摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
引言 | 第11-23页 |
1 转录因子的概念,结构和类型 | 第11-17页 |
·WRKY转录因子的概念 | 第12页 |
·WRKY转录因子的结构与功能 | 第12-16页 |
·WRKY基因的表达 | 第16-17页 |
2 转录因子的调控功能 | 第17-22页 |
·WRKY基因调控植物抗病反应 | 第17-19页 |
·WRKY基因调控植物非生物逆境反应 | 第19-20页 |
·WRKY基因调控植物生长发育 | 第20-22页 |
3 研究目的和意义 | 第22-23页 |
第一章 辣椒四个推定WRKY基因的分离 | 第23-43页 |
1 材料与方法 | 第23-26页 |
·实验材料 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-26页 |
2 结果与分析 | 第26-41页 |
·设计、合成的引物 | 第26页 |
·四个基因cDNA文库筛选及阳性克隆的获得 | 第26-28页 |
·阳性克隆的测序与分析 | 第28-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
第二章 辣椒推定 WRKY基因的亚细胞定位 | 第43-53页 |
1 材料与方法 | 第43-49页 |
·实验材料 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-49页 |
2 结果与分析 | 第49-52页 |
·亚细胞定位预测 | 第49页 |
·载体构建 | 第49-51页 |
·显微观察细胞定位 | 第51-52页 |
3. 讨论 | 第52-53页 |
·进行亚细胞定位所采用报告基因 | 第52页 |
·WRKY蛋白在细胞核的定位 | 第52-53页 |
第三章 各个 WRKY推定基因与 W盒结合特性分析 | 第53-58页 |
1 材料和方法 | 第53-55页 |
·实验材料 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-55页 |
2 结果与分析 | 第55-56页 |
·报告载体的构建 | 第55页 |
·效应载体的构建 | 第55页 |
·瞬间表达结果 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
第四章 实时定量 PCR分析各个WRKY基因的表达模式 | 第58-72页 |
1 材料与方法 | 第58-62页 |
·实验材料 | 第58页 |
·实验方法 | 第58-62页 |
2 结果与分析 | 第62-69页 |
·actin基因与各候选基因荧光定量 PCR条件优化 | 第62页 |
·标准曲线的建立 | 第62页 |
·各候选基因相对表达量分析 | 第62-69页 |
3 讨论 | 第69-72页 |
第五章 超表达载体的构建、遗传转化及转基因植株分析 | 第72-91页 |
1 材料与方法 | 第72-79页 |
·实验材料 | 第72页 |
·实验方法 | 第72-79页 |
2 结果与分析 | 第79-88页 |
·载体构建 | 第79-83页 |
·烟草转基因苗的获得及抗性检测 | 第83-88页 |
3 讨论 | 第88-91页 |
·烟草转化 | 第88页 |
·不同的WRKY基因对不同的非生物胁迫有应答 | 第88-91页 |
小结 | 第91-92页 |
附录1 缩略词及英汉对照 | 第92-93页 |
附录2 主要实验仪器和试剂盒 | 第93-94页 |
附录3 所用试剂与缓冲液的配制 | 第94-96页 |
附录4 培养基的配方 | 第96-98页 |
附录5 本文中涉及的质粒 | 第98-99页 |
附录6 烟草遗传转化过程 | 第99-100页 |
附录7 各个辣椒WRKY基因在同种处理下的比较分析 | 第100-103页 |
附录8 本研究中所用的DNA Marker | 第103-105页 |
参考文献 | 第105-115页 |
致谢 | 第115页 |