摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-26页 |
·前言 | 第11-12页 |
·流感病毒的复制 | 第12-13页 |
·流感病毒HA基因及其作用 | 第13-14页 |
·流感病毒NA基因及其作用 | 第14页 |
·IRES的作用 | 第14-16页 |
·猪流感病毒疫苗的研究进展 | 第16-23页 |
·全病毒灭活疫苗 | 第16-18页 |
·亚单位疫苗 | 第18-20页 |
·病毒活载体疫苗 | 第20-21页 |
·DNA疫苗 | 第21-23页 |
·伪狂犬病毒作为载体疫苗的研究 | 第23-26页 |
2 目的与意义 | 第26页 |
3 材料与方法 | 第26-36页 |
·材料 | 第26-29页 |
·毒株、菌株、细胞和质粒 | 第26页 |
·工具酶及主要试剂 | 第26页 |
·培养基 | 第26-27页 |
·质粒提取缓冲液 | 第27页 |
·病毒基因组提取缓冲液 | 第27页 |
·ELISA缓冲液 | 第27-28页 |
·PCR引物 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-36页 |
·重组质粒pIE-EGFP/DsRed和pIE-EGFP/IRES/DsRed的构建 | 第29-30页 |
·重组质粒pIE-HA/IRES/NA的构建 | 第30-31页 |
·伪狂犬病毒基因组的提取 | 第31-32页 |
·脂质体介导的转染 | 第32页 |
·重组病毒的空斑纯化 | 第32-33页 |
·空斑的PCR筛选 | 第33页 |
·间接免疫荧光检测 | 第33-34页 |
·Western blot鉴定 | 第34页 |
·病毒TCID_(50)值的测定 | 第34-35页 |
·小鼠安全性试验 | 第35页 |
·小鼠免疫性试验 | 第35-36页 |
4 结果与分析 | 第36-47页 |
·重组质粒pIE-EGFP/DsRed和pIE-EGFP/IRES/DsRed的构建 | 第36-38页 |
·重组质粒pIE-EGFP/DsRed和pIE-EGFP/IRES/DsRed的转染 | 第38-39页 |
·重组质粒pIE-HA/IRES/NA的构建 | 第39页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的空斑纯化和PCR筛选 | 第39-41页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的间接免疫荧光检测 | 第41-42页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的western blot鉴定 | 第42-43页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的遗传稳定性 | 第43页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的增殖特性 | 第43页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+对小鼠的安全性 | 第43-44页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+对小鼠的免疫性试验 | 第44-47页 |
5 讨论 | 第47-51页 |
·双荧光表达载体的构建分析 | 第47-48页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的Western blot检测分析 | 第48页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的构建分析 | 第48-49页 |
·重组病毒TK~-/gE~-/HA~+/IRES~+/NA~+的免疫特性分析 | 第49-51页 |
6 结论 | 第51-52页 |
7 参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60页 |