| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 英文缩写说明 | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·雷莫拉宁简介 | 第12页 |
| ·雷莫拉宁的作用机制 | 第12-13页 |
| ·雷莫拉宁相关抗生素的研究概况 | 第13-15页 |
| ·万古霉素的研究概况 | 第13-14页 |
| ·恩拉霉素的研究概况 | 第14-15页 |
| ·雷莫拉宁的生物合成途径及相关基因 | 第15-17页 |
| ·非核糖体类聚肽抗生素的生物合成机理 | 第15-16页 |
| ·雷莫拉宁的生物合成途径 | 第16-17页 |
| ·立题依据及研究内容 | 第17-20页 |
| ·立题依据 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第18-20页 |
| 第2章 orf20卤化酶基因失活突变株的构建 | 第20-37页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·菌种与质粒 | 第20页 |
| ·药品及试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·主要溶液和缓冲液 | 第22页 |
| ·抗生素及其使用浓度 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-27页 |
| ·菌种的培养和保藏 | 第22-23页 |
| ·SIPI-A.2006染色体的提取 | 第23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌质粒转化 | 第24页 |
| ·碱裂解法提取大肠杆菌质粒DNA | 第24页 |
| ·DNA片段的回收(B型小量DNA片段快速胶回收试剂盒回收) | 第24-25页 |
| ·DNA的酶切 | 第25页 |
| ·DNA片段的脱磷反应与回收 | 第25页 |
| ·质粒与外源片段的连接 | 第25-26页 |
| ·PCR反应 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌、链霉菌属间接合转移与双交换突变株的筛选 | 第27页 |
| ·HPLC的检测方法和条件 | 第27页 |
| ·LC-MS检测 | 第27页 |
| ·出发菌株及突变株的发酵 | 第27页 |
| ·实验结果与讨论 | 第27-36页 |
| ·orf20基因同框敲除质粒的构建和验证 | 第27-31页 |
| ·orf20基因阻断突变株的构建和验证 | 第31-33页 |
| ·orf20基因阻断突变株的发酵验证 | 第33-34页 |
| ·orf20敲除突变株发酵产物的LC-MS验证 | 第34-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 orf20卤化酶基因回补突变株的构建 | 第37-49页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·菌种与质粒 | 第37页 |
| ·其它实验材料 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37页 |
| ·大肠杆菌、链霉菌属间接合转移与单交换突变株的筛选 | 第37页 |
| ·其它实验方法 | 第37页 |
| ·实验结果与讨论 | 第37-48页 |
| ·orf20基因回补质粒的构建和验证 | 第37-43页 |
| ·orf20基因回补突变株的构建和验证 | 第43-44页 |
| ·orf20回补突变株的发酵 | 第44-46页 |
| ·orf20回补突变株发酵产物的LC-MS验证 | 第46-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第4章 orf8和orf23单倍倍增突变株的构建 | 第49-62页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·菌种与质粒 | 第49页 |
| ·其它实验材料 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·RT-PCR反应 | 第49-51页 |
| ·倍增突变株对产物耐受性实验 | 第51页 |
| ·其它实验方法 | 第51页 |
| ·实验结果与讨论 | 第51-61页 |
| ·orf8和orf23基因单倍倍增质粒的构建和验证 | 第51-56页 |
| ·orf8和orf23基因单倍倍增突变株的构建和验证 | 第56-59页 |
| ·orf8和orf23基因单倍倍增突变株的发酵 | 第59页 |
| ·倍增突变株与出发菌株倍增基因表达量的比较 | 第59-61页 |
| ·倍增突变株对产物耐受性实验 | 第61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 第5章 结论与展望 | 第62-63页 |
| ·结论 | 第62页 |
| ·展望 | 第62-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录一 | 第68-69页 |
| 附录二 | 第69-70页 |
| 附录三 | 第70-71页 |
| 附录四 | 第71-73页 |
| 附录五 | 第73-74页 |
| 附录六 | 第74-76页 |
| 附录七 | 第76-78页 |
| 附录八 | 第78-80页 |
| 附录九 | 第80-81页 |
| 附录十 | 第81-82页 |
| 附录十一 | 第82-84页 |
| 附录十二 | 第84页 |
