| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 前言 | 第9-18页 |
| 1 鱼类细菌性疾病概况 | 第9-10页 |
| 2 哈维氏弧菌及其致病性 | 第10-12页 |
| ·哈维氏弧菌流行病学 | 第10-11页 |
| ·哈维氏弧菌致病机理研究 | 第11页 |
| ·哈维氏弧菌外膜蛋白 | 第11-12页 |
| 3 鱼类的免疫系统简介 | 第12-13页 |
| ·非特异性体液因子 | 第12页 |
| ·特异性体液反应 | 第12-13页 |
| 4 疫苗的发展简介 | 第13页 |
| 5 DNA 疫苗 | 第13-17页 |
| ·DNA 疫苗种类 | 第13-14页 |
| ·DNA 疫苗可能的免疫机制 | 第14页 |
| ·DNA 疫苗免疫的方法 | 第14-17页 |
| 6 本论文研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-36页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·质粒 | 第18-20页 |
| ·实验动物 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·仪器 | 第22页 |
| ·哈维弧菌外膜蛋白基因ompU 的原核表达体系的构建 | 第22-30页 |
| ·外膜蛋白基因ompU 真核重组表达体系的构建 | 第30-34页 |
| ·由原核表达系统构建的亚单位疫苗和由真核表达体系构建的DNA 疫苗对大菱鲆免疫效果的研究 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-46页 |
| ·外膜蛋白 OmpU 在大肠杆菌中的表达 | 第36-41页 |
| ·外膜蛋白OmpU 克隆及序列分析 | 第36-39页 |
| ·原核表达质粒的构建及鉴定 | 第39-40页 |
| ·外膜蛋白OmpU 在大肠杆菌中的表达 | 第40页 |
| ·表达条件的优化 | 第40-41页 |
| ·重组外膜蛋白OmpU 的纯化 | 第41-42页 |
| ·pEGFP-N1/ompU 真核表达质粒在大菱鲆体内的表达 | 第42-43页 |
| ·RT-PCR 检测ompU 基因在大菱鲆肌肉组织中的表达 | 第42-43页 |
| ·Western-blot 检测外膜蛋白OmpU 基因在大菱鲆体内的表达 | 第43页 |
| ·重组外膜蛋白OmpU 和真核表达质粒pEGFP-N1/ ompU 对大菱鲆的免疫效果研究 | 第43-46页 |
| ·提取的蛋白和重组质粒的纯度检测 | 第43页 |
| ·免疫大菱鲆血清效价水平的检测 | 第43-44页 |
| ·真核表达质粒pEGFP-N1/ ompU 对大菱鲆的免疫保护效果 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论和分析 | 第46-56页 |
| ·哈维氏弧菌外膜蛋白 OmpU 原核表达载体的构建 | 第48-51页 |
| ·相似性研究 | 第48页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第48-49页 |
| ·外膜蛋白诱导条件的选择和优化 | 第49-50页 |
| ·蛋白纯化 | 第50-51页 |
| ·真核表达系统pEGFP-N1 | 第51-52页 |
| ·检测真核重组表达质粒pEGFP-N1/ompU 在大菱鲆体内的表达 | 第51-52页 |
| ·真核重组表达质粒pEGFP-N1 | 第52-56页 |
| ·真核表达质粒pEGFP-N1/ompU 的浓度和纯度检测 | 第52-53页 |
| ·免疫接种的途径和剂量 | 第53-54页 |
| ·ELISA方法检测免疫大菱鲆血清中特异性抗体的效价 | 第54页 |
| ·真核重组表达质粒pEGFP-N1/ompU 对大菱鲆的免疫保护效果 | 第54-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
