| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 第一章 THRSPΑ基因部分片断克隆及SNP 筛选 | 第15-32页 |
| 1 材料与方法 | 第15-21页 |
| ·材料 | 第15-18页 |
| ·供试样本 | 第15页 |
| ·主要仪器设备 | 第15-16页 |
| ·所需药品、试剂及配制 | 第16-17页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第17-18页 |
| ·试验方法 | 第18-21页 |
| ·鸡血基因组DNA 抽提 | 第18页 |
| ·引物设计与目的片段PCR 扩增及产物检测 | 第18-20页 |
| ·pMD-18T Vector 载体克隆及测序 | 第20页 |
| ·THRSPα基因核苷酸序列同源性分析 | 第20页 |
| ·SNP 筛选及分析 | 第20-21页 |
| ·统计方法 | 第21页 |
| ·单碱基突变对转录因子的影响分析 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-28页 |
| ·THRSPΑ基因序列克隆及其结构分析 | 第21-23页 |
| ·THRSPΑ与THRSPΒ基因序列比较 | 第23页 |
| ·THRSPΑ基因序列多态的确定 | 第23-24页 |
| ·突变可能导致基因转录变化情况分析 | 第24-28页 |
| 3 讨论 | 第28-32页 |
| ·关于鸡THRSP 结构特点及基因重复 | 第28-29页 |
| ·关于高SNP 突变率 | 第29-30页 |
| ·单碱基突变引起的转录因子改变产生的影响 | 第30-32页 |
| 第二章 THRSPΑ、Β基因多态性与性状相关分析 | 第32-49页 |
| 1 材料与方法 | 第32-37页 |
| ·材料 | 第32-34页 |
| ·实验动物 | 第32-34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·SSCP 试剂的配制 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·鸡血基因组DNA 抽提、PCR 扩增及产物检测 | 第34-35页 |
| ·引物设计与合成 | 第35页 |
| ·SNP 多态PCR-SSCP 检测及缺失片断非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-36页 |
| ·高GC 含量DNA 序列的扩增 | 第36-37页 |
| ·肝脏和腹脂组织样总RNA 抽提、反转录和荧光定量PCR | 第37页 |
| ·数据分析 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-45页 |
| ·THRSP 基因变异位点的基因型检测 | 第37-39页 |
| ·THRSPα5’侧翼区-637 G/A 位点SSCP 检测 | 第37-38页 |
| ·THRSPα、β插入、缺失 | 第38-39页 |
| ·突变位点多态与性状的相关 | 第39-45页 |
| ·THRSPα5’侧翼区 G/A 突变与性状的相关 | 第39页 |
| ·THRSPα基因编码区96p 插入、缺失多态与性状的相关 | 第39-44页 |
| ·THRSPβ基因编码区6-126p 插入、缺失多态与性状的相关 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-49页 |
| ·THRSP 多态性与经济性状的关系 | 第45-48页 |
| ·不同品种鸡THRSPΑ基因型和基因频率 | 第48-49页 |
| 第三章 体内THRSPΑ基因组织特异性表达研究 | 第49-59页 |
| 1 材料和方法 | 第50-52页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·组织样品 | 第50页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第50页 |
| ·主要试剂及配制 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·总RNA 的提取、检测和浓度测定 | 第50-51页 |
| ·总RNA 反转录RT-PCR | 第51页 |
| ·实时荧光定量PCR 操作 | 第51-52页 |
| ·数据分析统计 | 第52页 |
| 2 结果分析 | 第52-56页 |
| ·总RNA 提取结果 | 第52-53页 |
| ·THRSP 基因实时荧光定量结果及差异表达分析 | 第53-56页 |
| ·定量PCR 的特异性及扩增曲线样本的重复性 | 第53-54页 |
| ·基因表达定量结果 | 第54-56页 |
| 3 讨论 | 第56-59页 |
| 第四章 甲状腺素刺激对鸡脂肪细胞增殖和THRSPΑ基因表达的影响 | 第59-70页 |
| 1 材料和方法 | 第59-63页 |
| ·材料 | 第59-60页 |
| ·组织样品 | 第59-60页 |
| ·所需仪器设备 | 第60页 |
| ·所需试剂及配制 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-63页 |
| ·前脂肪细胞的分离及培养 | 第60-62页 |
| ·脂肪细胞增殖实验的方案及操作步骤 | 第62页 |
| ·脂肪细胞THRSPα基因对T3 应答实验的方案及操作步骤 | 第62-63页 |
| ·脂肪细胞总 RNA 的提取 | 第63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-67页 |
| ·脂肪细胞形态学观察 | 第63页 |
| ·脂肪细胞诱导分化 | 第63-64页 |
| ·脂肪细胞增殖结果 | 第64页 |
| ·脂肪细胞总 RNA 的提取 | 第64-65页 |
| ·THRSPΑ在脂肪细胞中的表达情况 | 第65-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| ·脂肪细胞的诱导分化 | 第67-68页 |
| ·甲状腺素刺激对脂肪细胞增殖和THRSPΑ表达的影响 | 第68-70页 |
| 第五章 结论 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-82页 |
| 文献综述 | 第82-101页 |
