蒙古绵羊Ghrelin cDNA的克隆和原核表达
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 引言 | 第7-16页 |
| ·Ghrelin 的发现 | 第7页 |
| ·Ghrelin 的结构 | 第7-8页 |
| ·Ghrelin 的分布 | 第8页 |
| ·Ghrelin 的受体 | 第8-9页 |
| ·Ghrelin 分泌的调节 | 第9页 |
| ·Ghrelin 的作用 | 第9-15页 |
| ·促进GH 的分泌、调节生长 | 第10页 |
| ·增强食欲和调节体重的作用 | 第10-11页 |
| ·调节胃肠道的功能 | 第11-12页 |
| ·对心血管系统的作用 | 第12页 |
| ·调节糖代谢 | 第12-13页 |
| ·参与肿瘤 | 第13页 |
| ·对免疫及应激的影响 | 第13-14页 |
| ·对生殖的影响 | 第14页 |
| ·其他作用 | 第14-15页 |
| ·Ghrelin 的应用前景 | 第15页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| ·本论文的实验设计 | 第16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-22页 |
| ·实验材料 | 第16-17页 |
| ·实验动物及其组织 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16-17页 |
| ·试验药品和试剂 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-22页 |
| ·引物的设计及合成 | 第17页 |
| ·真胃组织总RNA 的提取及检测 | 第17-18页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第18-19页 |
| ·目的片段的回收和纯化 | 第19页 |
| ·重组克隆质粒的构建 | 第19-21页 |
| ·原核表达质粒的构建 | 第21页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌BL21 中的表达 | 第21-22页 |
| 3 结果与分析 | 第22-28页 |
| ·蒙古绵羊真胃总RNA 的提取结果 | 第22-23页 |
| ·cDNA 片段的RT-PCR 扩增结果 | 第23页 |
| ·重组克隆质粒的鉴定 | 第23-25页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·目的蛋白的表达及检测 | 第26-28页 |
| ·重组表达蛋白最佳诱导浓度的确定 | 第26页 |
| ·重组表达蛋白最佳诱导时间的确定 | 第26-27页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第27页 |
| ·目的蛋白的Western-blot 鉴定 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28页 |
| 5 结论 | 第28-29页 |
| 致谢 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-40页 |
| 作者简介 | 第40页 |