| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-40页 |
| ·人工合成寡核苷酸的应用 | 第14页 |
| ·引物与PCR技术 | 第14-15页 |
| ·荧光PCR技术简介 | 第15-22页 |
| ·荧光PCR技术的原理 | 第15-16页 |
| ·实时荧光PCR技术的分类 | 第16-17页 |
| ·实时荧光PCR技术的优点与不足 | 第17-18页 |
| ·实时荧光PCR技术的应用 | 第18-19页 |
| ·Taqman探针技术 | 第19-22页 |
| ·DNA合成方法 | 第22-24页 |
| ·DNA的纯化 | 第24-30页 |
| ·固相萃取技术简介 | 第25页 |
| ·脱盐 | 第25-26页 |
| ·OPC纯化 | 第26-27页 |
| ·HPLC纯化 | 第27-29页 |
| ·PAGE纯化 | 第29-30页 |
| ·DNA的分析 | 第30-32页 |
| ·PAGE法 | 第30-31页 |
| ·色谱法 | 第31页 |
| ·毛细管凝胶电泳法(CGE) | 第31-32页 |
| ·质谱法 | 第32页 |
| ·紫外吸收定量法 | 第32页 |
| ·TAQMAN探针合成技术的进展 | 第32-34页 |
| ·TAQMAN探针的纯化 | 第34-36页 |
| ·色潜纯化 | 第34-35页 |
| ·去DMT保护基团 | 第35页 |
| ·脱盐 | 第35-36页 |
| ·TAQMAN探针的分析方法 | 第36页 |
| ·黄瓜绿斑驳花叶病毒介绍 | 第36-39页 |
| ·病毒分布与寄主 | 第36页 |
| ·病毒粒体特性 | 第36-37页 |
| ·基因结构 | 第37页 |
| ·理化性质 | 第37页 |
| ·传播方式 | 第37页 |
| ·病理学 | 第37-38页 |
| ·危害情况 | 第38页 |
| ·国内的研究进展 | 第38-39页 |
| ·本课题的主要研究内容及意义 | 第39-40页 |
| 第二章 DHA的合成与制备研究 | 第40-52页 |
| ·材料和仪器 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·仪器 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-45页 |
| ·DNA的合成 | 第41页 |
| ·DNA的定量 | 第41页 |
| ·DNA的纯化 | 第41-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-51页 |
| ·OPC法比较三种吸附剂纯化性能 | 第45-47页 |
| ·电泳纯化 | 第47-48页 |
| ·色谱纯化 | 第48-50页 |
| ·比较OPC、电泳、色谱纯化效果 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第三章 两种TAQMAH探针的合成 | 第52-60页 |
| ·材料和仪器 | 第52-53页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·仪器 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-54页 |
| ·探针的合成 | 第53页 |
| ·探针的纯化与分析 | 第53-54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-59页 |
| ·FAM/TAMRA探针的纯化及分析色谱图 | 第54-57页 |
| ·FAM/BHQ_2探针的纯化及分析色谱图 | 第57-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 第四章 南瓜果实中CGMMV的RT-PCR检测及CP基因序列分析 | 第60-68页 |
| ·材料和仪器 | 第60-61页 |
| ·试剂 | 第60页 |
| ·材料 | 第60-61页 |
| ·仪器 | 第61页 |
| ·培养基、溶液配制 | 第61页 |
| ·实验方法 | 第61-64页 |
| ·样品总RNA的提取 | 第62页 |
| ·引物设计 | 第62页 |
| ·反转录和PCR程序 | 第62-63页 |
| ·电泳 | 第63页 |
| ·PCR产物的纯化及载体的连接 | 第63页 |
| ·细菌转化和克隆的挑选 | 第63-64页 |
| ·质粒的提取及PCR检测 | 第64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-67页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第64-65页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第65页 |
| ·序列分析 | 第65-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第五章 两种TAQMAH探针用于RTF-PCR检测南瓜果实中CGMMV及性能比较 | 第68-73页 |
| ·材料和仪器 | 第68-69页 |
| ·材料 | 第68页 |
| ·主要仪器 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-70页 |
| ·引物、探针设计 | 第69页 |
| ·模板的制备 | 第69页 |
| ·荧光PCR体系 | 第69-70页 |
| ·结果与讨论 | 第70-72页 |
| ·不同探针的荧光PCR对照图 | 第70页 |
| ·灵敏度测试 | 第70-72页 |
| ·本章小结 | 第72-73页 |
| 第六章 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第82-83页 |
| 北京化工大学硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第83-84页 |