中文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-14页 |
前言 | 第14-20页 |
第一章 霍乱弧菌肠毒素B亚单位基因表达载体的构建 | 第20-30页 |
1 材料 | 第20-22页 |
2 方法 | 第22-25页 |
·CTB基因序列的扩增 | 第22页 |
·PCR产物纯化回收 | 第22-23页 |
·T-A克隆 | 第23页 |
·连接产物的转化 | 第23-24页 |
·重组质粒pGEM-CTB的鉴定 | 第24页 |
·构建重组质粒pGEX-4T-CTB | 第24-25页 |
3 结果 | 第25-28页 |
·CTB基因PCR扩增结果 | 第25-26页 |
·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第26-27页 |
·CTB基因序列测定结果 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-30页 |
第二章 重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第30-40页 |
1 材料 | 第30-31页 |
2 方法 | 第31-34页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第31-32页 |
·SDS-PAGE电泳分析 | 第32页 |
·表达条件的优化 | 第32-33页 |
·表达产量分析 | 第33页 |
·Western blotting分析 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-38页 |
·CTB基因在大肠杆菌的表达及优化 | 第34-37页 |
·表达产物的Western blotting分析结果 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
第三章 霍乱弧菌肠毒素B亚单位基因在双歧杆菌的表达 | 第40-51页 |
1 材料 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-44页 |
·双歧杆菌NBIMCC1370标准株的复活 | 第41页 |
·双歧杆菌的16SrRNA的PCR鉴定 | 第41-42页 |
·重组质粒转化双歧杆菌 | 第42页 |
·转化菌的培养 | 第42-43页 |
·转化菌的鉴定 | 第43页 |
·CTB在双歧杆菌中的表达及Western blotting分析 | 第43页 |
·动物实验 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-48页 |
·双歧杆菌镜下形态 | 第44页 |
·双歧杆菌16SrRNA序列PCR扩增结果 | 第44-45页 |
·氨卞青霉素对双歧杆菌的最低抑菌浓度 | 第45页 |
·转化菌鉴定 | 第45-46页 |
·SDS-PAGE及Western blotting分析结果 | 第46-47页 |
·动物实验结果 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
小结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
综述 | 第59-66页 |
攻读硕士期间成果 | 第66-67页 |
附录 | 第67-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
原创性声明及版权使用授权说明 | 第70页 |