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一种来源于Enterobacter sp.CGMCC2487菌株的木糖苷酶基因的克隆、异源表达及产物的生化特性研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 综述第10-23页
   ·紫杉醇第10-11页
   ·紫杉醇的来源第11-12页
     ·从植物中提取紫杉醇第11页
     ·利用植物细胞产生紫杉醇第11页
     ·真菌发酵法第11-12页
     ·紫杉醇的化学全合成第12页
     ·紫杉醇的半合成第12页
   ·生物转化在药物生产中的作用第12-14页
     ·生物转化及其优点第12-13页
     ·生物转化在紫杉醇生产中的应用第13-14页
   ·β-木糖苷酶的研究进展第14-21页
     ·β-木糖苷酶的分类第14-15页
     ·β-木糖苷酶的来源第15页
     ·β-木糖苷酶基因的克隆第15-16页
     ·β-木糖苷酶的酶学性质第16-19页
     ·β-木糖苷酶的结构特点和催化机制第19-20页
     ·β-木糖苷酶的应用前景第20-21页
   ·本实验相关研究背景第21-23页
第二章 材料与方法第23-44页
   ·实验材料与仪器第23-25页
     ·实验材料第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器与设备第23-24页
     ·培养基第24-25页
     ·主要溶液第25页
   ·实验方法与步骤第25-44页
     ·菌种活化第25-26页
     ·Enterobacter sp.CGMCC 2487基因组文库的构建第26-29页
     ·木糖苷酶基因的鉴定第29页
     ·木糖苷酶在大肠杆菌(E.coli BL21(DE3)plysS)中的表达第29-34页
     ·木糖苷酶的分离纯化第34-37页
     ·木糖苷酶基因在毕赤酵母中的表达第37-40页
     ·木糖苷酶酶学性质的测定第40-43页
     ·木糖苷酶水解7-木糖-10-去乙酰紫杉醇的研究第43-44页
第三章 结果与分析第44-64页
   ·Enterobacter sp.CGMCC 2487基因组文库的构建第44-45页
   ·木糖苷酶基因的鉴定第45-52页
   ·Enterobacter sp.CGMCC 2487木糖苷酶基因在大肠杆菌(E.coli BL21(DE3)plysS)中的表达第52-57页
     ·表达载体的构建第52-53页
     ·木糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达及表达条件的优化第53-56页
     ·木糖苷酶的分离纯化第56-57页
   ·木糖苷酶在毕赤酵母中的表达第57-58页
     ·表达载体的构建第57页
     ·木糖苷酶基因在毕赤酵母中的表达第57-58页
   ·木糖苷酶的酶学性质第58-63页
     ·酶活的测定第58-60页
     ·酶的最适pH和pH稳定性第60页
     ·酶的最适温度及温度稳定性第60-61页
     ·酶动力学参数的测定和D-木糖对酶活的影响第61-62页
     ·一些试剂对酶活的影响第62-63页
   ·木糖苷酶对7-木糖-10-去乙酷紫杉醇的水解第63-64页
第四章 讨论与展望第64-66页
参考文献第66-74页
致谢第74页

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