中文摘要 | 第1-14页 |
第一部分 前篇 | 第14-48页 |
第1章 文献综述 | 第14-43页 |
1.1 遗传图谱研究 | 第14-17页 |
1.1.1 遗传图谱研究的意义 | 第15-16页 |
1.1.2 家蚕遗传图谱的早期研究状况 | 第16-17页 |
1.2 分子连锁图的研究 | 第17-25页 |
1.2.1 遗传标记技术的发展 | 第17-22页 |
1.2.2 家蚕分子连锁图的研究进展 | 第22-25页 |
1.3 分子标记技术在家蚕育种上的应用 | 第25-30页 |
1.3.1 基因定位 | 第25-26页 |
1.3.2 QTL的分离与克隆 | 第26页 |
1.3.3 DNA标记辅助选择 | 第26-29页 |
1.3.4 对杂种优势的分析与预测 | 第29-30页 |
1.4 家蚕功能基因克隆研究 | 第30-37页 |
1.4.1 基因克隆的常用方法 | 第30-35页 |
1.4.2 家蚕基因克隆研究进展 | 第35-37页 |
1.4.3 肾脏型胚胎致死的研究 | 第37页 |
1.5 低分子量热激蛋白的研究 | 第37-43页 |
1.5.1 HSPs的多样性 | 第39页 |
1.5.2 sHSPs基因的表达调控 | 第39-40页 |
1.5.3 sHSPs的分子伴侣功能 | 第40-41页 |
1.5.4 sHSPs的细胞功能及其在疾病上的作用 | 第41-43页 |
第2章 引 言 | 第43-48页 |
第二部分 家蚕分子连锁图的构建 | 第48-72页 |
第3章 家蚕分子标记的筛选 | 第48-55页 |
3.1 材料和方法 | 第49-50页 |
3.1.1 材料 | 第49页 |
3.1.2 方法 | 第49-50页 |
3.2 结果与讨论 | 第50-55页 |
3.2.1 家蚕的RAPD标记 | 第50-52页 |
3.2.2 家蚕RAPD扩增条件的优化 | 第52页 |
3.2.3 RAPD标记的分离与遗传模式 | 第52-55页 |
第4章 家蚕分子连锁图的构建 | 第55-72页 |
4.1 材料和方法 | 第56-58页 |
4.1.1 材料 | 第56-57页 |
4.1.2 方法 | 第57-58页 |
4.2 结果与分析 | 第58-65页 |
4.2.1 家蚕RAPD标记的多态性 | 第58-59页 |
4.2.2 RAPD标记的稳定性 | 第59-61页 |
4.2.3 家蚕的分子连锁图 | 第61-65页 |
4.3 讨论 | 第65-72页 |
4.3.1 分子标记的特性以及图谱的整合 | 第65-66页 |
4.3.2 作图材料与作图群体的大小 | 第66-67页 |
4.3.3 家蚕的分子连锁图 | 第67-69页 |
4.3.4 家蚕分子连锁图研究存在的问题与今后的工作 | 第69-72页 |
第三部分 肾脏型卵(Ki)的荧光差异显示及家蚕Bmhsp20.8A与Bmhsp20.8B的克隆 | 第72-92页 |
第5章 肾脏型卵(ki)的荧光差异显示 | 第72-82页 |
5.1 材料与方法 | 第73-77页 |
5.1.1 供试材料 | 第73页 |
5.1.2 总RNA的提取 | 第73页 |
5.1.3 RNA定量 | 第73页 |
5.1.4 cDNA的合成 | 第73-74页 |
5.1.5 荧光差异显示PCR | 第74页 |
5.1.6 片段的回收 | 第74-77页 |
5.1.7 目的片段的克隆与序列测定 | 第77页 |
5.2 结果与分析 | 第77-78页 |
5.2.1 PCR扩增结果 | 第77-78页 |
5.2.2 特征片段的回收与验证 | 第78页 |
5.2.3 特征片段的克隆及序列分析 | 第78页 |
5.3 讨论 | 第78-82页 |
5.3.1 FDD克隆目的基因的可行性 | 第78-80页 |
5.3.2 FDD分析过程中应注意的问题 | 第80-82页 |
第6章 家蚕Bmhsp20.8A与Bmhsp20.8B的克隆与序列分析 | 第82-92页 |
6.1 材料与方法 | 第83-85页 |
