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产壳聚糖酶菌株的选育及产酶发酵工艺研究

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
1 前言第9-19页
   ·壳聚糖概述第9-10页
   ·壳聚糖的应用第10-11页
     ·在医药卫生方面的应用第10页
     ·在食品工业上的应用第10-11页
     ·在饲料工业上的应用第11页
     ·在化学工业上的应用第11页
   ·壳寡糖的制备第11-14页
     ·酸水解法第12页
     ·氧化法第12页
     ·酶解法第12-14页
   ·壳聚糖酶研究进展第14-17页
     ·产壳聚糖酶微生物的来源第14-16页
     ·壳聚糖酶的理化性质第16页
     ·壳聚糖酶的特征及分类第16-17页
   ·本课题研究的目的和意义第17-19页
2 材料与方法第19-34页
   ·实验材料第19-22页
     ·实验菌株第19页
     ·壳聚糖第19页
     ·培养基第19-20页
     ·试剂第20-22页
     ·主要仪器设备第22页
   ·实验方法第22-34页
     ·壳聚糖重要物理性质的测定第22-23页
     ·菌种的筛选第23-25页
     ·菌株的鉴定第25-27页
     ·菌株的诱变第27-28页
     ·菌株生长及产酶特性研究第28页
     ·产壳聚糖酶发酵工艺研究第28-30页
     ·壳聚糖的酶解产物的初步分析第30-31页
     ·壳聚糖酶的分离与纯化第31-33页
     ·壳聚糖酶的酶学性质研究第33-34页
3 结果与分析第34-55页
   ·壳聚糖重要物理性质的测定第34-35页
     ·表观粘度的测定第34页
     ·粘均分子量的测定第34-35页
   ·菌种筛选第35-38页
     ·初筛结果第35页
     ·复筛测定酶活力结果第35-36页
     ·氨基葡萄糖标准曲线第36-37页
     ·乌氏粘度计测定壳聚糖胶体溶液酶解前后粘度变化第37页
     ·薄层层析(TLC)分析第37-38页
   ·菌株鉴定结果第38-41页
     ·形态特征鉴定第38页
     ·生理生化特征鉴定第38页
     ·16S rDNA序列分析第38-41页
   ·菌株的诱变第41-43页
     ·紫外(UV)诱变第41-42页
     ·~(60)Co-γ射线诱变第42页
     ·突变菌株的遗传稳定性检测第42-43页
   ·菌株生长及产酶特性研究结果第43-44页
     ·生长曲线第43页
     ·产壳聚糖酶的分泌性第43页
     ·产壳聚糖酶的诱导性第43-44页
   ·产壳聚糖酶发酵工艺研究第44-48页
     ·不同壳聚糖对产酶的影响第44页
     ·接种量对产酶的影响第44页
     ·培养温度对产酶的影响第44页
     ·摇瓶装液量对产酶的影响第44-46页
     ·壳聚糖浓度对产酶的影响第46页
     ·培养基起始pH值对产酶的影响第46-47页
     ·四因素三水平正交实验第47页
     ·10L发酵罐发酵产酶研究第47-48页
   ·壳聚糖的酶解产物初步分析第48-50页
     ·TLC分析第48-49页
     ·酶解产物数均分子量的测定第49-50页
   ·壳聚糖酶的分离与纯化第50-52页
     ·(NH_4)_2SO_4分级盐析第50-51页
     ·Sephadex G-200柱层析初步纯化壳聚糖酶第51-52页
     ·SDS-PAGE凝胶电泳第52页
   ·壳聚糖酶的酶学性质研究第52-55页
     ·壳聚糖酶的最适作用pH值第52-53页
     ·壳聚糖酶的最适作用温度第53页
     ·壳聚糖酶的酸碱稳定性第53页
     ·壳聚糖酶的温度稳定性第53-55页
4 小结与讨论第55-59页
   ·壳聚糖酶产生菌的筛选第55页
   ·壳聚糖酶产生菌的鉴定第55-56页
   ·壳聚糖酶产生菌的诱变第56-57页
   ·Mitsuaria sp.141-2的产酶发酵工艺研究第57页
   ·壳聚糖的酶解产物的初步分析第57-58页
   ·壳聚糖酶的分离纯化及酶学性质研究第58-59页
参考文献第59-64页
致谢第64页

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