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中国红豆杉紫杉烷13α-羟基化酶基因的克隆及表达

摘要第1-3页
ABSTRACT第3-6页
符号缩写说明第6-7页
第一章 紫杉醇生物合成研究概况第7-19页
   ·引言第7-8页
   ·紫杉醇生物合成的部位第8页
   ·紫杉醇的生物合成途径第8-11页
   ·紫杉醇生物合成酶类研究第11-16页
   ·细胞培养生产紫杉醇第16-17页
   ·微生物发酵法生产紫杉醇的研究概况第17-19页
   ·紫杉醇生物合成研究的展望第19页
第二章 中国红豆杉紫杉烷13-a羟基化酶的克隆与表达第19-62页
   ·实验材料与设备第19-24页
   ·常规操作第24-34页
   ·实验方法第34-39页
     ·中国红豆杉紫杉烷-13a羟化酶基因的克隆第34-37页
       ·植物基因组 DNA的提取第34页
       ·基因片段的克隆第34-35页
       ·5'-端基因片断的扩增及亚克隆第35页
       ·3'-端基因片段的扩增第35-36页
       ·SOE-PCR消除3'端内含子第36页
       ·重组质粒的鉴定和序列分析第36-37页
       ·拼接反应及全长基因的亚克隆第37页
     ·中国红豆杉紫杉烷-13a羟化酶基因的表达第37-39页
       ·酵母表达载体的构建第37-38页
       ·紫杉烷-13a羟化酶基因在酿酒酵母中的表达第38-39页
   ·结果与分析第39-59页
     ·紫杉烷13a羟化酶基因组DNA的克隆第39-41页
     ·5'端基因的扩增第41-42页
     ·3'端基因的扩增第42-45页
     ·完整阅读框架的拼接第45-46页
     ·基因序列分析第46-54页
     ·表达载体的构建第54-59页
       ·GAPDH启动子及ADH终止子的扩增第54-57页
       ·GAPDH启动子及ADH终止子的功能验证第57页
       ·表达载体pYeDp60/G/130H的构建第57-59页
       ·中国红豆杉紫杉烷13a-羟基化酶基因表达结果检测第59页
   ·结果与讨论第59-61页
   ·小结第61-62页
参考文献第62-67页
致谢第67页

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