| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 符号说明 | 第14-16页 |
| 第一章 甲壳动物免疫及C型凝集素 | 第16-42页 |
| 一、甲壳动物病害及免疫研究 | 第16-19页 |
| 1.研究意义 | 第16-17页 |
| 2.对虾主要病害 | 第17-18页 |
| ·弧菌 | 第17页 |
| ·白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV) | 第17-18页 |
| 3.研究概况 | 第18-19页 |
| ·对虾基因组信息 | 第18页 |
| ·新的基因功能研究方法 | 第18-19页 |
| ·研究重点 | 第19页 |
| 二、甲壳动物免疫系统 | 第19-28页 |
| 1.物理防御 | 第20页 |
| 2.免疫反应 | 第20-24页 |
| ·细胞免疫 | 第20-21页 |
| ·体液免疫 | 第21-24页 |
| 3.模式识别(pattern recognition) | 第24-28页 |
| ·哺乳动物模式识别受体 | 第24-25页 |
| ·甲壳动物模式识别受体 | 第25-28页 |
| 三、C型凝集素 | 第28-40页 |
| 1.凝集素 | 第28-30页 |
| ·半乳糖苷结合凝集素(Galectin) | 第29-30页 |
| ·纤维胶凝蛋白(Ficolin) | 第30页 |
| 2.C型凝集素 | 第30-40页 |
| ·CTLD结构特征 | 第30-32页 |
| ·哺乳动物C型凝集素 | 第32-34页 |
| ·无脊椎动物C型凝集素 | 第34-40页 |
| 四、本研究的目的和技术路线 | 第40-42页 |
| 第二章 中国明对虾一种C型凝集素(FcLec3)参与抗细菌和抗病毒免疫反应 | 第42-56页 |
| 一、前言 | 第42-43页 |
| 二、材料和方法 | 第43-49页 |
| 1 试剂、仪器、载体和菌株 | 第43页 |
| 2.实验动物及免疫刺激 | 第43-44页 |
| 3.RNA提取和cDNA合成 | 第44页 |
| 4.FcLec3 cDNA全长克隆 | 第44-45页 |
| 5.序列信息分析 | 第45页 |
| 6.FcLec3在mRNA水平上的表达模式分析 | 第45-46页 |
| 7.FcLec3重组蛋白的表达和纯化 | 第46-47页 |
| 8.多克隆抗体制备 | 第47页 |
| 9.免疫组织化学 | 第47-48页 |
| 10.微生物凝集及糖结合实验 | 第48页 |
| 11.白斑病毒VP28的重组表达和纯化 | 第48-49页 |
| 12.Pull-down实验 | 第49页 |
| 三、结果 | 第49-54页 |
| 1.FcLec3全长cDNA的克隆 | 第49-50页 |
| 2.FcLec3的表达模式 | 第50-51页 |
| 3.FcLec3蛋白分布于肝胰腺纤维细胞中 | 第51-52页 |
| 4.FcLec3重组蛋白的细菌凝集和糖结合性质 | 第52-53页 |
| 5.FcLec3可能结合白斑病毒VP28 | 第53-54页 |
| 四、讨论 | 第54-56页 |
| 第三章 中国明对虾一种C型凝集素(FcLec4)可促进对鳗弧菌的清除作用 | 第56-75页 |
| 一、前言 | 第56页 |
| 二、材料和方法 | 第56-61页 |
| 1.试剂、仪器、载体和菌株 | 第56页 |
| 2.实验动物及免疫刺激 | 第56-57页 |
| 3.RNA提取和cDNA合成 | 第57页 |
| 4.FcLec4 cDNA全长克隆 | 第57页 |
| 5.序列信息分析 | 第57页 |
| 6.表达模式分析 | 第57页 |
| 7.重组蛋白的表达、纯化和抗体制备 | 第57页 |
| 8.FcLec4蛋白水平上的表达模式分析 | 第57-58页 |
| 9 微生物凝集实验 | 第58页 |
| 10.糖结合实验 | 第58页 |
| 11.微生物结合实验 | 第58页 |
| 12.体内清除实验 | 第58-59页 |
| 13.FcLec4在日本囊对虾中同源分子的获得 | 第59页 |
| 14.FcLec4同系物的性质分析 | 第59页 |
| 15.FcLec4天然蛋白的纯化 | 第59-60页 |
| 16.FcLec4天然蛋白对细菌的结合作用 | 第60页 |
| 17.FcLec4天然蛋白在日本囊对虾体内的清除作用 | 第60-61页 |
| 18.免疫细胞化学检测FcLec4与对虾血细胞的结合作用 | 第61页 |
| 三、结果 | 第61-72页 |
| 1.FcLec4的cDNA序列克隆及分析 | 第61-63页 |
| 2.FcLec4的表达模式分析 | 第63-64页 |
| 3.FcLec4重组蛋白的凝集及糖结合活性分析 | 第64-66页 |
| 4.FcLec4重组蛋白对鳗弧菌及其他微生物的结合能力分析 | 第66页 |
| 5.FcLec4重组蛋白可加快机体对鳗弧菌的清除速度 | 第66-68页 |
| 6.FcLec4在日本囊对虾体内同源分子的鉴定及性质研究 | 第68-70页 |
| 7.FcLec4天然蛋白的功能研究 | 第70-71页 |
| 8.FcLec4天然蛋白可以结合于对虾血细胞表面 | 第71-72页 |
| 四、讨论 | 第72-75页 |
| 第四章 克氏原螯虾一种C型凝集素(PcLec2)可诱发酚氧化酶激活系统 | 第75-88页 |
| 一、前言 | 第75页 |
| 二、材料和方法 | 第75-80页 |
| 1.试剂、仪器、载体和菌株 | 第75页 |
| 2.PcLec2 cDNA序列的获得和分析 | 第75-76页 |
| 3.克氏原螯虾的免疫刺激 | 第76页 |
| 4.RNA提取及cDNA合成 | 第76页 |
| 5.PcLec2的表达模式分析 | 第76-77页 |
| 6.PcLec2重组蛋白的表达和纯化及抗体制备 | 第77页 |
| 7.PcLec2重组蛋白的凝集活性检测 | 第77-78页 |
| 8.PcLec2重组蛋白的抑菌活性检测 | 第78页 |
| 9.PcLec2重组蛋白的结合活性研究 | 第78页 |
| 10.PcLec2重组蛋白在酚氧化酶激活反应中的作用 | 第78-80页 |
| 三、结果 | 第80-86页 |
| 1.PcLec2 cDNA序列信息分析 | 第80-81页 |
| 2.PcLec2的表达模式分析 | 第81-82页 |
| 3.PcLec2不行使“效应分子”的作用 | 第82-83页 |
| 4.PcLec2的结合活性 | 第83-84页 |
| 5.PcLec2活化酚氧化酶激活系统 | 第84-86页 |
| 四、讨论 | 第86-88页 |
| 第五章 日本囊对虾C型凝集素多样性的初步研究 | 第88-99页 |
| 一、前言 | 第88页 |
| 二、材料和方法 | 第88-91页 |
| 1.转录组测序 | 第88-89页 |
| 2.序列分析 | 第89页 |
| 3.cDNA样品的制备 | 第89页 |
| 4.组织分布分析 | 第89页 |
| 5.免疫刺激后变化分析 | 第89-91页 |
| 三、结果 | 第91-96页 |
| 1.序列分析 | 第91-93页 |
| 2.表达分析 | 第93-96页 |
| 四、讨论 | 第96-99页 |
| 创新点总结 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 在读期间发表文章 | 第114-115页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第115页 |