6.1.1 供试材料 | 第83页 |
6.1.2 DNA片段的回收 | 第83页 |
6.1.3 ki卵的cDNA文库的构建 | 第83-84页 |
6.1.4 Bmhsp20.8A与Bmshp20.8B的cDNA克隆 | 第84页 |
6.1.5 克隆基因组Bmhsp20.8A | 第84页 |
6.1.6 克隆、测序及数据分析 | 第84-85页 |
6.2 结果与分析 | 第85-90页 |
6.2.1 cDNA文库滴度 | 第85页 |
6.2.2 Bmhsp20.8A与Bmshp20.8B的cDNA结构 | 第85页 |
6.2.3 Bmhsp20.8A的基因组分析 | 第85-87页 |
6.2.4 基因库登录 | 第87页 |
6.2.5 Bmhsp20.8与其它shsps序列的比较 | 第87-90页 |
6.2.6 家蚕中存在的shsps同族ESTs序列 | 第90页 |
6.3 讨论 | 第90-92页 |
6.3.1 cDNA文库的重要性 | 第90页 |
6.3.2 shsps在体外的分子伴侣功能 | 第90-91页 |
6.3.3 Bmhsp20.8A与ki基因可能的关系 | 第91-92页 |
第四部分 低分子量热激蛋白基因的特异表达及系统进化分析 | 第92-134页 |
第7章 低分子量热激蛋白基因的特异表达 | 第92-121页 |
7.1 材料与方法 | 第93-97页 |
7.1.1 供试材料 | 第93页 |
7.1.2 刺激条件 | 第93页 |
7.1.3 总RNA的提取 | 第93-97页 |
7.1.4 cDNA的合成 | 第97页 |
7.1.5 定量RT-PCR分析 | 第97页 |
7.2 结果与分析 | 第97-113页 |
7.2.1 shsps的定量PCR | 第97-102页 |
7.2.2 shsps在5龄期后部丝腺中的表达 | 第102页 |
7.2.3 shsps在组织间的表达 | 第102-107页 |
7 .2.4 shsps在精巢中的应激表达 | 第107页 |
7.2.5 shsps在卵巢中的应激表达 | 第107页 |
7.2.6 shsps在后部丝腺中的应激表达 | 第107-112页 |
7.2.7 shsps在脂肪体中的应激表达 | 第112页 |
7.2.8 shsps在血液中的应激表达 | 第112页 |
7.2.9 shsps在蚕卵中的应激表达 | 第112-113页 |
7.3 讨论 | 第113-121页 |
7.3.1 定量PCR的限制因素 | 第113-116页 |
7.3.2 shsps@在正常条件下的表达 | 第116-117页 |
7.3.3 shsps的应激表达 | 第117-118页 |
7.3.4 shsp的表达调控 | 第118-121页 |
第8章 shsps的系统进化分析 | 第121-134页 |
8.1 材料与方法 | 第122-124页 |
8.1.1 用于系统分析的生物材料 | 第122-124页 |
8.1.2 DNA的序列数据 | 第124页 |
8.1.3 系统学分析 | 第124页 |
8.2 结果与分析 | 第124-130页 |
8.2.1 昆虫shsps的分子系统分析 | 第127页 |
8.2.2 shsps的分子系统分析 | 第127-130页 |
8.3 讨论 | 第130-134页 |
第五部分 后篇 | 第134-139页 |
第9章 结 论 | 第134-139页 |
9.1 分子标记的筛选 | 第134页 |
9.2 家蚕分子连锁图的构建 | 第134-135页 |
9.3 肾脏型ki卵荧光差异显示 | 第135-136页 |
9.4 克隆Bmhsp20.8A与Bmshp20.8B基因 | 第136-137页 |
9.5 shsps的表达 | 第137-138页 |
9.6 shsps的分子系统学分析 | 第138-139页 |
参考文献 | 第139-155页 |
Summary | 第155-163页 |
附 录 | 第163-183页 |
致 谢 | 第183页 |