摘要 | 第1-3页 |
ABSTRACT | 第3-6页 |
符号缩写说明 | 第6-7页 |
第一章 紫杉醇生物合成研究概况 | 第7-19页 |
·引言 | 第7-8页 |
·紫杉醇生物合成的部位 | 第8页 |
·紫杉醇的生物合成途径 | 第8-11页 |
·紫杉醇生物合成酶类研究 | 第11-16页 |
·细胞培养生产紫杉醇 | 第16-17页 |
·微生物发酵法生产紫杉醇的研究概况 | 第17-19页 |
·紫杉醇生物合成研究的展望 | 第19页 |
第二章 中国红豆杉紫杉烷13-a羟基化酶的克隆与表达 | 第19-62页 |
·实验材料与设备 | 第19-24页 |
·常规操作 | 第24-34页 |
·实验方法 | 第34-39页 |
·中国红豆杉紫杉烷-13a羟化酶基因的克隆 | 第34-37页 |
·植物基因组 DNA的提取 | 第34页 |
·基因片段的克隆 | 第34-35页 |
·5'-端基因片断的扩增及亚克隆 | 第35页 |
·3'-端基因片段的扩增 | 第35-36页 |
·SOE-PCR消除3'端内含子 | 第36页 |
·重组质粒的鉴定和序列分析 | 第36-37页 |
·拼接反应及全长基因的亚克隆 | 第37页 |
·中国红豆杉紫杉烷-13a羟化酶基因的表达 | 第37-39页 |
·酵母表达载体的构建 | 第37-38页 |
·紫杉烷-13a羟化酶基因在酿酒酵母中的表达 | 第38-39页 |
·结果与分析 | 第39-59页 |
·紫杉烷13a羟化酶基因组DNA的克隆 | 第39-41页 |
·5'端基因的扩增 | 第41-42页 |
·3'端基因的扩增 | 第42-45页 |
·完整阅读框架的拼接 | 第45-46页 |
·基因序列分析 | 第46-54页 |
·表达载体的构建 | 第54-59页 |
·GAPDH启动子及ADH终止子的扩增 | 第54-57页 |
·GAPDH启动子及ADH终止子的功能验证 | 第57页 |
·表达载体pYeDp60/G/130H的构建 | 第57-59页 |
·中国红豆杉紫杉烷13a-羟基化酶基因表达结果检测 | 第59页 |
·结果与讨论 | 第59-61页 |
·小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-67页 |
致谢 | 第67页 |