| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-21页 |
| 论文一 HOXD13基因p.Q317R突变和多聚丙氨酸延展突变的功能研究 | 第21-115页 |
| 第一部分:HOXD13同源盒p.Q317R点突变的功能分析 | 第21-67页 |
| 一、前言 | 第21-24页 |
| 二、实验材料 | 第24-31页 |
| 三、实验方法 | 第31-52页 |
| ·双荧光素酶报告基因系统检测HOXD13 p.Q317R突变体对EPHA7启动子转录活性的影响 | 第31-38页 |
| ·染色质免疫沉淀检测HOXD13~(Q50R)、HOXD13~(147L)与EPHA7启动子结合能力 | 第38-41页 |
| ·小鼠Hoxd13 Q50R点突变置换型基因打靶载体的构建 | 第41-52页 |
| 四、实验结果 | 第52-58页 |
| ·HOXD13 Q50R突变体对EPHA7启动子体外转录激活能力的影响 | 第52-54页 |
| ·HOXD13 Q50R突变体在体内与EphA7启动子的结合能力 | 第54-56页 |
| ·小鼠Hoxd13 Q50R置换型基因打靶载体的构建 | 第56-58页 |
| 五、讨论 | 第58-63页 |
| ·V型并指是HOXD13基因突变导致的新畸形 | 第58-59页 |
| ·HOXD13 p.Q317R突变体对EPHA7启动子的结合能力及转录活性降低可能是导致V型并指的分子机制之一 | 第59-60页 |
| ·HOXD13 p.Q317R其它可能的致病机制 | 第60-61页 |
| ·人类与小鼠肢端畸形模型的差异 | 第61-63页 |
| 六、小结 | 第63-64页 |
| 七、参考文献 | 第64-67页 |
| 第二部分:HOXD13多聚丙氨酸延展突变的功能分析 | 第67-115页 |
| 一、前言 | 第67-70页 |
| 二、实验材料 | 第70-76页 |
| 三、实验方法 | 第76-90页 |
| ·酵母双杂交检测具有不同数目多聚丙氨酸的HOXD13与SMAD1的相互作用 | 第76-83页 |
| ·哺乳动物双杂交检测野生型HOXD13及各种多聚丙氨酸延展突变体与SMAD1的相互作用 | 第83-90页 |
| 四、实验结果 | 第90-98页 |
| ·质粒构建及鉴定 | 第90页 |
| ·酵母双杂交质粒毒性及自激活效应检测 | 第90-91页 |
| ·具有不同数目多聚丙氨酸的HOXD13蛋白与SMAD1 MH2结构域的相互作用 | 第91-92页 |
| ·α-半乳糖苷酶定量检测野生型HOXD13及多聚丙氨酸延展突变体与SMAD1 MH2相互作用强度 | 第92-93页 |
| ·哺乳动物双杂交检测野生型HOXD13及多聚丙氨酸延展突变体与SMAD1的相互作用 | 第93页 |
| ·HOXD13蛋白中介导HOXD13-SMAD1相互作用的氨基酸残基范围 | 第93-94页 |
| ·哺乳动物双杂交检测去除多聚丙氨酸区域的HOXD13与SMAD1的相互作用 | 第94-95页 |
| ·野生型HOXD13及多聚丙氨酸延展突变体对SMAD介导转录激活作用的影响 | 第95-98页 |
| 五、讨论 | 第98-104页 |
| ·HOXD13 N端结构域及多聚丙氨酸链的功能 | 第98-99页 |
| ·HOXD13抑制SMAD的转录激活作用 | 第99-101页 |
| ·HOXD13多聚丙氨酸延展突变导致SPD的致病机制 | 第101-104页 |
| 六、小结 | 第104-105页 |
| 七、参考文献 | 第105-108页 |
| 八、文献综述 | 第108-115页 |
| 参考文献 | 第113-115页 |
| 论文二 X连锁无汗/少汗型外胚层发育不良中EDA基因致病突变鉴定 | 第115-152页 |
| 一、前言 | 第115-117页 |
| 二、实验材料 | 第117-123页 |
| 三、实验方法 | 第123-130页 |
| ·血液样品的采集 | 第123页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第123-124页 |
| ·EDA基因突变检测 | 第124-128页 |
| ·高危胎儿的产前诊断 | 第128-130页 |
| 四、实验结果 | 第130-139页 |
| ·EDA基因突变的鉴定 | 第130-136页 |
| ·产前诊断结果 | 第136-139页 |
| 五、讨论 | 第139-144页 |
| ·无汗/少汗型外胚层发育不良的临床表现及遗传方式 | 第139-140页 |
| ·EDA基因点突变的分析 | 第140-141页 |
| ·EDA基因的缺失突变及缺失重组机制 | 第141-142页 |
| ·未发现EDA基因致病突变XLHED家系的可能致病机制 | 第142-143页 |
| ·基因型与表型相关性 | 第143-144页 |
| 六、小结 | 第144-145页 |
| 七、参考文献 | 第145-147页 |
| 八、文献综述 | 第147-152页 |
| 参考文献 | 第150-152页 |
| 英文名词及缩写 | 第152-154页 |
| 致谢 | 第154-155页 |
| 个人简历 | 第155-157页 |
