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家蚕分子连锁图谱的构建和低分子量热激蛋白基因的克隆与特异表达

中文摘要第1-14页
第一部分 前篇第14-48页
 第1章 文献综述第14-43页
  1.1 遗传图谱研究第14-17页
   1.1.1 遗传图谱研究的意义第15-16页
   1.1.2 家蚕遗传图谱的早期研究状况第16-17页
  1.2 分子连锁图的研究第17-25页
   1.2.1 遗传标记技术的发展第17-22页
   1.2.2 家蚕分子连锁图的研究进展第22-25页
  1.3 分子标记技术在家蚕育种上的应用第25-30页
   1.3.1 基因定位第25-26页
   1.3.2 QTL的分离与克隆第26页
   1.3.3 DNA标记辅助选择第26-29页
   1.3.4 对杂种优势的分析与预测第29-30页
  1.4 家蚕功能基因克隆研究第30-37页
   1.4.1 基因克隆的常用方法第30-35页
   1.4.2 家蚕基因克隆研究进展第35-37页
   1.4.3 肾脏型胚胎致死的研究第37页
  1.5 低分子量热激蛋白的研究第37-43页
   1.5.1 HSPs的多样性第39页
   1.5.2 sHSPs基因的表达调控第39-40页
   1.5.3 sHSPs的分子伴侣功能第40-41页
   1.5.4 sHSPs的细胞功能及其在疾病上的作用第41-43页
 第2章 引  言第43-48页
第二部分 家蚕分子连锁图的构建第48-72页
 第3章 家蚕分子标记的筛选第48-55页
  3.1 材料和方法第49-50页
   3.1.1 材料第49页
   3.1.2 方法第49-50页
  3.2 结果与讨论第50-55页
   3.2.1 家蚕的RAPD标记第50-52页
   3.2.2 家蚕RAPD扩增条件的优化第52页
   3.2.3 RAPD标记的分离与遗传模式第52-55页
 第4章 家蚕分子连锁图的构建第55-72页
  4.1 材料和方法第56-58页
   4.1.1 材料第56-57页
   4.1.2 方法第57-58页
  4.2 结果与分析第58-65页
   4.2.1 家蚕RAPD标记的多态性第58-59页
   4.2.2 RAPD标记的稳定性第59-61页
   4.2.3 家蚕的分子连锁图第61-65页
  4.3 讨论第65-72页
   4.3.1 分子标记的特性以及图谱的整合第65-66页
   4.3.2 作图材料与作图群体的大小第66-67页
   4.3.3 家蚕的分子连锁图第67-69页
   4.3.4 家蚕分子连锁图研究存在的问题与今后的工作第69-72页
第三部分 肾脏型卵(Ki)的荧光差异显示及家蚕Bmhsp20.8A与Bmhsp20.8B的克隆第72-92页
 第5章 肾脏型卵(ki)的荧光差异显示第72-82页
  5.1 材料与方法第73-77页
   5.1.1 供试材料第73页
   5.1.2 总RNA的提取第73页
   5.1.3 RNA定量第73页
   5.1.4 cDNA的合成第73-74页
   5.1.5 荧光差异显示PCR第74页
   5.1.6 片段的回收第74-77页
   5.1.7 目的片段的克隆与序列测定第77页
  5.2 结果与分析第77-78页
   5.2.1 PCR扩增结果第77-78页
   5.2.2 特征片段的回收与验证第78页
   5.2.3 特征片段的克隆及序列分析第78页
  5.3 讨论第78-82页
   5.3.1 FDD克隆目的基因的可行性第78-80页
   5.3.2 FDD分析过程中应注意的问题第80-82页
 第6章 家蚕Bmhsp20.8A与Bmhsp20.8B的克隆与序列分析第82-92页
  6.1 材料与方法第83-85页
   6.1.1 供试材料第83页
   6.1.2 DNA片段的回收第83页
   6.1.3 ki卵的cDNA文库的构建第83-84页
   6.1.4 Bmhsp20.8A与Bmshp20.8B的cDNA克隆第84页
   6.1.5 克隆基因组Bmhsp20.8A第84页
   6.1.6 克隆、测序及数据分析第84-85页
  6.2 结果与分析第85-90页
   6.2.1 cDNA文库滴度第85页
   6.2.2 Bmhsp20.8A与Bmshp20.8B的cDNA结构第85页
   6.2.3 Bmhsp20.8A的基因组分析第85-87页
   6.2.4 基因库登录第87页
   6.2.5 Bmhsp20.8与其它shsps序列的比较第87-90页
   6.2.6 家蚕中存在的shsps同族ESTs序列第90页
  6.3 讨论第90-92页
   6.3.1 cDNA文库的重要性第90页
   6.3.2 shsps在体外的分子伴侣功能第90-91页
   6.3.3 Bmhsp20.8A与ki基因可能的关系第91-92页
第四部分 低分子量热激蛋白基因的特异表达及系统进化分析第92-134页
 第7章 低分子量热激蛋白基因的特异表达第92-121页
  7.1 材料与方法第93-97页
   7.1.1 供试材料第93页
   7.1.2 刺激条件第93页
   7.1.3 总RNA的提取第93-97页
   7.1.4 cDNA的合成第97页
   7.1.5 定量RT-PCR分析第97页
  7.2 结果与分析第97-113页
   7.2.1 shsps的定量PCR第97-102页
   7.2.2 shsps在5龄期后部丝腺中的表达第102页
   7.2.3 shsps在组织间的表达第102-107页
   7 .2.4 shsps在精巢中的应激表达第107页
   7.2.5 shsps在卵巢中的应激表达第107页
   7.2.6 shsps在后部丝腺中的应激表达第107-112页
   7.2.7 shsps在脂肪体中的应激表达第112页
   7.2.8 shsps在血液中的应激表达第112页
   7.2.9 shsps在蚕卵中的应激表达第112-113页
  7.3 讨论第113-121页
   7.3.1 定量PCR的限制因素第113-116页
   7.3.2 shsps@在正常条件下的表达第116-117页
   7.3.3 shsps的应激表达第117-118页
   7.3.4 shsp的表达调控第118-121页
 第8章 shsps的系统进化分析第121-134页
  8.1 材料与方法第122-124页
   8.1.1 用于系统分析的生物材料第122-124页
   8.1.2 DNA的序列数据第124页
   8.1.3 系统学分析第124页
  8.2 结果与分析第124-130页
   8.2.1 昆虫shsps的分子系统分析第127页
   8.2.2 shsps的分子系统分析第127-130页
  8.3 讨论第130-134页
第五部分 后篇第134-139页
 第9章 结  论第134-139页
  9.1 分子标记的筛选第134页
  9.2 家蚕分子连锁图的构建第134-135页
  9.3 肾脏型ki卵荧光差异显示第135-136页
  9.4 克隆Bmhsp20.8A与Bmshp20.8B基因第136-137页
  9.5 shsps的表达第137-138页
  9.6 shsps的分子系统学分析第138-139页
参考文献第139-155页
Summary第155-163页
附  录第163-183页
致  谢第183页

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