     ·阳性克隆鉴定第34-35页
     ·目的基因片段的测序及生物信息学分析第35-36页
3 结果与分析第36-79页
   ·病原菌的活化情况第36页
   ·香蕉枯萎病尖孢镰刀菌接种第36-37页
   ·香蕉的数字基因表达谱测序结果第37-64页
     ·测序数据统计分析第37-38页
     ·测序质量评估第38-39页
     ·测序饱和度分析第39-40页
     ·测序随机性统计分析第40-41页
     ·Reads在参考基因组上的分布分析第41-42页
     ·基因表达量统计第42-43页
     ·差异基因的筛选第43-45页
     ·香蕉接种病原菌后不同时间点的差异表达基因第45-47页
     ·Gene Ontology功能分类第47-48页
     ·Gene Ontology显著性富集分析第48-52页
     ·Pathway显著性富集分析第52-56页
     ·植物与病原互作pathway分析第56-64页
   ·差异表达基因的RT-PCR验证第64-69页
     ·香蕉总RNA的检测结果第64页
     ·植物与病原互作通路中显著差异基因的RT-PCR分析验证第64-69页
   ·重要基因cDNA全长的扩增与分析第69-74页
   ·GSMUA_Achr1T02750_001和GSMUA_AchrUn_randomT21800-001基因在染色体上的分布第74-75页
   ·GSMUA_Achr1T02750_001和GSMUA AchrUn_randomT21800_001基因编码氨基酸预测第75-77页
   ·GSMUA Achr1T02750_001和GSMUA_AchrUn_randomT21800_001蛋白结构域分析第77-79页
4 讨论第79-82页
   ·香蕉枯萎病病原菌接种方法的选择第79页
   ·香蕉与枯萎病尖孢镰刀菌互作的分子机制推测第79-81页
   ·尖孢镰刀菌枯萎病胁迫下香蕉根与叶片数字基因表达谱比较分析第81页
   ·本研究后续工作第81-82页
5 结论第82-83页
参考文献第83-88页
致谢第88页

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