| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-23页 |
| ·阿魏酸酯酶 | 第13页 |
| ·阿魏酸酯酶微生物来源及分类 | 第13-14页 |
| ·阿魏酸酯酶基因序列相似性和基因催化分子模型 | 第14-15页 |
| ·阿魏酸酯酶的序列相似性 | 第14页 |
| ·阿魏酸酯酶空间拓补结构 | 第14-15页 |
| ·阿魏酸酯酶的克隆与表达 | 第15-17页 |
| ·阿魏酸酯酶的表达体系 | 第17-18页 |
| ·植物细胞 | 第17页 |
| ·细菌 | 第17页 |
| ·真菌 | 第17-18页 |
| ·阿魏酸酯酶与其它酶的协同作用的研究 | 第18-19页 |
| ·阿魏酸酯酶的应用 | 第19-21页 |
| ·制浆造纸 | 第19页 |
| ·生物合成 | 第19页 |
| ·动物养殖业 | 第19-20页 |
| ·燃料乙醇 | 第20页 |
| ·食品添加 | 第20-21页 |
| ·论文研究立题背景和内容 | 第21-23页 |
| 第2章 阿魏酸酯酶产生菌的筛选及菌种鉴定 | 第23-41页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·菌株与土样 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·仪器及生化试剂 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-30页 |
| ·阿魏酸酯酶产生菌的筛选与形态学鉴定 | 第24-25页 |
| ·菌株的分子水平鉴定 | 第25-30页 |
| ·染色体基因组 DNA 的提取 | 第25页 |
| ·18S rDNA 基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·ITS（Internal Transcribed Spacer）的扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物亚克隆及大肠杆菌转化 | 第28页 |
| ·CaCl2转化大肠杆菌细胞 | 第28-29页 |
| ·DNA 序列测定 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-40页 |
| ·产阿魏酸酯酶菌株的筛选 | 第30-31页 |
| ·3 株菌染色体 DNA 的提取 | 第31-32页 |
| ·3 株菌 18S rDNA 的扩增 | 第32-34页 |
| ·3 株的 18S rDNA 的序列分析 | 第34-36页 |
| ·3 株菌 ITS 序列的克隆 | 第36-38页 |
| ·3 株菌的 ITS 序列分析 | 第38-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第3章 土曲霉阿魏酸酯酶基因的克隆及体外表达载体的构建 | 第41-53页 |
| ·试验材料 | 第41页 |
| ·菌株 | 第41页 |
| ·引物 | 第41页 |
| ·培养基及化学试剂 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-46页 |
| ·土曲霉阿魏酸酯酶基因的分离 | 第41页 |
| ·重叠拼接 PCR 技术克隆土曲霉阿魏酸酯酶的基因 | 第41-43页 |
| ·毕赤酵母表达载体 pPIC9K-fae 的构建 | 第43-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-52页 |
| ·土曲霉 SD03 阿魏酸酯酶基因的克隆 | 第46-47页 |
| ·土曲霉 SD03 阿魏酸酯酶基因的克隆 | 第47-50页 |
| ·表达载体 pPIC9K-fae 的构建 | 第50-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第4章 表达载体 PPIC9K-FAE 转化毕赤酵母 | 第53-65页 |
| ·试验材料 | 第53-54页 |
| ·菌株 | 第53页 |
| ·生化试剂 | 第53-54页 |
| ·培养基 | 第54页 |
| ·主要仪器设备 | 第54页 |
| ·试验方法 | 第54-59页 |
| ·表达载体 pPIC9K-fae 的线性化 | 第54页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第54-55页 |
| ·毕赤酵母转化 | 第55-56页 |
| ·酵母转化子的快速筛选 | 第56页 |
| ·酵母转化子的鉴定 | 第56-59页 |
| ·试验结果及分析 | 第59-63页 |
| ·重组表达载体 pPIC9K-fae 线性化 | 第59页 |
| ·毕赤酵母电转化结果 | 第59-60页 |
| ·毕赤酵母 fae 活性转化子的筛选 | 第60-61页 |
| ·毕赤酵母 fae 转化子的分子生物学鉴定 | 第61-63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 第5章 毕赤酵母转化子的发酵性能及活性测定 | 第65-77页 |
| ·试验材料 | 第65-67页 |
| ·试剂 | 第65-66页 |
| ·培养基 | 第66-67页 |
| ·试验步骤 | 第67-70页 |
| ·毕赤酵母转化子的发酵 | 第67页 |
| ·发酵液的处理 | 第67页 |
| ·SDS－PAGE 凝胶电泳 | 第67-68页 |
| ·毕赤酵母转化子阿魏酸酯酶酶活的测定 | 第68-70页 |
| ·结果与分析 | 第70-76页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第70-72页 |
| ·6株转化子的阿魏酸酯酶酶活 | 第72-75页 |
| ·转化子 G3 的 SDS-PAGE 分析 | 第75-76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 全文总结 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第87页 |
