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霍乱弧菌肠毒素B亚单位基因在双歧杆菌中克隆及表达的初步研究

中文摘要第1-7页
ABSTRACT第7-14页
前言第14-20页
第一章 霍乱弧菌肠毒素B亚单位基因表达载体的构建第20-30页
 1 材料第20-22页
 2 方法第22-25页
   ·CTB基因序列的扩增第22页
   ·PCR产物纯化回收第22-23页
   ·T-A克隆第23页
   ·连接产物的转化第23-24页
   ·重组质粒pGEM-CTB的鉴定第24页
   ·构建重组质粒pGEX-4T-CTB第24-25页
 3 结果第25-28页
   ·CTB基因PCR扩增结果第25-26页
   ·重组质粒的酶切鉴定结果第26-27页
   ·CTB基因序列测定结果第27-28页
 4 讨论第28-30页
第二章 重组质粒在大肠杆菌中的表达第30-40页
 1 材料第30-31页
 2 方法第31-34页
   ·重组蛋白的诱导表达第31-32页
   ·SDS-PAGE电泳分析第32页
   ·表达条件的优化第32-33页
   ·表达产量分析第33页
   ·Western blotting分析第33-34页
 3 结果第34-38页
   ·CTB基因在大肠杆菌的表达及优化第34-37页
   ·表达产物的Western blotting分析结果第37-38页
 4 讨论第38-40页
第三章 霍乱弧菌肠毒素B亚单位基因在双歧杆菌的表达第40-51页
 1 材料第40-41页
 2 方法第41-44页
   ·双歧杆菌NBIMCC1370标准株的复活第41页
   ·双歧杆菌的16SrRNA的PCR鉴定第41-42页
   ·重组质粒转化双歧杆菌第42页
   ·转化菌的培养第42-43页
   ·转化菌的鉴定第43页
   ·CTB在双歧杆菌中的表达及Western blotting分析第43页
   ·动物实验第43-44页
 3 结果第44-48页
   ·双歧杆菌镜下形态第44页
   ·双歧杆菌16SrRNA序列PCR扩增结果第44-45页
   ·氨卞青霉素对双歧杆菌的最低抑菌浓度第45页
   ·转化菌鉴定第45-46页
   ·SDS-PAGE及Western blotting分析结果第46-47页
   ·动物实验结果第47-48页
 4 讨论第48-51页
小结第51-52页
参考文献第52-59页
综述第59-66页
攻读硕士期间成果第66-67页
附录第67-69页
致谢第69-70页
原创性声明及版权使用授权说明第70页

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