摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
第一章 绪论 | 第7-15页 |
·甘油概况 | 第7-8页 |
·甘油简介 | 第7页 |
·甘油的渗透压平衡作用 | 第7页 |
·酵母细胞甘油的合成 | 第7-8页 |
·促有丝分裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 在酵母中的研究进展 | 第8-9页 |
·高渗甘油应答 (HOG-MAPK) 途径 | 第9-11页 |
·SLN1 分支途径 | 第10页 |
·SHO1 分支途径 | 第10-11页 |
·促有丝分裂原活化蛋白激酶 Hog1 的研究现状 | 第11页 |
·Hog1 参与的转录调控机制 | 第11页 |
·Hog1 对 HOG-MAPK 途径的负调控 | 第11页 |
·产甘油假丝酵母的耐高渗生理特性及其研究现状 | 第11-12页 |
·产甘油假丝酵母代谢关键基因的研究 | 第11-12页 |
·产甘油假丝酵母耐高渗高产甘油的代谢机理研究进展 | 第12页 |
·Self-Formed Adaptor PCR (SEFA PCR) | 第12-14页 |
·本课题立题意义及研究内容 | 第14-15页 |
·立题意义 | 第14页 |
·主要研究内容 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-20页 |
·材料 | 第15-16页 |
·菌株、质粒 | 第15页 |
·主要化学试剂及工具酶 | 第15页 |
·培养基 | 第15页 |
·主要实验仪器 | 第15-16页 |
·方法 | 第16-20页 |
·培养方法 | 第16页 |
·测定方法 | 第16页 |
·酵母基因组 DNA 的提取 | 第16页 |
·简并引物 PCR | 第16页 |
·SEFA PCR (Self-formed Adaptor PCR) | 第16-17页 |
·感受态细胞制备、质粒 DNA 的提取与验证 | 第17页 |
·酵母表达载体的构建 | 第17-18页 |
·酶切与连接 | 第18页 |
·醋酸锂转化 | 第18页 |
·总 RNA 提取及 DNA 的去除 | 第18页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第18-19页 |
·RT-PCR 最适扩增条件优化 | 第19页 |
·半定量数据分析 | 第19-20页 |
第三章 结果与讨论 | 第20-39页 |
·产甘油假丝酵母 CgHOG1 基因的克隆及生物信息学分析 | 第20-28页 |
·简并引物 PCR 克隆 CgHOG1 基因部分片段 | 第20-21页 |
·SEFA PCR 扩增 CgHOG1 基因全长序列 | 第21-22页 |
·CgHOG1 基因的序列及其遗传密码分析 | 第22-25页 |
·CgHOG1 基因的多序列比对及其遗传进化 | 第25-27页 |
·CgHog1 的结构分析 | 第27-28页 |
·产甘油假丝酵母 CgHOG1 基因在 S. cerevisiae hog1 缺失突变株中的互补表达 | 第28-34页 |
·酵母表达载体的构建 | 第28-29页 |
·CgHOG1 基因表达对 S. cerevisiae hog1 缺失突变株生长的影响 | 第29-30页 |
·CgHOG1 基因表达对 S. cerevisiae hog1 缺失突变株甘油合成水平的影响 | 第30-31页 |
·不同 NaCl 浓度下 S. cerevisiae hog1 -CgHOG1 重组菌中 GPD1 的转录 | 第31-34页 |
·不同渗透压条件下产甘油假丝酵母 CgHOG1 和 CgGPD 基因的转录水平 | 第34-39页 |
·总 RNA 的提取及半定量 RT- PCR 条件优化 | 第34-36页 |
·不同葡萄糖浓度下产甘油假丝酵母中 CgHOG1 和 CgGPD 的转录水平 | 第36-37页 |
·不同 NaCl 浓度下产甘油假丝酵母中 CgHOG1 和 CgGPD 的转录水平 | 第37-39页 |
主要结论与展望 | 第39-40页 |
主要结论 | 第39页 |
展望 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-44页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第44页 |