| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第1章 综述 | 第9-14页 |
| ·β-半乳糖苷酶的特征 | 第9页 |
| ·不同来源β-半乳糖苷酶的酶学性质 | 第9-10页 |
| ·细菌制备β-半乳糖苷酶 | 第9页 |
| ·酵母菌制备β-半乳糖苷酶 | 第9页 |
| ·霉菌产生的β-半乳糖苷酶 | 第9-10页 |
| ·放线菌产生的β-半乳糖苷酶 | 第10页 |
| ·β-半乳糖苷酶结构和作用机理的研究 | 第10-11页 |
| ·β-半乳糖苷酶的应用现状 | 第11-12页 |
| ·β-半乳糖苷酶在食品工业中的应用 | 第11页 |
| ·β-半乳糖苷酶在环境保护中的应用 | 第11-12页 |
| ·β-半乳糖苷酶在医药方面的应用 | 第12页 |
| ·β-半乳糖苷酶在基因学中的应用 | 第12页 |
| ·基因工程技术在β-半乳糖苷酶生产中的应用 | 第12-13页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第13页 |
| ·拟解决的主要问题 | 第13-14页 |
| 第2章 产β-半乳糖苷酶菌株的筛选、鉴定及其产酶条件的优化 | 第14-27页 |
| ·材料与仪器 | 第14-16页 |
| ·样品和菌株 | 第14页 |
| ·实验试剂 | 第14页 |
| ·培养基及其有关溶液的配置 | 第14-15页 |
| ·仪器设备 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-20页 |
| ·产β-半乳糖苷酶菌株的分离和筛选 | 第16-17页 |
| ·菌株鉴定 | 第17-19页 |
| ·菌株产β-半乳糖苷酶发酵条件的优化 | 第19-20页 |
| ·结果与分析 | 第20-25页 |
| ·产β-半乳糖苷酶菌株的分离和筛选 | 第20页 |
| ·菌株鉴定 | 第20-22页 |
| ·菌株产β-半乳糖苷酶条件的优化 | 第22-25页 |
| ·小结与讨论 | 第25-27页 |
| 第3章 菌株β-半乳糖苷酶的纯化及酶学性质研究 | 第27-42页 |
| ·材料与仪器 | 第27-28页 |
| ·实验菌株 | 第27页 |
| ·实验试剂 | 第27页 |
| ·培养基及其有关溶液的配置 | 第27-28页 |
| ·主要实验仪器 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·菌株β-半乳糖苷酶粗酶液的制备 | 第29页 |
| ·β-半乳糖苷酶活力的测定 | 第29页 |
| ·BSA标准曲线的绘制 | 第29页 |
| ·样品蛋白含量的测定 | 第29页 |
| ·β-半乳糖苷酶的分离纯化 | 第29-30页 |
| ·β-半乳糖苷酶的酶学性质 | 第30-32页 |
| ·实验结果 | 第32-40页 |
| ·β-半乳糖苷酶的分离和纯化 | 第32-33页 |
| ·β-半乳糖苷酶的底物特异性 | 第33-34页 |
| ·β-半乳糖苷酶的最适反应pH | 第34-35页 |
| ·β-半乳糖苷酶的pH稳定性 | 第35页 |
| ·β半乳糖苷酶的最适作用温度 | 第35-36页 |
| ·β-半乳糖苷酶的热稳定性 | 第36页 |
| ·金属离子和化学物质对酶活的影响 | 第36-37页 |
| ·NaCl浓度对β-半乳糖苷酶酶活的影响 | 第37页 |
| ·β-半乳糖苷酶的NaCl耐受性 | 第37-38页 |
| ·β-半乳糖苷酶的动力学参数 | 第38页 |
| ·N-端测序结果 | 第38-39页 |
| ·β-半乳糖苷酶酶解所得产物的分析 | 第39-40页 |
| ·小结与讨论 | 第40-42页 |
| 第4章 β-半乳糖苷酶基因的克隆与表达 | 第42-58页 |
| ·材料和方法 | 第42-43页 |
| ·实验菌株 | 第42页 |
| ·工具酶和试剂 | 第42页 |
| ·培养基和相关溶液配置 | 第42页 |
| ·所用引物序列 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因的扩增 | 第44-46页 |
| ·原核重组表达质粒的构建 | 第46-47页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因的大肠杆菌中的诱导表达 | 第47页 |
| ·大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞的制备 | 第47-48页 |
| ·抽提质粒 | 第48页 |
| ·实验结果 | 第48-57页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因的扩增 | 第48-51页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因序列分析 | 第51-54页 |
| ·原核重组表达质粒的构建 | 第54-56页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达 | 第56-57页 |
| ·小结与讨论 | 第57-58页 |
| 第5章 总结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64页 |