| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 縮略语表 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-12页 |
| ·肿瘤个体化医疗简介 | 第8页 |
| ·常见关键基因在肿瘤个性化治疗中的重要意义 | 第8-11页 |
| ·常见基因突变检测在肿瘤个性化治疗中的意义 | 第8-9页 |
| ·常见基因表达在肿瘤个性化治疗中的意义 | 第9-10页 |
| ·常见SNP在肿瘤个性化治疗中的意义 | 第10-11页 |
| ·本论文立题的意义 | 第11-12页 |
| 第二章 脑胶质瘤关键基因MGMT甲基化检测方法的建立 | 第12-32页 |
| ·背景知识 | 第12-18页 |
| ·脑胶质瘤简介 | 第12页 |
| ·MGMT基因与脑胶质瘤治疗关系 | 第12-13页 |
| ·替莫唑胺药物简介 | 第13-14页 |
| ·MGMT基因简介 | 第14-15页 |
| ·DNA甲基化检测方法综述 | 第15-18页 |
| ·材料与仪器 | 第18-19页 |
| ·主要材料与试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-24页 |
| ·两步法MSP引物设计 | 第19页 |
| ·阳性对照SW480细胞培养 | 第19-21页 |
| ·正常人外周血DNA提取 | 第21页 |
| ·亚硫酸氢盐对DNA样本进行预处理 | 第21-22页 |
| ·甲基化特异性PCR(MSP) | 第22-24页 |
| ·凝胶电泳及检测 | 第24页 |
| ·结果分析 | 第24-31页 |
| ·引物用量的优化 | 第24-25页 |
| ·特异性实验 | 第25-26页 |
| ·不同PCR酶的比较 | 第26-27页 |
| ·灵敏度实验 | 第27-28页 |
| ·一步法两步法结果比对 | 第28-29页 |
| ·本方法与Chemicon结果比对 | 第29-30页 |
| ·本方法对10例临床样本的检测 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第三章 利用ARMS方法检测PIK3CA基因突变 | 第32-49页 |
| ·背景知识 | 第32-36页 |
| ·结直肠癌简介 | 第32页 |
| ·PIK3CA基因简介 | 第32-33页 |
| ·EGFR信号通路简介 | 第33-34页 |
| ·PIK3CA基因的突变状态 | 第34-35页 |
| ·两种突变技术的简介 | 第35-36页 |
| ·材料与仪器 | 第36-37页 |
| ·主要材料 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·PIK3CA3个热点突变及野生型质粒的构建 | 第37-42页 |
| ·ARMS检测PIK3CA基因突变操作步骤 | 第42-43页 |
| ·结果分析 | 第43-47页 |
| ·PIK3CA突变位点片段的扩增 | 第43-44页 |
| ·阳性克隆的测序验证 | 第44-45页 |
| ·ARMS检测突变质粒方法的建立 | 第45-47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 全文总结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 致谢 | 第58页 |