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利用基因组改组技术对灰黄霉素产生菌—荨麻青霉进行改良的研究

摘要第1-3页
ABSTRACT第3-4页
中文文摘第4-9页
第1章 绪论第9-19页
   ·微生物遗传育种技术的发展及历史地位第9-10页
   ·基因组改组技术在菌种选育中的应用第10-18页
     ·基因组改组技术的产生和原理第10-11页
     ·基因组改组技术的方法和特点第11-13页
       ·Genome shuffling技术的具体方法第11页
       ·Genome shuffling的特点第11-12页
       ·Genome shuffling育种优势的验证第12-13页
     ·基因组改组技术的应用第13-17页
       ·用于改进微生物代谢产物产量第14页
       ·用于改进微生物多基因调控表型的进化和对环境的适应性第14-15页
       ·用于提高微生物菌株的遗传多样性第15-16页
       ·与其他生物技术相结合大幅改进微生物性状第16页
       ·基因组改组技术应用面临的难点第16-17页
     ·基因组改组技术的展望第17-18页
       ·基因组改组技术与基因工程技术手段相结合的展望第17页
       ·基因组改组技术应用于代谢工程的展望第17-18页
   ·本课题的研究内容及目的意义第18-19页
第2章 荨麻青霉原生质体的制备与再生第19-35页
   ·材料和方法第19-21页
     ·菌株第19页
     ·培养基第19页
     ·工具酶及酶液配制第19-20页
     ·其它试剂第20页
     ·仪器及设备第20页
     ·原生质体的制备和分离第20页
     ·原生质体的再生第20-21页
   ·原生质体制备与再生条件的探索第21-29页
     ·酶系和酶浓度的选择第21-25页
       ·单一酶液对原生质体形成的影响第21-23页
       ·混合酶浓度对原生质体形成率和再生率的影响第23-25页
     ·菌龄对原生质体形成率的影响第25页
     ·酶解时间对原生质体形成率的影响第25-26页
     ·酶解温度对原生质体形成率和再生率的影响第26页
     ·渗透压稳定剂对原生质体形成率和再生率的影响第26-27页
     ·不同再生培养基对原生质体再生的影响第27-28页
     ·预处理剂DTT对原生质体形成率和再生率的影响第28-29页
   ·荨麻青霉原生质体的形态观察第29-31页
   ·荨麻青霉原生质体再生的观察第31页
   ·讨论第31-35页
第3章 荨麻青霉的基因组改组第35-63页
   ·荨麻青霉原始菌株的诱变第35-40页
     ·材料与方法第35-38页
       ·菌株第35页
       ·培养基第35页
       ·药品与试剂第35页
       ·诱变用具及型号或使用要求第35-36页
       ·出发菌株的培养第36页
       ·制备菌悬液第36页
       ·紫外线处理第36页
       ·NTG处理第36-37页
       ·离心洗涤第37页
       ·稀释涂皿第37-38页
       ·培养第38页
       ·筛选第38页
     ·结果第38-39页
     ·讨论第39-40页
   ·荨麻青霉多亲本的融合第40-46页
     ·材料及方法第40-43页
       ·实验菌株第40-41页
       ·培养基第41页
       ·仪器第41页
       ·多亲本融合的菌株的确定第41页
       ·荨麻青霉第一轮多亲本融合第41-43页
         ·原生质体的制备第41-42页
         ·原生质体融合第42页
         ·原生质体再生第42-43页
       ·荨麻青霉第二轮多亲本融合第43页
     ·结果第43-44页
       ·用于融合的出发菌株的抑菌结果第43页
       ·多亲本融合结果第43-44页
     ·小结与讨论第44-46页
   ·荨麻青霉多亲本融合后代的筛选第46-55页
     ·材料和方法第46-48页
       ·菌株第46页
       ·实验药品第46页
       ·筛选方法第46页
       ·灰黄霉素标准曲线的绘制第46-48页
       ·发酵液效价的测定方法第48页
     ·筛选结果第48-53页
       ·融合菌株的形态特征第48-51页
       ·基因组改组后菌株的发酵情况比较第51-53页
     ·小结与讨论第53-55页
   ·多亲本融合菌株的RAPD鉴定第55-63页
     ·材料与方法第56-58页
       ·菌株第56页
       ·仪器与试剂第56页
       ·基因组DNA提取第56-57页
       ·RAPD扩增试验第57-58页
       ·数据统计与分析第58页
     ·结果第58-61页
       ·RAPD多态性分析第58-60页
       ·荨麻青霉7个菌株RAPD聚类分析第60-61页
         ·RAPD聚类分析第60页
         ·各个菌株间亲缘关系聚类图第60-61页
     ·小结和讨论第61-63页
第4章 结论和讨论第63-65页
   ·结论第63-64页
   ·讨论第64-65页
参考文献第65-71页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第71-73页
致谢第73-75页

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