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酵母双杂交技术筛选AtBAG5的下游蛋白

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第6-8页
引言第8-16页
 1 程序性细胞死亡(PROGRAMMED CELL DEATH,PCD)概论第8-11页
   ·两种细胞死亡的方式第8-9页
   ·动物细胞凋亡的形态学特点第9页
   ·细胞凋亡的分子途径及细胞凋亡的调控第9-10页
   ·线粒体通路第10页
   ·bcl-2蛋白家族在动物细胞凋亡的调节第10-11页
   ·BAG蛋白在凋亡中的作用第11页
 2.植物细胞凋亡的研究动态第11-16页
   ·植物细胞凋亡概念的提出第11-12页
   ·植物细胞程序性死亡的形态学特征第12页
   ·植物细胞程序性死亡的生理生化特征第12页
   ·植物细胞凋亡的生物学意义第12-13页
   ·植物细胞中可能存在动物细胞中类似的PCD机制第13-14页
   ·拟南芥中存在BAG蛋白第14-16页
第二章 酵母双杂交筛选ATBAG5的下游蛋白第16-32页
 1.前言第16-17页
   ·AtBAG5简介第16页
   ·酵母双杂交原理及其应用第16-17页
 2.实验材料和方法第17-25页
   ·质粒和菌株第17页
   ·引物及试剂盒第17-18页
   ·试剂第18页
   ·限制性内切酶以及其他工具酶第18页
   ·培养基第18-19页
   ·细菌的培养及菌种保存第19页
   ·质粒DNA的小量提取第19-20页
   ·文库的提取第20页
   ·PCR扩增第20-21页
   ·PCR产物的纯化回收第21页
   ·限制酶切第21页
   ·DNA片段的连接第21页
   ·大肠杆菌感受态的制备第21-22页
   ·转化第22页
   ·插入片段的检测第22页
   ·测序第22页
   ·酵母的快速转化策略第22-23页
   ·酵母自激活的检验第23页
   ·酵母的高效转化策略第23-24页
   ·酵母双杂交实验第24页
   ·质粒抢救第24-25页
   ·回转验证和半乳糖苷酶活性的鉴定第25页
 3.实验结果第25-31页
   ·重组质粒pGBD—51780的构建第25-28页
   ·酵母双杂交结果第28-31页
 4 讨论第31-32页
第二章 利用原核系统表达纯化ATBAG蛋白第32-39页
 1 材料和方法第33-37页
   ·材料第33页
   ·缓冲液第33页
   ·原核表达载体的构建第33-34页
   ·重组蛋白的表达第34页
   ·重组蛋白的纯化第34-35页
   ·纯化蛋白的检验第35-37页
 2 实验结果第37-39页
参考文献第39-43页
致谢第43页

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