摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
综述部分 | 第9-19页 |
1 绵羊肺腺瘤病概述 | 第9-13页 |
·流行病学 | 第9-10页 |
·病原学 | 第10-11页 |
·发病机理 | 第11页 |
·临床症状与病理变化 | 第11-12页 |
·诊断与防制 | 第12-13页 |
2 绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的概述 | 第13-17页 |
·JSRV 的分类 | 第13页 |
·JSRV 的理化性质与细胞嗜性 | 第13页 |
·JSRV 的受体 | 第13-14页 |
·JSRV 的基因组结构 | 第14页 |
·JSRV 在绵羊肺腺瘤病中的表现形式 | 第14-15页 |
·enJSRV 与exJSRV 基因结构及编码蛋白的异同 | 第15-17页 |
3 enJSRV 在OPA 中的作用 | 第17-18页 |
4 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
实验部分 | 第19-44页 |
试验一 内源性绵羊肺腺瘤病毒env 基因的克隆及序列分析 | 第19-29页 |
·材料 | 第19-20页 |
·方法 | 第20-24页 |
·正常绵羊肺脏组织基因组 DNA 的提取 | 第20-21页 |
·设计并合成引物 | 第21页 |
·内源性env 基因的 PCR 扩增 | 第21-22页 |
·内源性env 基因在pMD18-T 载体上的克隆 | 第22-23页 |
·应用生物学软件对内源性env 基因进行序列分析 | 第23页 |
·保存菌种 | 第23-24页 |
·结果 | 第24-27页 |
·PCR 扩增结果 | 第24页 |
·PMD18-T-env 重组质粒的酶切鉴定 | 第24-25页 |
·内源性env 基因序列分析 | 第25-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
·小结 | 第28-29页 |
试验二 内源性绵羊肺腺瘤病毒env 基因的原核表达 | 第29-40页 |
·材料 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-33页 |
·内源性env 基因原核表达载体pET-32a 的提取 | 第30-31页 |
·含有重组质粒pMD18-T-env 的菌株复活 | 第31页 |
·重组质粒pMD18-T-env 酶切 | 第31页 |
·内源性env 基因原核表达载体pET-32a 线性化 | 第31页 |
·pET-32a 与内源性env 基因连接 | 第31页 |
·重组质粒pET-32a-env 的转化 | 第31-32页 |
·重组质粒pET-32a-env 的鉴定 | 第32页 |
·诱导表达重组菌pET-32a-env | 第32-33页 |
·结果 | 第33-36页 |
·内源性env 基因原核表达载体pET-32a 的提取结果 | 第33页 |
·菌液PCR 鉴定pET-32a-env 结果 | 第33-34页 |
·酶切鉴定pET-32a-env 结果 | 第34页 |
·重组蛋白表达条件的优化结果 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
·小结 | 第38-40页 |
试验三 内源性env 基因编码表达的蛋白Western Blot 检测和包涵体纯化 | 第40-44页 |
·材料 | 第40页 |
·方法 | 第40-42页 |
·内源性env 基因编码表达的蛋白Western Blot 检测 | 第40-41页 |
·内源性env 基因编码表达的蛋白包涵体纯化 | 第41-42页 |
·结果 | 第42-43页 |
·内源性env 基因编码表达的蛋白Western Blot 检测结果 | 第42页 |
·内源性env 基因编码表达的蛋白包涵体纯化结果 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43页 |
·小结 | 第43-44页 |
全文结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
作者简介 | 第51页 |