| 摘要 | 第1-15页 |
| ABSTRACT | 第15-19页 |
| 缩写词表 | 第19-20页 |
| 第一章 研究背景 | 第20-32页 |
| ·木质纤维素资源的开发 | 第20-21页 |
| ·纤维素的结构 | 第21-23页 |
| ·纤维素降解微生物 | 第23-24页 |
| ·真菌 | 第23-24页 |
| ·细菌 | 第24页 |
| ·纤维素降解策略 | 第24-27页 |
| ·非复合体的游离纤维素酶系协同降解机制 | 第24-25页 |
| ·纤维素酶复合体的降解机制 | 第25-26页 |
| ·第三种降解机制 | 第26-27页 |
| ·纤维素氧化降解机制 | 第27页 |
| ·Cytophaga hutchinsonii研究背景 | 第27-31页 |
| ·系统发育及特性 | 第28-29页 |
| ·C.hutchinsonii的研究进展 | 第29-31页 |
| ·论文的立题和工作思路 | 第31-32页 |
| 第二章 C.hutchinsonii的oriC质粒及其稳定性 | 第32-66页 |
| ·材料和方法 | 第32-51页 |
| ·菌种及质粒 | 第32页 |
| ·培养基 | 第32-34页 |
| ·试剂与仪器 | 第34-35页 |
| ·常用的反应体系 | 第35-36页 |
| ·常用的试剂盒操作 | 第36-38页 |
| ·E.coli感受态制备及转化方法 | 第38-40页 |
| ·C.hutchinsonii培养基优化 | 第40页 |
| ·C.hutchinsonii感受态的制备 | 第40-41页 |
| ·C.hutchinsonii的电击转化及电击条件的初步优化 | 第41页 |
| ·C.hutchinsonii转化了的验证 | 第41页 |
| ·oriC质粒的构建 | 第41-47页 |
| ·质粒稳定性检测 | 第47-49页 |
| ·Southern blot流程 | 第49-51页 |
| ·实验结果及分析 | 第51-63页 |
| ·C.hutchinsonii有机培养基的优化 | 第51-52页 |
| ·C.hutchinsonii可以实现电击转化 | 第52页 |
| ·C.hutchinsonii电击转化条件的优化 | 第52-54页 |
| ·其它含oriC质粒的探索 | 第54-55页 |
| ·质粒的稳定性 | 第55-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| ·结论 | 第64-66页 |
| 第三章 oriC质粒用于外源基因表达及基因敲除 | 第66-82页 |
| ·材料和方法 | 第66-77页 |
| ·菌种及质粒 | 第66-67页 |
| ·培养基 | 第67页 |
| ·试剂与仪器 | 第67-68页 |
| ·常用的反应体系 | 第68-70页 |
| ·常用的试剂盒操作 | 第70-72页 |
| ·E.coli感受态制备(Inoue法)及转化方法 | 第72-73页 |
| ·C.hutchinsonii感受态的制备和电击转化 | 第73-74页 |
| ·胞外分泌蛋白样品制备 | 第74页 |
| ·表达质粒的构建 | 第74-75页 |
| ·外源基因表达的检测 | 第75页 |
| ·CHU_0344基因敲除用质粒的构建 | 第75-76页 |
| ·CHU_0344的基因敲除及验证 | 第76-77页 |
| ·实验结果 | 第77-79页 |
| ·外源基因的表达 | 第77-78页 |
| ·CHU_0344的基因敲除 | 第78-79页 |
| ·分析讨论 | 第79-81页 |
| ·总结 | 第81-82页 |
| 第四章 C.hutchinsonii的蛋白组学研究 | 第82-96页 |
| ·材料和方法 | 第82-87页 |
| ·菌种 | 第82-83页 |
| ·培养基 | 第83页 |
| ·实验材料及仪器 | 第83-84页 |
| ·扫描电镜 | 第84页 |
| ·电泳蛋白样品制备 | 第84-85页 |
| ·IEF | 第85页 |
| ·SDS-PAGE | 第85-86页 |
| ·染色和脱色 | 第86页 |
| ·数据分析 | 第86页 |
| ·蛋白鉴定 | 第86-87页 |
| ·实验结果 | 第87-91页 |
| ·pI 3-10的双向电泳结果 | 第87页 |
| ·pI 7-11的双向电泳结果 | 第87-88页 |
| ·pI 4-7的双向电泳结果 | 第88-90页 |
| ·滤纸纤维素上C.hutchinsonii的扫描电镜图片 | 第90-91页 |
| ·分析讨论 | 第91-94页 |
| ·结论 | 第94-96页 |
| 第五章 C.hutchinsonii一些基因的敲除及其突变株的表型 | 第96-124页 |
| ·材料和方法 | 第96-111页 |
| ·菌种及质粒 | 第96页 |
| ·培养基 | 第96-97页 |
| ·试剂与仪器 | 第97-100页 |
| ·常用的反应体系 | 第100-101页 |
| ·常用的试剂盒操作 | 第101-103页 |
| ·E.coli感受态制备(Inoue法)及转化方法 | 第103-104页 |
| ·C.hutchinsonii感受态的制备和电击转化 | 第104-105页 |
| ·构建敲除质粒pNOKtse | 第105-107页 |
| ·基因敲除 | 第107页 |
| ·胞外分泌蛋白样品制备 | 第107-108页 |
| ·总膜蛋白的制备 | 第108页 |
| ·纤维素吸附膜蛋白的制备 | 第108-109页 |
| ·液体培养突变株的纤维素降解 | 第109页 |
| ·突变株的菌体CMCase | 第109-110页 |
| ·菌体对纤维素的吸附 | 第110页 |
| ·单菌落的扩散 | 第110-111页 |
| ·结果 | 第111-121页 |
| ·基因敲除 | 第111-112页 |
| ·突变株对纤维素的利用 | 第112-115页 |
| ·metE突变株 | 第115-116页 |
| ·突变株对纤维素的吸附 | 第116-117页 |
| ·突变株CMCase | 第117页 |
| ·porSS突变株蛋白组分的变化 | 第117-120页 |
| ·突变株的单菌落扩散 | 第120-121页 |
| ·分析讨论 | 第121-123页 |
| ·小结 | 第123-124页 |
| 全文总结及展望 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第134-135页 |
| 附件 | 第135-144页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第144页 |
