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青钱柳多糖对3T3-L1脂肪细胞的细胞增殖及脂肪代谢的影响

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩略词第9-11页
第一章 文献综述第11-24页
 1 青钱柳活性成分第11页
 2 细胞系模型第11-12页
   ·合成脂肪细胞—新分离细胞,原代细胞系,建立的细胞系第11-12页
   ·脂肪细胞的形成、代谢、凋亡第12页
   ·脂肪组织的辅助细胞第12页
 3 体外细胞模型第12-13页
 4 脂肪细胞的分化第13-21页
   ·脂肪组织是一个分泌器官第13-14页
   ·脂肪细胞和脂肪组织的来源第14-15页
   ·脂肪细胞分化的体外实验第15-17页
   ·脂肪细胞的分化过程第17-21页
 5 脂肪细胞代谢相关基因第21-23页
   ·脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FAS)第21-22页
   ·葡萄糖转运蛋白-4(glucose transport protein-4, GLUT-4)第22-23页
 6 课题来源及研究目的与意义第23-24页
   ·课题来源第23页
   ·研究目的与意义第23-24页
第二章 青钱柳多糖的分离纯化第24-33页
 1 实验材料与方法第24-26页
   ·实验材料与仪器第24页
   ·实验方法第24-26页
 2 实验结果第26-31页
   ·青钱柳多糖的提取、分离、纯化第26页
   ·青钱柳多糖分子量的测定第26-31页
 3 讨论第31-32页
 4 小结第32-33页
第三章 青钱柳多糖对 3T3-L1 前脂肪细胞增殖分化的影响第33-46页
 1 实验材料与方法第33-35页
   ·实验材料与仪器第33-34页
   ·实验方法第34-35页
 2 实验结果与分析第35-45页
   ·青钱柳多糖对 3T3-L1 前脂肪细胞的增殖的影响第35-38页
   ·3T3-L1 脂肪细胞分化前后的变化第38页
   ·青钱柳多糖对 3T3-L1 前脂肪细胞的分化的影响第38-45页
 3 讨论第45页
 4 小结第45-46页
第四章 青钱柳多糖对 3T3-L1 脂肪细胞基因表达的影响第46-67页
 1 实验材料第46页
   ·实验原料第46页
   ·主要试剂第46页
   ·主要仪器第46页
 2 实验方法第46-49页
   ·利用Trizol 提取各实验组 3T3-L1 脂肪细胞中总RNA第46-47页
   ·逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)第47-49页
 3 实验结果第49-65页
   ·3T3-L1 脂肪细胞中总RNA提取结果第49页
   ·青钱柳多糖对 3T3-L1 脂肪细胞基因表达的影响第49-65页
 4 讨论第65-66页
 5 小结第66-67页
第五章 青钱柳多糖对 3T3-L1 脂肪细胞蛋白表达的影响第67-81页
 1 实验材料第67-68页
   ·实验原料第67页
   ·主要试剂第67页
   ·主要仪器第67-68页
   ·Western Blot 实验试剂配制第68页
 2 试验方法第68-72页
   ·利用Western及IP细胞裂解液提取各实验组 3T3-L1 脂肪细胞中总蛋白质第68-69页
   ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及蛋白完整性检测第69-71页
   ·印迹转膜第71页
   ·转膜检测第71页
   ·抗原检测第71-72页
   (1) PBST漂洗印迹膜数次第71页
   (2) 封闭第71页
   (3) 从封闭缓冲液中取出印迹膜,用 PBST 漂洗印迹膜数次,每次 5 min第71页
   (4) 结合一抗第71页
   (5) 洗涤第71页
   (6) 结合二抗第71-72页
   (7) 洗涤第72页
   (8) 显色剂的配制第72页
   (9) 将(7)中洗涤好的 PVDF 膜浸入上述显色试剂中,缓慢摇动直到显色清晰,需在 30 min 之内完成,染色结果为蓝紫色第72页
   (10) 用 ddH2O 冲洗以终止反应,取出 PVDF 膜,用滤纸吸干,将印迹膜放入塑料带中,拍照,封存第72页
   ·凝胶成像分析及数据分析第72页
 3 结果与分析第72-79页
   ·总蛋白提取纯度及完整性检测第72-73页
   ·青钱柳多糖对 3T3-L1 脂肪细胞各蛋白表达的影响第73-79页
 4 讨论第79-80页
 5 小结第80-81页
结论第81-83页
 1 本实验获得的成果第81-82页
 2 本研究存在的问题及展望第82-83页
参考文献第83-99页
在校期间的学习成果第99-100页
 已发表的论文第99页
 参与的课题第99页
 学术会议第99-100页
致谢第100-101页
附录第101-104页

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