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产甘油假丝酵母高渗甘油应答途径关键基因CgHOG1的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-15页
   ·甘油概况第7-8页
     ·甘油简介第7页
     ·甘油的渗透压平衡作用第7页
     ·酵母细胞甘油的合成第7-8页
   ·促有丝分裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 在酵母中的研究进展第8-9页
   ·高渗甘油应答 (HOG-MAPK) 途径第9-11页
     ·SLN1 分支途径第10页
     ·SHO1 分支途径第10-11页
   ·促有丝分裂原活化蛋白激酶 Hog1 的研究现状第11页
     ·Hog1 参与的转录调控机制第11页
     ·Hog1 对 HOG-MAPK 途径的负调控第11页
   ·产甘油假丝酵母的耐高渗生理特性及其研究现状第11-12页
     ·产甘油假丝酵母代谢关键基因的研究第11-12页
     ·产甘油假丝酵母耐高渗高产甘油的代谢机理研究进展第12页
   ·Self-Formed Adaptor PCR (SEFA PCR)第12-14页
   ·本课题立题意义及研究内容第14-15页
     ·立题意义第14页
     ·主要研究内容第14-15页
第二章 材料与方法第15-20页
   ·材料第15-16页
     ·菌株、质粒第15页
     ·主要化学试剂及工具酶第15页
     ·培养基第15页
     ·主要实验仪器第15-16页
   ·方法第16-20页
     ·培养方法第16页
     ·测定方法第16页
     ·酵母基因组 DNA 的提取第16页
     ·简并引物 PCR第16页
     ·SEFA PCR (Self-formed Adaptor PCR)第16-17页
     ·感受态细胞制备、质粒 DNA 的提取与验证第17页
     ·酵母表达载体的构建第17-18页
     ·酶切与连接第18页
     ·醋酸锂转化第18页
     ·总 RNA 提取及 DNA 的去除第18页
     ·cDNA 第一条链的合成第18-19页
     ·RT-PCR 最适扩增条件优化第19页
     ·半定量数据分析第19-20页
第三章 结果与讨论第20-39页
   ·产甘油假丝酵母 CgHOG1 基因的克隆及生物信息学分析第20-28页
     ·简并引物 PCR 克隆 CgHOG1 基因部分片段第20-21页
     ·SEFA PCR 扩增 CgHOG1 基因全长序列第21-22页
     ·CgHOG1 基因的序列及其遗传密码分析第22-25页
     ·CgHOG1 基因的多序列比对及其遗传进化第25-27页
     ·CgHog1 的结构分析第27-28页
   ·产甘油假丝酵母 CgHOG1 基因在 S. cerevisiae hog1 缺失突变株中的互补表达第28-34页
     ·酵母表达载体的构建第28-29页
     ·CgHOG1 基因表达对 S. cerevisiae hog1 缺失突变株生长的影响第29-30页
     ·CgHOG1 基因表达对 S. cerevisiae hog1 缺失突变株甘油合成水平的影响第30-31页
     ·不同 NaCl 浓度下 S. cerevisiae hog1 -CgHOG1 重组菌中 GPD1 的转录第31-34页
   ·不同渗透压条件下产甘油假丝酵母 CgHOG1 和 CgGPD 基因的转录水平第34-39页
     ·总 RNA 的提取及半定量 RT- PCR 条件优化第34-36页
     ·不同葡萄糖浓度下产甘油假丝酵母中 CgHOG1 和 CgGPD 的转录水平第36-37页
     ·不同 NaCl 浓度下产甘油假丝酵母中 CgHOG1 和 CgGPD 的转录水平第37-39页
主要结论与展望第39-40页
 主要结论第39页
 展望第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-44页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第44页

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