| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-36页 |
| ·革兰氏阴性细菌的群体感应系统 | 第13-23页 |
| ·革兰氏阴性细菌群体感应系统的信号分子 | 第14-17页 |
| ·AHL 类信号分子的合成 | 第17-18页 |
| ·几种革兰氏阴性细菌群体感应类型 | 第18-23页 |
| ·海洋费氏弧菌（Vibrio fischeri）群体感应系统 | 第18-20页 |
| ·铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）群体感应系统 | 第20-22页 |
| ·胡萝卜软腐欧文氏菌（Erwinia carotovora）群体感应系统 | 第22页 |
| ·根癌土壤杆菌（Agrobacterium tumefaciens）群体感应系统 | 第22-23页 |
| ·革兰氏阳性细菌的群体感应系统 | 第23-25页 |
| ·革兰氏阳性细菌群体感应系统的概况 | 第23-24页 |
| ·金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）群体感应系统 | 第24-25页 |
| ·细菌种间的群体感应系统 | 第25-28页 |
| ·细菌种间群体感应系统的概况 | 第25-26页 |
| ·哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）群体感应系统 | 第26-28页 |
| ·群体感应在生物防治中的作用 | 第28-29页 |
| ·AHL 降解酶的研究进展 | 第29-35页 |
| ·AHL-内酯酶 | 第29-34页 |
| ·AHL-内酯酶概述 | 第29-31页 |
| ·AHL-内酯酶结构特性 | 第31-33页 |
| ·AHL-内酯酶活性检测 | 第33-34页 |
| ·AHL-酰胺酶 | 第34-35页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第2章 苏云金芽胞杆菌 aiiA 基因的克隆和生物信息学分析 | 第36-77页 |
| ·材料和方法 | 第36-42页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·质粒和菌株 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·缓冲液 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-42页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·质粒DNA 的制备 | 第37-38页 |
| ·基因组DNA 的制备 | 第38页 |
| ·aiiA 基因的克隆 | 第38-41页 |
| ·16S rRNA 基因的克隆 | 第41-42页 |
| ·基因测序与数据处理 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-73页 |
| ·克隆aiiA 基因的Bt 菌株的种属分析 | 第42-48页 |
| ·aiiA 基因的PCR 扩增和分子克隆 | 第48-56页 |
| ·AHL-Lactonase 结构分析 | 第56-73页 |
| ·AHL-Lactonase 理化表征分析 | 第56-59页 |
| ·AHL-Lactonase 的同源性分析 | 第59-62页 |
| ·AHL-Lactonase 亲水性分析 | 第62-64页 |
| ·AHL-Lactonase 活性结构域预测 | 第64-66页 |
| ·AHL-Lactonase 空间结构分析 | 第66-70页 |
| ·AHL-Lactonase 进化树分析 | 第70-73页 |
| ·小结与讨论 | 第73-77页 |
| 第3章 含 aiiA 基因工程菌的表达及其抗病活性分析 | 第77-101页 |
| ·材料和方法 | 第77-87页 |
| ·实验材料 | 第77-78页 |
| ·菌株与质粒 | 第77页 |
| ·试剂 | 第77页 |
| ·培养基 | 第77页 |
| ·缓冲液 | 第77-78页 |
| ·仪器 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-87页 |
| ·表达载体构建 | 第78-82页 |
| ·外源基因的诱导表达及表达条件优化 | 第82-84页 |
| ·GST-AHL-Lactonase 包涵体的制备与变性及复性 | 第84-85页 |
| ·可溶性表达AHL-Lactonase-B15 的分离纯化 | 第85-86页 |
| ·AHL-Lactonase 活性的检测 | 第86页 |
| ·AHL-Lactonase 对胡萝卜软腐欧文氏杆菌抗病性测定 | 第86-87页 |
| ·结果与分析 | 第87-97页 |
| ·GST-AHL-Lactonase 包涵体的表达 | 第87-92页 |
| ·诱导时间对GST-AHL-Lactonase 表达的影响 | 第87页 |
| ·培养温度对GST-AHL-Lactonase 表达的影响 | 第87-88页 |
| ·IPTG 浓度对GST-AHL-Lactonase 表达的影响 | 第88-89页 |
| ·GST-AHL-Lactonase 变性复性 | 第89-90页 |
| ·复性后GST-AHL-Lactonase 活性检测 | 第90-91页 |
| ·复性后GST-AHL-Lactonase 的抗病性测定 | 第91-92页 |
| ·AHL-Lactonase 的可溶性表达 | 第92-97页 |
| ·IPTG 浓度对AHL-Lactonase-B15 表达的影响 | 第92-93页 |
| ·诱导表达温度和时间对AHL-Lactonase-B15 表达的影响 | 第93-95页 |
| ·镍离子亲和层析纯化结果 | 第95页 |
| ·AHL-Lactonase-B15 活性的检测 | 第95-96页 |
| ·AHL-Lactonase-B15 抗病性测定 | 第96-97页 |
| ·小结与讨论 | 第97-101页 |
| 第4章 AHL-Lactonase-B15 酶动力学研究 | 第101-113页 |
| ·材料和方法 | 第101-103页 |
| ·实验材料 | 第101页 |
| ·菌株 | 第101页 |
| ·试剂 | 第101页 |
| ·仪器 | 第101页 |
| ·实验方法 | 第101-103页 |
| ·AHL-Lactonase-B15 的分离纯化及纯度鉴定 | 第101页 |
| ·AHL-Lactonase-B15 蛋白含量的测定 | 第101页 |
| ·AHL-Lactonase-B15 活力测定方法 | 第101-102页 |
| ·温度对AHL-Lactonase-B15 活力影响测定的方法 | 第102-103页 |
| ·pH 对AHL-Lactonase-B15 活力影响测定的方法 | 第103页 |
| ·动力学参数Km 值确定的方法 | 第103页 |
| ·结果与分析 | 第103-111页 |
| ·底物含量与HPLC 峰面积的关系 | 第103-105页 |
| ·温度对AHL-Lactonase-B15 活力的影响 | 第105-107页 |
| ·pH 对AHL-Lactonase-B15 活力的影响 | 第107-109页 |
| ·AHL-Lactonase-B15 动力学参数 | 第109-111页 |
| ·小结与讨论 | 第111-113页 |
| 第5章 苏云金芽胞杆菌 LLB19 发酵培养基配方优化及发酵 培养基对 AHL 的降解作用 | 第113-126页 |
| ·材料和方法 | 第113-115页 |
| ·实验材料 | 第113页 |
| ·菌株 | 第113页 |
| ·培养基 | 第113页 |
| ·实验方法 | 第113-115页 |
| ·发酵培养条件 | 第113页 |
| ·芽胞量测定 | 第113页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第113-114页 |
| ·发酵培养基对AHL 影响分析 | 第114-115页 |
| ·结果与分析 | 第115-125页 |
| ·单因子实验 | 第115-117页 |
| ·碳源单因子 | 第115-116页 |
| ·氮源单因子 | 第116-117页 |
| ·Plackett-Burman 设计法筛选培养基中影响发酵液芽胞产量的重要因子 | 第117-118页 |
| ·爬坡路径方法确定发酵培养基重要影响因子的最适浓度范围 | 第118-119页 |
| ·响应面分析法确定发酵培养基最佳浓度配方 | 第119-123页 |
| ·模型验证 | 第123页 |
| ·发酵培养基对AHL 影响分析 | 第123-125页 |
| ·小结与讨论 | 第125-126页 |
| 第6章 总结与展望 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-141页 |
| 附录 | 第141-142页 |
| 致谢 | 第142页 |
