| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 青钱柳活性成分 | 第11页 |
| 2 细胞系模型 | 第11-12页 |
| ·合成脂肪细胞—新分离细胞,原代细胞系,建立的细胞系 | 第11-12页 |
| ·脂肪细胞的形成、代谢、凋亡 | 第12页 |
| ·脂肪组织的辅助细胞 | 第12页 |
| 3 体外细胞模型 | 第12-13页 |
| 4 脂肪细胞的分化 | 第13-21页 |
| ·脂肪组织是一个分泌器官 | 第13-14页 |
| ·脂肪细胞和脂肪组织的来源 | 第14-15页 |
| ·脂肪细胞分化的体外实验 | 第15-17页 |
| ·脂肪细胞的分化过程 | 第17-21页 |
| 5 脂肪细胞代谢相关基因 | 第21-23页 |
| ·脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FAS) | 第21-22页 |
| ·葡萄糖转运蛋白-4(glucose transport protein-4, GLUT-4) | 第22-23页 |
| 6 课题来源及研究目的与意义 | 第23-24页 |
| ·课题来源 | 第23页 |
| ·研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 青钱柳多糖的分离纯化 | 第24-33页 |
| 1 实验材料与方法 | 第24-26页 |
| ·实验材料与仪器 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-26页 |
| 2 实验结果 | 第26-31页 |
| ·青钱柳多糖的提取、分离、纯化 | 第26页 |
| ·青钱柳多糖分子量的测定 | 第26-31页 |
| 3 讨论 | 第31-32页 |
| 4 小结 | 第32-33页 |
| 第三章 青钱柳多糖对 3T3-L1 前脂肪细胞增殖分化的影响 | 第33-46页 |
| 1 实验材料与方法 | 第33-35页 |
| ·实验材料与仪器 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-35页 |
| 2 实验结果与分析 | 第35-45页 |
| ·青钱柳多糖对 3T3-L1 前脂肪细胞的增殖的影响 | 第35-38页 |
| ·3T3-L1 脂肪细胞分化前后的变化 | 第38页 |
| ·青钱柳多糖对 3T3-L1 前脂肪细胞的分化的影响 | 第38-45页 |
| 3 讨论 | 第45页 |
| 4 小结 | 第45-46页 |
| 第四章 青钱柳多糖对 3T3-L1 脂肪细胞基因表达的影响 | 第46-67页 |
| 1 实验材料 | 第46页 |
| ·实验原料 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| 2 实验方法 | 第46-49页 |
| ·利用Trizol 提取各实验组 3T3-L1 脂肪细胞中总RNA | 第46-47页 |
| ·逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) | 第47-49页 |
| 3 实验结果 | 第49-65页 |
| ·3T3-L1 脂肪细胞中总RNA提取结果 | 第49页 |
| ·青钱柳多糖对 3T3-L1 脂肪细胞基因表达的影响 | 第49-65页 |
| 4 讨论 | 第65-66页 |
| 5 小结 | 第66-67页 |
| 第五章 青钱柳多糖对 3T3-L1 脂肪细胞蛋白表达的影响 | 第67-81页 |
| 1 实验材料 | 第67-68页 |
| ·实验原料 | 第67页 |
| ·主要试剂 | 第67页 |
| ·主要仪器 | 第67-68页 |
| ·Western Blot 实验试剂配制 | 第68页 |
| 2 试验方法 | 第68-72页 |
| ·利用Western及IP细胞裂解液提取各实验组 3T3-L1 脂肪细胞中总蛋白质 | 第68-69页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白完整性检测 | 第69-71页 |
| ·印迹转膜 | 第71页 |
| ·转膜检测 | 第71页 |
| ·抗原检测 | 第71-72页 |
| (1) PBST漂洗印迹膜数次 | 第71页 |
| (2) 封闭 | 第71页 |
| (3) 从封闭缓冲液中取出印迹膜,用 PBST 漂洗印迹膜数次,每次 5 min | 第71页 |
| (4) 结合一抗 | 第71页 |
| (5) 洗涤 | 第71页 |
| (6) 结合二抗 | 第71-72页 |
| (7) 洗涤 | 第72页 |
| (8) 显色剂的配制 | 第72页 |
| (9) 将(7)中洗涤好的 PVDF 膜浸入上述显色试剂中,缓慢摇动直到显色清晰,需在 30 min 之内完成,染色结果为蓝紫色 | 第72页 |
| (10) 用 ddH2O 冲洗以终止反应,取出 PVDF 膜,用滤纸吸干,将印迹膜放入塑料带中,拍照,封存 | 第72页 |
| ·凝胶成像分析及数据分析 | 第72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-79页 |
| ·总蛋白提取纯度及完整性检测 | 第72-73页 |
| ·青钱柳多糖对 3T3-L1 脂肪细胞各蛋白表达的影响 | 第73-79页 |
| 4 讨论 | 第79-80页 |
| 5 小结 | 第80-81页 |
| 结论 | 第81-83页 |
| 1 本实验获得的成果 | 第81-82页 |
| 2 本研究存在的问题及展望 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-99页 |
| 在校期间的学习成果 | 第99-100页 |
| 已发表的论文 | 第99页 |
| 参与的课题 | 第99页 |
| 学术会议 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 附录 | 第101-104页 |