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绵羊肺腺瘤病毒的分子生物学技术检测

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
1 引言第10-20页
   ·绵羊肺腺瘤病(OPA)概述第10-17页
     ·绵羊肺腺瘤病的发现第10页
     ·绵羊肺腺瘤病的病原学和流行病学第10-12页
     ·绵羊肺腺瘤病的临床症状和病理变化第12页
     ·绵羊肺腺瘤病的发病机理第12-13页
     ·外源性绵羊肺腺瘤病毒的研究进展第13-15页
     ·enJSRV 和exJSRV 的关系第15-17页
     ·绵羊肺腺瘤病的诊断和防治第17页
   ·分子生物学方法诊断绵羊肺腺瘤病毒第17-19页
     ·巢式 RT-PCR 检测方法第17-18页
     ·半巢式 RT-PCR 检测方法第18-19页
     ·斑点杂交检测方法第19页
   ·本研究的目的及意义第19-20页
2 试验一 巢式 RT-PCR 技术检测绵羊肺腺瘤病毒第20-29页
   ·材料第20-22页
     ·材料来源第20页
     ·主要仪器和设备第20-21页
     ·主要试剂第21页
     ·引物的设计与合成第21-22页
   ·方法第22-24页
     ·总 RNA 的提取第22页
     ·env 基因和LTR 的U3 区的巢式 RT-PCR 扩增第22-23页
     ·RT-PCR 产物的回收纯化第23页
     ·DNA 序列测定及序列同源性比较第23页
     ·特异性试验第23-24页
     ·敏感性试验第24页
     ·重复性试验第24页
     ·与普通 RT-PCR 进行比较第24页
   ·结果第24-29页
     ·总 RNA 提取结果第24-25页
     ·巢式 RT-PCR 扩增结果第25页
     ·序列同源性分析第25-26页
     ·特异性试验结果第26-27页
     ·敏感性试验结果第27-28页
     ·重复性试验结果第28页
     ·普通RT-PCR 敏感性试验及与巢式RT-PCR 敏感性的比较第28-29页
3 试验二 半巢式RT-PCR 技术检测绵羊肺腺瘤病毒第29-36页
   ·材料第29-30页
     ·材料来源第29页
     ·主要仪器和设备第29页
     ·主要试剂第29-30页
     ·引物的设计与合成第30页
   ·方法第30-32页
     ·总RNA 的提取第30页
     ·env 基因和 LTR 的 U3 区的半巢式 RT-PCR 扩增第30-31页
     ·RT-PCR 产物的回收纯化第31页
     ·DNA 序列测定及序列同源性比较第31页
     ·特异性试验第31页
     ·敏感性试验第31页
     ·重复性试验第31页
     ·与普通RT-PCR 进行比较第31-32页
   ·结果第32-36页
     ·半巢式RT-PCR 扩增结果第32页
     ·序列同源性分析第32-33页
     ·特异性试验结果第33-34页
     ·敏感性试验结果第34-35页
     ·重复性试验结果第35页
     ·普通RT-PCR 敏感性试验及与半巢式RT-PCR 敏感性的比较第35-36页
4 试验三 斑点杂交技术检测绵羊肺腺瘤病毒第36-43页
   ·材料第36-38页
     ·材料来源第36页
     ·主要仪器和设备第36-37页
     ·主要试剂第37-38页
   ·方法第38-41页
     ·病肺组织DNA 的提取第38页
     ·探针标记第38-39页
     ·探针灵敏度的检测第39页
     ·斑点杂交第39-40页
     ·斑点杂交敏感性试验第40页
     ·斑点杂交特异性试验第40页
     ·斑点杂交重复性试验第40-41页
   ·结果第41-43页
     ·病肺组织 DNA 提取结果第41页
     ·探针灵敏性检测结果第41页
     ·斑点杂交试验结果第41-42页
     ·斑点杂交敏感性试验结果第42页
     ·斑点杂交特异性试验结果第42-43页
     ·斑点杂交重复性试验结果第43页
5 试验四 新疆疑似病羊的巢式 RT-PCR、斑点杂交检测第43-44页
   ·材料来源第43页
   ·方法第43页
     ·巢式 RT-PCR 检测方法第43页
     ·斑点杂交检测方法第43页
   ·结果第43-44页
     ·巢式 RT-PCR 检测方法结果第43-44页
     ·斑点杂交检测方法结果第44页
6 总体讨论第44-47页
7 总体结论第47-48页
致谢第48-49页
参考文献第49-53页
作者简介第53页

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