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表达猪流感H1N1 HA基因和NA基因的重组伪狂犬毒株的构建

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
缩略语表第10-11页
1 文献综述第11-26页
   ·前言第11-12页
   ·流感病毒的复制第12-13页
   ·流感病毒HA基因及其作用第13-14页
   ·流感病毒NA基因及其作用第14页
   ·IRES的作用第14-16页
   ·猪流感病毒疫苗的研究进展第16-23页
     ·全病毒灭活疫苗第16-18页
     ·亚单位疫苗第18-20页
     ·病毒活载体疫苗第20-21页
     ·DNA疫苗第21-23页
   ·伪狂犬病毒作为载体疫苗的研究第23-26页
2 目的与意义第26页
3 材料与方法第26-36页
   ·材料第26-29页
     ·毒株、菌株、细胞和质粒第26页
     ·工具酶及主要试剂第26页
     ·培养基第26-27页
     ·质粒提取缓冲液第27页
     ·病毒基因组提取缓冲液第27页
     ·ELISA缓冲液第27-28页
     ·PCR引物第28-29页
   ·方法第29-36页
     ·重组质粒pIE-EGFP/DsRed和pIE-EGFP/IRES/DsRed的构建第29-30页
     ·重组质粒pIE-HA/IRES/NA的构建第30-31页
     ·伪狂犬病毒基因组的提取第31-32页
     ·脂质体介导的转染第32页
     ·重组病毒的空斑纯化第32-33页
     ·空斑的PCR筛选第33页
     ·间接免疫荧光检测第33-34页
     ·Western blot鉴定第34页
     ·病毒TCID_(50)值的测定第34-35页
     ·小鼠安全性试验第35页
     ·小鼠免疫性试验第35-36页
4 结果与分析第36-47页
   ·重组质粒pIE-EGFP/DsRed和pIE-EGFP/IRES/DsRed的构建第36-38页
   ·重组质粒pIE-EGFP/DsRed和pIE-EGFP/IRES/DsRed的转染第38-39页
   ·重组质粒pIE-HA/IRES/NA的构建第39页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的空斑纯化和PCR筛选第39-41页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的间接免疫荧光检测第41-42页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的western blot鉴定第42-43页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的遗传稳定性第43页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的增殖特性第43页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+对小鼠的安全性第43-44页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+对小鼠的免疫性试验第44-47页
5 讨论第47-51页
   ·双荧光表达载体的构建分析第47-48页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的Western blot检测分析第48页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的构建分析第48-49页
   ·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的免疫特性分析第49-51页
6 结论第51-52页
7 参考文献第52-60页
致谢第60页

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